GH∕T 1280-2019 蜂胶中咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、短叶松 素、松属素、短叶松素3-乙酸酯、白杨素 和高良姜素含量的测定 反相高效液相色谱法.pdf

《GH∕T 1280-2019 蜂胶中咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、短叶松 素、松属素、短叶松素3-乙酸酯、白杨素 和高良姜素含量的测定 反相高效液相色谱法.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、ICS65.140B47中华人民共和国供销合作行业标准GH/T1280—2019蜂胶中咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、短叶松素、松属素、短叶松素3-乙酸酯、白杨素和高良姜素含量的测定反相高效液相色谱法Determinationofcaffericacid,p-coumaricacid,ferulicacid,pinobanksin,pinocembrin,3-O-acetylpinobanksin,chrysinandgalangininpropolis-Reversed-phasehighperformanceliquidchromatographymethod2019-1

2、1-28发布2020-03-01实施中华全国供销合作总社发布GH/T1280-2019前言本标准按照GB/T1.1－2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》的编写规则。本标准由中华全国供销合作总社提出。本标准由全国蜂产品标准化工作组归口。本标准起草单位：浙江大学、杭州蜂之语蜂业股份有限公司、杭州天厨蜜源保健品有限公司、缙云县绿纯养蜂专业合作社。本标准主要起草人：胡福良、张翠平、周萍、王磊、胡元强。1GH/T1280-2019蜂胶中咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、短叶松素、松属素、短叶松素3-乙酸酯、白杨素和高良姜素含量的测定反相高效液相色谱法1范围本标准规定了蜂胶

3、中咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、短叶松素、松属素、短叶松素3-乙酸酯、白杨素和高良姜素的反相高效液相色谱检测方法。本标准适用于蜂胶及蜂胶乙醇提取物中咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、短叶松素、松属素、短叶松素-3-O-乙酸酯、白杨素和高良姜素的测定。本标准液相色谱的检出限：咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、短叶松素、松属素、短叶松素3-乙酸酯、白杨素和高良姜素分别为0.41、0.39、1.20、0.29、1.11、1.49、0.86、0.91μg/mL。本标准液相色谱的定量限：咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、短叶松素、松属素、短叶松素3-乙酸酯、白杨素和高良姜素分别为1.35、2.16、4

4、.00、0.98、3.69、4.97、2.88、3.03μg/mL。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1蜂胶propolis工蜂采集树脂等植物分泌物与其上颚腺、蜡腺分泌物等混合形成的胶粘性物质。4原理2GH/T1280-2019试样经乙醇提取，浓缩，再溶解于甲醇，用反相高效液相色谱仪紫外检测器在280nm处检测，外标法定量。5试剂与材料实验室用水应

5、符合GB/T6682规定的一级水。除非另有规定，所有试剂均为分析纯。5.1甲醇：色谱纯。5.2乙醇。5.3乙酸，色谱纯。5.4流动相：甲醇（5.1）和1%乙酸（5.3）梯度洗脱。5.5咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、短叶松素、松属素、短叶松素3-乙酸酯、白杨素和高良姜素标准品：纯度≥98%5.6咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、短叶松素、松属素、短叶松素3-乙酸酯、白杨素和高良姜素标准储备液：准确称取适量的每种标准物质（5.5），用甲醇溶液（5.1）配成1.0mg/mL的标准储备溶液，于4℃冰箱保存，可保存6个月。5.7咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、短叶松素、松属素、短叶松素3-乙酸

6、酯、白杨素和高良姜素标准工作液：吸取适量1.0mg/mL的标准贮备液（5.6），用甲醇溶液（5.1）分别稀释成适当浓度的标准工作溶液，现用现配。5.8滤膜：0.45µm，有机系。6仪器和设备6.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器。6.2粉碎机。6.3旋转蒸发仪。6.4超声波清洗器。7试样准备与保存7.1试样的准备取代表性试样适量，冷冻，粉碎，混匀，作为备检试样。7.2试样保存将试样于0℃～4℃保存。3GH/T1280-20198操作步骤8.1蜂胶样品预处理准确称取10.0g（精确到0.1g）蜂胶试样，用30mL95%乙醇超声提取，每次用时15min，共提取3次，合并滤液，定

7、容至100mL（V1）。取10mL（V2）减压蒸干，用25mL（V3）甲醇超声溶解并定容，0.45μm滤膜过滤，供测定。8.2色谱条件色谱柱：SepaxHP-C18，柱长150mm，内径4.6mm，粒度5µm；或性能相当的色谱柱。流动相流速：1.0mL/min。梯度洗脱：洗脱程序参见附录A表A.1。检测波长：280nm。柱温：33℃。进样量：5µL。8.3测定取5µL样品溶液（8.1）、标准工作溶液（5.7）分别进样分析，绘制标准曲线，外标法定量。色谱图参见附录A图A.1。9结果计算与表示9.1结果计算试样中咖啡酸、p-香豆酸