2019-2020年高中生物专题5生态工程模块综合检测新人教版选修

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1、2019-2020年高中生物专题5生态工程模块综合检测新人教版选修1．(10分)胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体，图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示β－半乳糖苷酶与胰岛素A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题。图1图2(1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是________。(2)图1中启动子是__________________酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达；氨苄青霉素抗性基因的作用是_______________

2、_______________________________________________________________________________________________。(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有__________________________________________________________________________。(4)β－半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达，可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，其意义在于_________________________

3、______________________________________________________________________________________。(5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键，用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链，且β－半乳糖苷酶被切成多个肽段，这是因为________________________________________。(6)根据图2中胰岛素的结构，请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是____________，理由是___________

4、__。答案：(1)终止子(2)RNA聚合　作为标记基因，将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来(3)限制酶和DNA连接酶(4)防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解(5)β－半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸，而胰岛素A、B链中不含甲硫氨酸(6)至少2个　两条肽链的一端各有一个游离的氨基，氨基酸R基团中可能还含有游离的氨基2．(10分)GDNF是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示)，并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请据图回答下列问题。(1)在分离和培养

5、大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是________________。(2)构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的________限制酶进行酶切。(3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有3种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式，选择HpaⅠ酶和BamHⅠ酶对筛选得到的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第________泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。(4)将正向连接的表

6、达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的________与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定密度时，需进行________培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。解析：(1)动物细胞间的物质主要成分是蛋白质，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，目的是使组织中的细胞分散成单个细胞。(2)据图1可知，GDNF基因两端和载体上都有XhoⅠ限制酶的酶切位点。(3)据图1可知，用HpaⅠ和BamHⅠ限制酶对三种载体进行酶切，单个载体自连只有HpaⅠ限制酶的酶切位点，得到6000bpDN

7、A的片段；正向连接重组载体有HpaⅠ和BamHⅠ限制酶的酶切位点，得到700bpDNA的片段和6000bpDNA的片段；反向连接重组载体有HpaⅠ和BamHⅠ限制酶的酶切位点，得到200bpDNA的片段和6500bpDNA的片段。(4)检测目的基因是否成功表达，可采用抗原－抗体杂交法。培养的原代细胞贴满瓶壁重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，这样的培养过程通常称为传代培养。传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去，科研上使用的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。答案：(1)使细胞分散开　

8、(2)XhoⅠ　(3)②　(4)抗体　传代3．(10分)科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。(1)由过程①获得的A为_________________________________。(2)在核移植