复方二精灵多糖分离纯化及结构初步探究

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1、复方二精灵多糖分离纯化及结构初步探究作者：程玉洁，徐玲玲，梅之南【摘要】目的从复方二精灵中分离多糖并研究其结构。方法以黄精和枸杞子为材料，经热水提取、乙醇沉淀得二精灵多糖，通过二乙氨基乙基纤维素柱、凝胶渗透柱层析分离纯化，并采用高效液相色谱、红外吸收光谱、气相色谱进行结构分析。结果得两个多糖组分2几I和2JLII,2几I主要是由阿拉伯糖、木糖、半乳糖、甘露糖和葡萄糖组成，相对分子量为811000；2JLII由半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成，相对分子量为2000o结论首次从复方二精灵中提取分离出两种纯多糖，该实验方法为以后二精灵多糖的研究提供了基础。【关键词】目的从复方二精灵中分离多糖并研究其结

2、构。方法以黄精和枸杞子为材料，经热水提取、乙醇沉淀得二精灵多糖，通过二乙氨基乙基纤维素柱、凝胶渗透柱层析分离纯化，并采用高效液相色谱、红外吸收光谱、气相色谱进行结构分析。结果得两个多糖组分2几I和2JLII,2几I主要是由阿拉伯糖、木糖、半乳糖、甘露糖和葡萄糖组成，相对分子量为811000；2JLII由半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成，相对分子量为2000o结论首次从复方二精灵中提取分离出两种纯多糖，该实验方法为以后二精灵多糖的研究提供了基础。Abstract：ObjectiveThepolysaccharideswereseparatedfromcompoundErjinglingandits

3、struetureswerestudied.MethodsTheCompoundErjinglingpolysaccharideswasextractedfromRhizomeofPolygonatumKingiarnumandFructusLycii,byhotwaterextraction,ethanolprecipitationisolated,purifiedthroughDEAE-cellulose,gelpermeationcolumnchromatographyandthestructureswereanalyzedbyHPLC,IRandGC.ResultsTwopolys

4、accharidecomponents2JLIand2JLIIwereobtained,2JLIwasmainlycomposedofarabinose,xylose,galactose,mannoseandglucose,anditsrelativemolecularweightwas811000.2JLIIwascomposedofgalactose,glucoseandmannose,anditsrelativemolecularweightwas2000.Conclusiemitwasthefirsttimetoextractandisolatetwokindsofpurepoly

5、saccharidefromcompoundErjingling,andtheexperimentaimethodsprovidfoundationfortheresearchofCompoundErjinglingpolysaccharideafterward.Keywords：CompoundErjingling；Polysaccharide；HPLC；IR；GC复方二精灵是由等量的枸杞子FructusLycii和黄精RhizomeofPolygonatumKingiarnum配伍组成。最早收载于《圣济总录》，具有“助气固精，补填丹田，活血驻颜，长生不老”之功效［1］。本课题组前期研究

6、发现，复方二精灵多糖可显著抑制急性分离的海马神经元电压门控性钠通道电流峰值，使钠通道半激活电压向去极化方向偏移，有效阻止了海马细胞内钙积聚，在一定程度上减弱了海马细胞内钙超载所致海马细胞损伤，并可能通过阻断兴奋性谷氨酸受体，调节Bcl-2,Bax蛋白的表达，有效的阻止Glu诱导的海马神经元凋亡［2］。为了研究其作用机理，本课题组对复方二精灵多糖进行了分离纯化，并对其结构进行了初步研究。1材料与仪器1.1药材与试剂滇黄精，云南产；宁夏枸杞，宁夏产；DEAE-52、SephadexG-200、CMSephadexC-50,Pharmacia进口分装；透析袋，截留分子量为1000；苯酚经过重蒸，

7、其它试剂均为国产分析纯。1.2仪器Agilent6890N气相色谱仪(Agilent)；HP-5石英毛细管柱；WFZUV-2000紫外可见分光光度计(尤尼柯仪器有限公司)；Agilent1100高效液相色谱仪(RID检测器、自动进样器)(Agilent)；色谱柱：AqueousGPCStartUpKit300mmX7.5mm(Agilent)；GPC色谱工作站(Agilent)；NEXUS470智能型傅立叶红外光谱仪（美