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《曼氏无针乌贼peroxiredoxin4的克隆与表达【开题报告】》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、毕业论文开题报告生物工程曼氏无针乌贼peroxiredoxin4的克隆与表达一、选题的背景与意义Peroxiredoxin4是新近发现的抗氧化酶家族成员中的一个亚类,具有独特的催化特性和可逆性过氧化循环,广泛存在于各种生物体内。近年来Peroxiredoxin4研究发展迅速,Peroxiredoxin4的抗氧化性以及Peroxiredoxin4在不同生物组织中的分布广泛性决定了它在动植物以及微生物体内有重要而特殊的生物学功能。它们在科学的多个领域中均有重要应用价值,在不同的生物组织中作用机制各不相同。Peroxiredoxin4在细胞内主要起抗氧化
2、和调节过氧化氢介导的信号转导作用;参与细胞的增殖与分化;增强NK细胞的活性;保护自由基敏感蛋白;参与血红素的代谢还参与细胞周期进程以及发挥分子伴侣作用。在生物养殖、生物工程、生物制药、生理活动调控、疾病防治、研究寄生性原虫疫苗等方面展示出广阔的应用前景。而关于曼氏无针乌贼的peroxiredoxin4的作用目前尚不明确,更没有人做过关于它的研究。所以对曼氏无针乌贼peroxiredoxin4进行克隆与表达,研究它的特殊生物学功能具有重大的意义。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题:1.克隆peroxiredoxin4cDNA全长及其氨基酸序列分析2
3、.检测peroxiredoxin4在不同组织中表达情况和分析3.进行peroxiredoxin4关键结构域的重组及其电泳检测4.不同环境因子影响后的表达情况5.所得到重组蛋白的活性检测三、研究的方法与技术路线:1.Peroxiredoxin4全长cDNA序列的克隆与获得↓2.基因的核苷酸分析和氨基酸序列分析↓3.重组表达载体的构建及转化宿主菌↓4.重组蛋白的诱导表达↓5.表达产物的初步分析↓6.重组蛋白的电泳检测↓7.含有重组质粒的宿主菌的扩大培养和分离纯化↓8.重组蛋白的浓度和活性测定二、研究的总体安排与进度:2010.10-2010.11毕业论
4、文选题2010.11-2010.12进行文献查阅和资料收集,制定具体研究计划和试验方案。2010.12-2010.12撰写综述和开题报告及任务书。2010.12开题报告答辩2011.1-2011.2实地采样、试验研究、数据处理和分析2011.2-2011.3完成外文翻译2011.3-2011.4论文撰写2011.4-2011.5提交并答辩五、主要参考文献:[1]章波,向渝梅,白云.抗氧化蛋白peroxiredoxin家族研究进展[J].生理科学进展,2004,35(4):352-355.[2]RheeSG,KangSW,ChangTS,etal.P
5、eroxiredoxin,anovelfamilyofperoxidase[J].IUBMBLife,2001,52(2):35-41.[3]史河秀,王世鄂.2-Cysperoxiredoxins的研究进展[J].解剖学研究,2007,29(5):380-383.[4]MizusawaH,Ishii,T,BannaiS.PeroxiredoxinI(macrophage23kDastressprotein)ishighlyandwidelyexpreasedintheratnervoussystem[J].NeurosciLett,2000,283
6、(4):57-60.[5]ImmenschuhS,Baumgart-VogtE,TanM,etal.Differentialcelluarandsubcellularlocalizationofhemeblindingprotein23/peroxiredoxinIandhemeoxygenaselinratliver[J].JHistochemCytochem,2003,51(8):1621-1631.[6]张成林,李建远.抗氧化蛋白peroxiredoxin6研究进展[J].医学研究杂志,2010,39(6):121-124.[7]王蔚,刘芸等
7、.过氧化物氧化还原蛋白家族的功能与调节机制[J].生命的化学,2010,2(4)184-188.[8]JangHH,LeeKO,ChiYH,etal.Twoenzymesinone,twoyeastperoxiredoxinsdisplayoxidativestressdependentswithingfromaperoxidasetoamolecularchaperonefunction[J].Cell,2004,117(5):625-635.[9]JangHH,KimSY,ParkSK,etal.Phosphorylationandconcom
8、itantstructuralchangesinhuman2-CysperoxiredoxinisotypeIdiffer