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1、2009年9月色谱Vo.l27No.5September2009ChineseJournalofChromatography518~525多维液相色谱分离技术及其在蛋白质组研究中的应用*朱贵杰,梁振,张丽华,张玉奎(中国科学院大连化学物理研究所,国家色谱研究分析中心,中国科学院分离分析化学重点实验室,辽宁大连116023)摘要:对近年来多维液相色谱技术及其在蛋白质组学研究中的应用进行了系统综述。详细描述了由不同液相色谱模式构建的多维液相色谱系统,并介绍了其在蛋白质组表达谱、翻译后修饰、定量等方面的应用。此外,
2、还对多维液相色谱的发展趋势和前景进行了展望。关键词:多维液相色谱技术;蛋白质组学;综述中图分类号:O658文献标识码:A文章编号:10008713(2009)05051808栏目类别:专论与综述Developmentsandapplicationsofmultidimensionalliquidchromatographyinproteomics*ZHUGuijie,LIANGZhen,ZHANGLihua,ZHANGYukui(NationalChromatographicR.&A.Center,
3、CASKeyLaboratoryofSeparationScienceforAnalyticalChemistry,DalianInstituteofChemicalPhysics,theChineseAcademyofSciences,Dalian116023,China)Abstract:Thisreviewsummarizestherecentdevelopmentsofmultidimensionalliquidchromatography(MDLC)techniques,andtheirapplicati
4、onsinproteomicsstudy,includingexpressionprofiling,posttranslationalmodification,quantitativeanalysis,andsoforth.Inaddition,theprospectandfurtherdevelopmentsofMDLCarediscussed.Keywords:multidimensionalliquidchromatography;proteomics;review蛋白质作为基因的分子表达产物在诸多生物过
5、多种具有不同分离机理的HPLC,包括强阳离子交程中起着至关重要的作用。蛋白质的表达及翻译后换色谱(SCX)、强阴离子交换色谱(SAX)、亲水相修饰具有多样性的特点,且随着时间和空间的不同互作用色谱(HILIC)、尺寸排阻色谱(SEC)、反相液而发生变化。针对如此复杂的体系,发展高分辨的相色谱(RPLC)等的耦联。其中RPLC具有分析速分离分析技术对蛋白质组学的深入研究至关重要。度快、分离效率高、流动相与质谱(MS)兼容等优尽管二维凝胶电泳(2DPAGE)技术凭借其无法比点,通常被用作MDLC的最后一维分离模式。在各
6、拟的分离能力在蛋白质组分离中始终占有重要地维分离模式保留机理正交的前提下,MDLC的峰容位,但该技术仍存在一些难以克服的缺点,如难以分量为各维HPLC峰容量的乘积。离具有重要生物功能的极酸性、极碱性及疏水性蛋1.12DSCXRPLC分离系统[1]白质、操作费时费力、容易造成样品污染或损失在该分离系统中,SCX和RPLC分别根据样品的等。因此发展可与其互补的分离技术具有重要意带电性质和疏水性质进行分离,具有很好的正交性,义。由于和传统的一维液相色谱(HPLC)相比,多是目前蛋白质组研究中最常用的肽段多维分离系
7、统。维液相色谱(MDLC)具有更高的峰容量和分辨率,该系统分为在线联用和离线联用两种分离模式。因此近年来在蛋白质组分离中得到了广泛的应1.1.1在线联用模式[2-7]用。本文对近几年MDLC技术及其在蛋白质(1)柱切换模式组学中的应用进行了系统综述。柱切换模式是将SCX洗脱的组分经捕集柱捕集并除盐后,再通过阀切换将样品转移至第二维1多维液相色谱分离技术[8-12][13]RPLC中进行进一步的分离。袁辉明等采MDLC技术主要通过选择适当的接口,实现对用自动进样器和一套二元梯度泵,构建了2DSCX*通
8、讯联系人:张丽华,博士,研究员,博士生导师.Te:l(0411)84379720,Emai:llihuazhang@dicp.ac.cn.基金项目:国家重大科学研究计划项目(2007CB914100)和国家自然科学基金项目(20775080).收稿日期:20090804第5期朱贵杰,等:多维液相色谱分离技术及其在蛋白质组研究中的应用∀5
