曼氏无针乌贼过氧化物还原酶peroxiredoxin 1基因的克隆【毕业设计】

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1、本科毕业设计（20__届）曼氏无针乌贼过氧化物还原酶peroxiredoxin1基因的克隆目录中英文摘要1引言12Prx1基因全长的克隆及序列分析22.1材料与方法22.1.1实验试剂及配置方法22.1.2主要仪器设备22.2曼式无针乌贼总RNA的提取22.2.1曼式无针乌贼目标基因片段的获得32.2.2曼氏无针乌贼3`RACE末端扩增32.3PCR产物的切胶纯化回收53实验结果63.1曼式无针乌贼总RNA的提取63.23’RACE扩增曼式无针乌贼Prx1基因3’末端63.3SmPrx1基因的核苷酸分析74总结11

2、4.1结论114.2创新点114.3展望12参考文献13附录14摘要摘要：曼氏无针乌贼资源数量较大，作为主要经济鱼种是浙江沿海传统捕捞对象。但由于过度捕捞，乌贼的资源锐减。因此，对曼氏无针乌贼进行生化分子机制的研究工作显得尤为迫切。本研究采用大规模EST测序方法，结合末端快速扩增（rapidamplificationofcDNAends，RACE）技术从曼氏无针乌贼墨囊中克隆到过氧化物还原酶1（proxiredoxin1，SmPrx1）基因的cDNA序列全长；Prx1基因的cDNA全长为1052bp，5`UTR为7

3、9bp，3`UTR为352bp，开放阅读框（openreadingframe，ORF）为621bp，编码206个氨基酸。mRNA3`端具有推测的多聚腺苷酸加尾信号（polyadenylationsignal）AATAAA和polyA尾巴。Prx1的预测分子量为24.4kDa，理论等电点为6.63。关键词：曼氏无针乌贼；过氧化物还原酶1；基因克隆；基因表达AbstractABSTRACT：SepiellamaindronideRochebruneisanimportanteconomicfisheryresource

4、s,isZhejiangcoastaltraditionalfishingobject.Butduetooverfishing,thesquid'sresourcesdownsharply.Therefore,SepiellamaindronideRochebruneofbiochemicalresearchonmolecularmechanismsisparticularlyurgent.ThisstudyadoptsextensiveESTsequencingmethods，rapidamplification

5、ofcDNAendstechnologyfromSepiellamaindronideRochebrune’slivercloneproxiredoxin1gene’scDNAsequencefull-length；Prx1genecDNAfulllength1052bp,5`UTRwas79bp,3`UTRis352bp,openreadingframe(openreadingframe,ORF)is621bp,encoding206aminoacids.mRNA3`endofaputativepolyadeny

6、lationpolyadenylationsignal(polyadenylationsignal)AATAAAandthepolyAtail.Prx1thepredictedmolecularweightof24.4kDa,isoelectricpointof6.63.KEYWORDS：sepiellamaindronideRochebrune；peroxiredoxin1；genecloning；geneexpression1引言曼氏无针乌贼SepiellamaindronideRochebrune，俗称墨鱼，

7、属软体动物门（Mollusca）、头足纲（Cephalopoda）、二腮亚纲（Dibranchia）、十腕目（Decapoda）、乌贼超科（Sepiacea）、乌贼科（Sepiidae）、无针乌贼属（Sepiella），是沿海广温广布种，广泛分布于我国渤海、黄海、东海、南海以及日本东京湾、富山湾以西、韩国、马来群岛、菲律宾群岛、苏联远东海和印度洋海域等，被称为东海“四大海产”之一。乌贼的经济价值很高，可食部分约占总体的92%，肉质鲜嫩脆滑；雄性生殖腺干品称为“墨鱼穗”，雌性缠卵腺称为“墨鱼蛋”，均为海味佳品（董正之

8、,1989）。但由于过度捕捞和生态恶化，曼氏无针乌贼资源急剧衰退，对曼氏无针乌贼进行生化分子机制等基础生物学研究变得越来越重要。乌贼墨汁储存于墨囊中，王春琳等对曼氏无针乌贼墨囊进行了组织学及墨汁形成的超微结构，研究表明墨囊壁由外膜、肌肉层和黏膜三部分组成，具有凝血功能，作为一种中药被用于治疗多种妇科疾病，如功能性子宫出血、子宫痉挛和早起虚弱等病症。而乌贼墨汁