抗肿瘤药效学指导原则

《抗肿瘤药效学指导原则》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、抗肿瘤药物药效学指导原则(讨论稿)1基本原则抗肿瘤药物可分为：(1)细胞毒类药物(cytotoxicagent)：包括干扰核酸和蛋白质合成、抑制拓扑异构酶及作用于微管系统的药物等；(2)生物反应调节剂(biologicalresponsemodifier)；(3)肿瘤耐药逆转剂(resistancereversalagent)；(4)肿瘤治疗增敏剂(oncotherapysensitizer)；(5)肿瘤血管生成抑制剂(tumorangiogenesisinhibitor)；(6)分化诱导剂(differentiationinducingagent)

2、；(7)生长因子抑制剂(growthfactorinhibitor)；(8)反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide)等。抗肿瘤药物的药效学包括体内外抗肿瘤试验，评价药物的抗癌活性时，以体内试验结果为主，同时参考体外试验结果以做出正确的结论。I类抗肿瘤新药应进行药物作用机制的初步研究。2体外抗肿瘤活性试验2.1试验目的(1)对候选化合物进行初步筛选；(2)了解候选化合物的抗瘤谱；(3)为随后进行的体内抗肿瘤试验提供参考，如剂量范围、肿瘤类别等。2.2试验方法选用10-15株人癌细胞株，根据试验目的和所选用的方法选择相应的细胞系及

3、适量的细胞接种浓度，按常规细胞培养法进行培养；推荐使用四氮唑盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazoliumbromide,MTT]还原法、XTT{2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulphonyl)-5-[carboxanilide]-2H-tetrazoliumhydroxide}还原法、磺酰罗丹明B(sulforhodamineB,SRB)染色法、或51Cr释放试验、集落形成法等测定药物的抗癌作用。药物与细胞共培养的时间一般为48-72小时，贴壁细胞需先贴壁2

4、4小时后再给药。试验应设阳性及阴性对照组，阳性对照用一定浓度的标准抗肿瘤药，阴性对照为溶媒对照。2.3评价标准以同一样品的不同浓度对肿瘤细胞抑制率作图可得到剂量效应曲线，然后采用Logit法计算半数有效浓度(IC50值或EC50值)。体外试验至少重复一次。3体内抗肿瘤试验体内抗肿瘤试验结果是评价候选抗肿瘤化合物有效性的最重要指标。体内抗肿瘤试验必须选用三种以上肿瘤模型，其中至少一种为人癌裸小鼠移植瘤模型或其它人癌小鼠模型。试验结果三种模型均为有效，再重复一次也为有效，评定该化合物对这些实验性肿瘤具有治疗作用。鼓励使用人癌裸小鼠移植瘤模型和多种类的移植

5、瘤模型，以较正确和全面地评价候选化合物的抗瘤活性和抗瘤谱。鼓励使用原位接种模型和中空纤维测定(hollow-fiberassay)等先进的抗肿瘤作用评价方法。3.1动物动物要求健康，符合等级动物要求，有实验动物合格证。雌雄均可，但同一批实验中动物性别必须相同。小鼠鼠龄为5-6周，体重为18-22克。评价同一物质的活性时，不同批次的实验必须采用同一品系的小鼠。3.2肿瘤模型3.2.1小鼠肿瘤模型可应用的小鼠肿瘤模型包括淋巴细胞白血病腹水瘤L1210和P388、白血病L-615、宫颈癌U14、肝癌H22、Lewis肺癌、黑色素瘤B16、网织细胞瘤M507

6、6、肠癌26、肠腺癌38、乳腺癌CD8F1、艾氏腹水瘤（EAC）、肉瘤-180等，以及以上各种小鼠肿瘤的亚型和耐药瘤等。3.2.2人癌裸小鼠移植瘤模型应选用体外试验敏感细胞株进行体内抗人癌移植瘤试验。模型的建立和使用请注意以下几点：(1)移植瘤一般由相应的细胞株移植而建立，对细胞株和移植瘤的化疗敏感性应予了解。(2)移植瘤复苏后一般应传2-3代后再用于体内抗肿瘤试验。(3)对模型生长情况应全面了解，尤其是生长快的模型。(4)为了保持移植瘤的生物学特性和遗传特性，复苏后移植瘤体内传代应少15-20代。3.3试验过程3.3.1接种肿瘤接种方法主要有皮下接

7、种、腹腔接种和原位接种。皮下瘤模型：选择肿瘤生长旺盛且无溃破的荷瘤小鼠，颈椎脱臼处死，在无菌条件下（超净台或接种罩），用碘酒、酒精或新洁尔灭消毒动物皮肤，切开皮肤，剥离肿瘤。将瘤组织剪成1.5mm3左右，用套管针接种于动物一侧或双侧腋窝皮下；或制成细胞悬液，然后按一定比例加入无菌生理盐水，一般每只小鼠接种肿瘤细胞数量为（1-5）×106。腹水瘤模型：无菌条件下，消毒动物皮肤，吸取生长良好的动物腹水，以生理盐水按一定比例稀释后接种于动物腹腔，接种细胞数量一般为（1-5）×106。原位接种模型：原位接种是指将来源于某脏器的肿瘤接种在动物的某脏器，如将人肝

8、癌接种在裸小鼠的肝脏。原位接种不是常规的方法，但有其优越性，是鼓励使用的方法。主要有肺、肝、胃、肠、乳腺、颅