桑椹酒渣中花青素提取

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1、桑椹酒渣中花青素提取1材料与方法1.1材料桑椹果酒酒渣。1.2试剂药品试验所用95%乙醇、浓盐酸、30%过氧化氢、Na2SO3等试剂均为分析纯。1.3主要仪器电子分析天平、分光光度计、旋转蒸发仪、酸度计、高速冷冻离心机、电热恒温水浴锅等。1.4方法（稀HCl+95%乙醇提取）样品称量，用提取剂提取，过滤（减压过滤/板框过滤），所得的提取液按一定比例稀释（pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀）释后在分光光度计上测出OD值，以OD值代表桑椹红色素的含量。1.4.1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较分别以75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HC

2、l+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl+95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。1.4.2不同物料与提取剂之比对花青素提取的影响（此时用提取效果最好的提取剂）。1.4.3温度对提取效果的影响以最佳结果作为桑椹提取剂，分别于60、50、40、30、20℃下提取1h。1.4.4提取时间对提取效果的影响每隔20分钟取样测得OD值。1.4.5正交实验1.4.6得率试验称取一定量样品，经提取后。提取液经旋转蒸发仪蒸发，真空干燥，求得率。方法一稀HCl+95%乙醇提取1不同溶剂的吸光

3、光谱及提取效果比较固定浸提温度、提取时间、液料比，分别85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl+95%乙醇（1：1）为提取剂进行浸提试验，色素提取液分别采用pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀释一定倍数(吸光值在0.2~0.8之间)，将稀释液静置15min，分别测定两种样品稀释液ODλmax和700nm处的吸光值A。按公式计算桑椹花色苷含量，分析提取溶剂对花色苷提取量的影响。注：ODλmax的确定分别以85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1

4、）、0.10%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl+95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。2不同物料与提取剂之比对花青素提取的影响（此时用提取效果最好的提取剂）。分别称取2.0g酒渣，按液料比5、10、15、20、25、30加入相应体积的浸提溶剂，在40℃下避光提取2h后，抽滤、离心(3000rpm，10min)。取1mL清液，用pH1.0和pH4.5的缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公

5、式计算花色苷含量，并对液料比作图，分析液料比对色素提取量的影响。3温度对提取效果的影响分别称取2.0g酒渣置入5个50mL的三角瓶中，各加入浸提溶剂，搅拌5min，用封口膜将瓶口密封并用铝箔纸包裹好以避光。分别置于30℃、40℃、50℃、60℃、70℃的恒温水浴上提取2h后，抽滤、离心(3000rpm，10min)。取1mL上清液，用pH1.0和pH4.5的缓冲液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对温度作图，分析温度对色素提取量的影响。4提取时间对提取效果的影响每隔30分钟

6、取样测得OD值。用pH1.0和pH4.5的缓冲液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对时间作图，分析提取时间对色素提取量的影响。5桑椹红色素酸性乙醇溶剂提取条件的正交试验根据单因素试验的结果，选取L9(34)正交试验表，以浸提溶剂中乙醇浓度、浸提时间、浸提温度、液料比为因素，安排4水平做正交试验，以确定提取的最佳条件。方法二超声波辅助提取桑椹红色素1超声波功率对红色素提取的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份，按液料比？分别加入？提取液，在30℃温度下，分别以200～700W

7、超声功率萃取20min。抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲液稀释(吸光值控制在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对超声功率作图，分析功率对色素提取量的影响。2超声温度对色素提取量的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份，按液料比？分别加入？提取液，以？W超声功率分别在20～60℃温度下萃取20min。抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm姗处的吸光值A，按公式计算花色苷

8、含量，并对超声温度作图，分析温度对色素