DNA分析与种属鉴定_周斌.pdf

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1、法医学杂志!""!年""月第"#卷第$期!!"#!!"#分析与种属鉴定周斌!张林!吴梅筠!贾怡!吕梅励!梁伟波1四川大学华西基础医学与法医学院法医物证教研室!四川成都L"HH$"@(摘要*种属鉴定在法医学实践中占有重要地位"现行用于法医学种属鉴定的方法主要有形态学#血清学和%&’分析技术"本文就种属鉴定的技术发展以及各种技术的优缺点做一比较!重点讨论了%&’分析技术在种属鉴定中的应用价值"(关键词*法医学$种属鉴定$%&’分析技术(中图分类号*%FQ#+MI(文献标识码*’(文章编号*"HH$)+L"#!IHH!"H$)HI

2、$+)H$!"#$%&’()*(+,-./0(&-)’1(+.(’.)(-*.2.+&*.3-!"#$%&’(!)*+,-&’./$01&234’!156789/1:5;<&’6=>7&’&>676’CD?B1’:&>01C&>&’1E=&><46’$!’&F1B:&53G;<1’HC4IJKLMNG;<&’6O(#%’*4&+**N=;>8;D9;>95;4B9:9D3B9648,3<>3R;<26,;94:62;4>9D343,<>9>MO;4;23,,=3S;A;;438

3、#8,9;5:62B=9>8-286>;CB=;<32;7628=6,6E9D)A3>;5C>;26,6E9D)A3>;5345%&’)A3>;5B;D=49T-;>MN=9>2;S9;U7394,<59>D->>;5B=;%&’)A3>;5B;D=49T-;345;S3,-3B;9B$>S3,-;94>8;D9;>95;4B9:9D3B9646::62;4>9D>D9;4D;M(5(6734)’*:62;4>9D>D9;4D;V>8;D9;>95;4B9:9D3B964V%&’)A3>;5B;D=49T-;种属鉴定在法科学

4、中占有重要的地位!其主要任务是8=9>7C’FG.@等&鉴定法科学生物检材的种属来源!确定检材是否来自人体!人类基因组计划已测出整个人类基因组序列!基因数有时还要确定检材来自何种动物!采用的方法主要有三类"据库中有很多动物的基因组序列!并且动物的种类在不断形态学方法#血清学方法和%&’技术$增加!通过计算机对检材某一段序列和基因数据库序列比形态学方法最早用于种属鉴定!如根据红细胞有无细较!根据两者序列同源性大小!判断它们在种属上接近的程胞核!可以区分人类与鸟类!应用较多的是根据人类与其他度!最终达到种属鉴定的目的("H)"I

5、*&动物的毛发%骨骼在大体形态和显微镜下结构差异!达到种总的说来!形态学方法较粗略!受检测者主观因素影响属鉴定的目的(")$*&血清学方法是种属鉴定的经典方法!根据较大!可检测的检材种类较少!主要为毛发%骨骼等’血清学人体蛋白与动物蛋白间理化性质差异!通过检测检材中是方法应用最广泛!研究最彻底!同时也存在检材的可检测时否有种属特异性蛋白质来达到种属鉴定的目的!包括"沉淀限较短!对检材要求较高!抗血清的特异性不高等不足’反应!凝集反应!酶免疫分析!等电聚焦!高效液相色谱技术%&’技术发展迅速!具有特异性好!可检测腐败%其他方法

6、(+)#*及纤维蛋白溶解实验等!其中环状沉淀反应方法简便!是无法检验的检材(I*&除此外!还有报道检测脂肪%骨骼组织中目前常规检验方法之一&甘油三脂用于种属鉴定("!*&现场检材常受环境因素!如日晒%雨淋%酶解%细菌污染下面对%&’技术在种属鉴定中的应用作一综述&等影响!蛋白质被破坏!不能用血清学方法鉴定种属&与蛋"IJ>20&’基因白质相比!%&’分子相对稳定%特异%易于判断结果!因此!近年来运用%&’技术进行生物学检材的种属鉴定迅速发人类0&’的JHK为20&’!它由LH>和$H>两个亚基组展&较早用于种属鉴定的是’,-

7、序列("*!检测方法有斑点杂成!其中LH>亚基又由IJ>%+MJ>%+>三个亚基组成("*&IJ>交和./0扩增两种!由于’,-序列为人及灵长类动物共20&’基因的大部分序列进化缓慢!构成保守区!而位于保守有!不具有人类特异性!检测出’,-序列!只能表明检材来区中的可变区进化快!种属间变异大!可用于种属鉴定("$*&自灵长类动物&采用两对引物("$*!引物’"+$)’N/N’ON’O/NOONN./0技术为检测%&’序列的多态性提供了快捷%经济///N/)!$!引物P"+$)//N/N’’N/’NN/O/NNN’/)!$!的

8、手段!所需%&’量少!对%&’纯度要求不高!而且程序引物/"+$)’’’/N/NOONOO’OON//ON)!$!引物%"+$)简单&由./0衍生出一系列技术!根据引物选择的不同!主/NN’//’’’’ONOO///’/N’)!$!引物/%%作为内参要有随机引物扩增片段长度多态性12345