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《GBT5009.111-2003谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、ICS67.040C53霭黯中华人民共和国国家标准GB/T5009.111-2003代替GB/T14929.5-1994谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定Determinationofdeoxynivalenolincerealandcerealproducts2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生部**中国国家标准化管理委员会‘’“GB/T5009.111-2003前言本标准代替GB/T14929.5-1994《谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定方法》。本标准与GB/T14929.5-1994相比主要修改如下:—
2、修改了标准的中文名称，标准中文名称改为:《谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定》;—按GB/T20001.4-2001《标准编写规则第4部分:化学分析方法》对原标准的结构进行了修改。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准起草单位:卫生部食品卫生监督检验所。本标准第一法主要起草人:魏润蕴。本标准第二法主要起草人:阳传和、罗雪云、计融。原标准于1994年首次发布，本次为第一次修订。GB/T5009.111-2003谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定范围本标准规定了谷物及其制品(蛋糕、饼干、面包等)中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON,呕吐毒素)的薄
3、层色谱测定方法及免疫测定方法(ELISA),本标准适用于谷物(小米、玉米、大麦等)及其制品(蛋糕、饼干、面包等)中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DONA吐毒素)的测定。本标准第一法检出限。1m留kg,第二法检出限为。Ing/kg,第一法薄层色谱测定法2原理谷物及其制品中的脱氧雪腐镰刀菌烯醉经提取、净化、浓缩和硅胶C>薄层展开后，加热薄层板。由于在制备薄层板时加人了三氯化铝，使脱氧雪腐镰刀烯醇在365nm紫外光灯下显蓝色荧光，与标准比较。3试剂3，1三氯甲烷。32无水乙醇。3.3甲醇。3.4石油醚的℃一卯℃或30G-600C.3.5乙酸乙酷。3.6乙睛。3.7丙
4、酮。3.8异丙醇。3.9乙醚。310无水乙醚。3.11抓化铝(AICI,‘6H,O):化学纯。3.12中性氧化铝:层析用，经3000C活化4h，置干燥器中备用。3.13活性炭:20g活性炭，用3cool/L盐酸溶液浸泡过夜、抽滤后，用热蒸馏水洗至无氯离子，在1200C烘干备用。3.14硅胶G;薄层层析用。3.15脱氧雪腐镰刀菌烯醇(以下简称DON)标准溶液，精密称取，5.0mgDON，加乙酸乙酷一甲醇(”十1)溶解。转人10mL容量瓶中，用乙酸乙醋一甲醇(19+1)稀释至刻度，此标准溶液含DON0.5mg/mL,吸取此标准溶液。5mL，用乙酸乙醋一甲
5、醉(19十1)稀释至10mL，此溶液每毫升含DON25Kg,4仪器4.1小型粉碎机。4.2电动振荡器。4375mL玻璃蒸发皿。GB/T5009.111-20034.4层析柱:内径2cm，长10cm，不具活塞。4.510mL具塞浓缩瓶:底部具0.2mL刻度尾管。4.6玻璃板:5cmX20cm,4.7薄层涂布器:0.3mm,4.8展开槽:内长25cm，宽6cm,高4cm,4.9紫外光灯:365n,4.10微量注射器:10WL,501-L,4.1150mL平底管。4.12双波长薄层扫描仪:带数据处理机。5分析步骤5.，提取称取20g粉碎试样置于200mL具
6、塞锥瓶中，加8mL水和100mL三抓甲烷一无水乙醇(8+2),密塞。在瓶塞上涂层水，盖严防漏，振荡1h，通过折叠快速定性滤纸过滤，取25mL滤液于75mL玻璃蒸发皿中，置90℃水浴上通风挥干。5.2净化5.2.1液一液分配5.2.1.1谷物:用50mL石油醚分次溶解蒸发皿中的残渣，洗人100mL分液漏斗中，再用20mL(玉米试样用30mL)甲醇一水(4+1)分次洗涤蒸发皿，转人同一分液漏斗中。5.2.1.2谷物制品(蛋糕、饼干、面包等):用100mL石油醚分次溶解蒸发皿中的残渣，洗人250mL分液漏斗中，再用30mL甲醇一水(4+1)分次洗涤蒸发皿，
7、转人同一分液漏斗中。振摇分液漏斗1.5min，静置约15min使分层后，将下层甲醇一水提取液过柱净化，不要将两相交界处的白色絮状物放人柱内。5.2.2柱净化5.2.2.1小麦及其制品:在层析柱下端与小管连结处塞约。.1g脱脂棉，尽量塞紧，先装人。.5g中性氧化铝，敲平表面，再加0.49活性炭，敲紧。将层析柱下端小管插人一橡皮塞，塞在抽滤瓶上，抽滤瓶中放一平底管接受过柱液，将抽滤瓶接上水泵或真空泵，稍稍开启泵，使活性炭压紧，将分液漏斗中的甲醇一水提取液小心地沿管壁加人柱内，控制流速为每15s18滴-20滴(3mL/min)，甲醇一水提取液过柱快完毕时，
8、加人10mL甲醇一水(4+1)淋洗柱，抽滤，直至柱内不再有液体流出。过柱速度控制在2mL/min-3mL/m
