食品微生物课程实习

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1、实验八食品中含菌总数的检测（新修改）一、实验目的1.掌握食品安全国家标准GB4789.2—2010食品微生物学检验菌落总数测定方法。2.掌握国家标准GB4789.2—2010菌落总数的计算方法与报告方式。3.学习食品中检验菌落总数的意义与方法。二、实验原理菌落总数aerobicplatecount，食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。PCA平板分离法：该方法操作简便，其基本原理：胰蛋白胨提供碳源和氮源；酵母膏粉提供B族维生素；葡萄糖提供能源；琼脂是培养基的凝固剂。选择恒

2、温36℃±1℃培养48h±2h（水产品30℃±1℃培养72h±3h）普遍用于微生物的分离与纯化。检样25g(mL)样品+225mL稀释液，均质10倍系列稀释选择2～3个适宜稀释度的样品匀液，各取1mL分别加入无菌培养皿内每皿中加入15mL～20mL平板计数琼脂培养基，混匀培养计数各平板菌落数计算菌落总数报告图菌落总数的检验程序三、实验步骤四、实验结果（结果可手写或者打印粘贴）2009食品集团有限公司一/二分公司产品检验原始记录（菌落总数）（每组检测3个样品，模拟）（一/二分公司=1/2班）第n组2010年月日品名1生产批号规格型号检验员感官评测色泽

3、：形态：组织：气滋味：杂质：菌落总数(GB4789.2-2010)稀释度10-？10-？10-？空白对照CFU平均数报告值（APC）培养条件培养温度培养时间备注：品名2生产批号规格型号检验员感官评测色泽：形态：组织：气滋味：杂质：菌落总数(GB4789.2-2010)稀释度10-？10-？10-？空白对照CFU平均数报告值（APC）培养条件培养温度培养时间备注：品名3生产批号规格型号检验员感官评测色泽：形态：组织：气滋味：杂质：菌落总数(GB4789.2-2010)稀释度10-？10-？10-？空白对照CFU平均数报告值（APC）培养条件培养温度培

4、养时间备注：五、讨论分析1.试简述GB4789.2-2010菌落形成单位（colony-formingunits,cfu）的计算方法与报告方式（参考GB4789.2-20107结果与报告缩写）2.试简述食品中细菌数量的食品卫生学意义一是可作为食品被微生物污染程度的标志。食品中细菌数量越多，说明食品被污染的程度越重、越不新鲜、对人体健康威胁越大。相反，食品中细菌数量越少，说明食品被污染的程度越轻，食品卫生质量越好。在我国的食品卫生标准中，针对各类不同的食品分别制定出了不允许超过的数量标准，借以控制食品污染的程度。二是可以用来预测食品可存放的期限，食品

5、中细菌数量越少，食品可存放的时间就越长，相反，食品的可存放时间就越短。由于食品的性质、处理方法及存放条件的不同，以致对食品卫生质量具有重要影响的细菌种类和相对数量比也不一致，因而目前在食品细菌数量和腐败变质之间还难于找出适用于任何情况的对应关系。同时，用于判定食品腐败变质的界限数值出入也较大。……六、改进实验建议实验九食品中大肠杆菌群的检测（新修改）一、实验目的1.掌握食品安全国家标准GB4789.3-2010食品微生物学检验——大肠菌群计数第二法——大肠菌群平板计数法。2.了解食品中大肠杆菌群检测的意义。二、实验原理平板稀释分离：应用结晶紫中性红

6、胆盐琼脂（VRBA）与检样液充分混匀，待琼脂凝固后再加3mL～4mLVRBA覆盖平板表层，翻转平板置于36℃±1℃培养18h～24h培养。选取菌落数在15CFU～150CFU之间的平板，分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落。典型菌落为紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径为0.5mm或更大36℃±1℃48h±2h36℃±1℃48h±2h检样25g(mL)样品+225mL稀释液，均质10倍系列稀释选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液，接种VRBA平板计数典型和可疑菌落BGLB肉汤报告结果图2大肠菌群平板计数法检验程序证实试验：从VRBA平板

7、上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落，分别移种于BGLB肉汤管内，36℃±1℃培养24h～48h，观察产气情况。凡杜汉氏发酵管BGLB肉汤产气，即可报告为大肠菌群阳性。三、实验步骤四、实验结果（结果可手写或者打印粘贴）2009食品集团有限公司一/二分公司产品检验原始记录（大肠菌群）（每组检测3个样品，模拟）第n组2010年月日品名1生产批号规格型号检验员大肠菌群(GB4789.3-2010)第二法：大肠菌群平板计数法稀释度10-？10-？10-？空白对照CFU典型菌落平均数（个）证实试验：10个不同类型的典型和可疑菌落于BGLB产气管数（管）报告值

8、（CFU）培养条件培养温度培养时间备注：品名2生产批号规格型号检验员大肠菌群(GB4789.3-2010)第二法：大肠菌群