地衣芽孢杆菌变异株发酵工艺研究【毕业设计】

地衣芽孢杆菌变异株发酵工艺研究【毕业设计】

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1、本科毕业设计(20__届)地衣芽孢杆菌变异株发酵工艺研究目录中英文摘要1引言11.1研究目的11.2研究意义11.3研究历史与现状11.3.1蛋白酶特性研究11.3.2地衣芽孢杆菌的应用11.3.3地衣芽孢杆菌应用前景21.4拟解决的问题22材料和方法22.1菌种22.2主要试剂和仪器22.2.1主要试剂22.2.2主要仪器22.3培养基22.3.1种子斜面培养基32.3.2初始发酵培养基32.4培养方法和发酵条件32.4.1种子培养方法32.4.2发酵培养方法32.5菌体生长测定32.6蛋白酶活力测定32.7蛋白质浓度的测定33结

2、果与讨论33.1酪氨酸和蛋白质标准曲线33.2发酵过程中参数测定43.2.1菌体生长情况43.2.2pH值变化43.2.3蛋白酶比活力43.3单因素实验43.3.1碳源种类43.3.2碳源量53.3.3氮源种类53.3.4氮源量63.3.6初始pH值73.3.7接种量73.4响应面分析法对发酵条件进行优化83.4.1Plackett-Burman设计法83.4.2响应面法93.4.2.1响应面实验设计93.4.2.2多元二次回归拟合及方差分析93.4.2.3验证实验104结论12致谢13参考文献14摘要:本实验对具有蛋白酶合成能力的

3、地衣芽胞杆菌的发酵条件进行了优化。首先采用Plackett-Burman实验设计对影响蛋白酶合成能力的发酵条件进行筛选。运用单因素实验和3因素2水平响应面分析方法对其培养基进行改进,对地衣芽孢杆菌发酵条件进行优化以得到最优的碳源种类、碳源量、氮源种类、氮源量、金属离子、初始pH、接种量。然后将筛选得到的3个关键影响因素进行响应面分析,通过对二次多项回归方程求解得到该菌的最佳培养条件。3种因素对地衣芽孢杆菌发酵影响的显著性顺序为:初始pH>浒苔>NaH2PO4,培养基的最佳条件为:初始pH6.66,浒苔4.65%,NaH2PO40.0

4、274%。蛋白酶比活力的最大预测值为66354.7U/g蛋白,实验验证值为66966.37U/g蛋白。试验得出了地衣芽胞杆菌发酵培养基的最佳配比及最佳培养条件,在此条件下培养,收获菌体量大大提高,降低了生产成本,更有利于其大规模工业化生产。关键词:地衣芽孢杆菌;蛋白酶;发酵条件;响应面法Abstract:ThisexperimentstudiedtheoptimizationoffermentationconditionsofBacilluslicheniformisforthebiosynthesisofproteases.The

5、effectsontheactivitywerenotedwithPlackett-Burmandesign,andtheexperimentinthemediumimprovementforBacilluslicheniformiswasdonewiththesingle-factororthogonaltestwith3factorsand2levelsforcarbonsource,nitrogensource,carbonconcentration,nitrogenconcentration,metalions,initia

6、lpHandinoculationamount.Itthenrevealedwiththemethodofresponsesurfacemethodology(RSM).TheorderofthreekindsoffactorssignificantlyimpactingthefermentationofBacilluslicheniformiswasasfollows:initialpH>enteromorphaprolifer>NaH2PO4,andinitialpH6.66,enteromorphaprolifer4.65%,

7、NaH2PO40.0274%areoptimumfortheactivityofproteases,withapredictedactivity66354.7U/gpr,andtheexperimentalproteasesactivity66966.37U/gpr.ThebestBacilluslicheniformisfermentationmediumandcultureconditionwereobtained,underthecondition,theharvestedbiomasswasgreatlyimprovedan

8、dtheproductioncostwasreduced,whichwasmoreconducivetoitslarge-scaleindustrialproductionKeywords:Bacilluslicheniformis;

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