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时间:2019-11-29
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1、[学生用书P49~P50]1.PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比,主要有两点不同,它们是( )①PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA②PCR过程不需要DNA聚合酶③PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的④PCR过程中,DNA不需要解旋,直接以双链DNA为模板进行复制A.③④ B.①② C.①③ D.②④解析:选C。PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比较,主要有两点不同:(1)PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA,长度通常为20~30个核苷酸。(2)PCR过程中,DNA解旋不依赖解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实
2、现的。2.DNA的复制需要引物,其主要原因是( )A.可加快DNA的复制速度B.引物可与DNA母链碱基互补配对结合C.引物的5′端有助于DNA聚合酶延伸DNA链D.DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链解析:选D。引物的作用是结合在模板DNA上提供DNA延伸的起始位点,而DNA聚合酶的作用是从引物的3′端开始催化DNA链的延伸。3.PCR利用了DNA的热变性原理,PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器。下列对PCR过程中“温度的控制”的说法,错误的是( )A.PCR反应需要高温,是为了确保模板是单链B.延伸的温度必须大于复性温度,而小于变性温度C.要用耐高温的DNA聚合酶D.需要耐高温
3、的解旋酶解析:选D。PCR是体外DNA扩增技术,DNA双链的解开不需要解旋酶,而是靠高温使其变性解体。复性前,在耐高温的TaqDNA聚合酶的作用下根据碱基互补配对原则合成新的DNA,因此延伸的温度要大于复性温度但小于变性温度。4.从第二次循环开始,复制的DNA片段呈__________扩增( )A.直线B.指数C.对数D.不变答案:B5.在PCR扩增DNA的实验中,预计一个DNA分子经过30次循环后,应该得到230个DNA分子,但是结果只有约210个DNA分子,那么出现该现象的原因可能是(多选)( )A.TaqDNA聚合酶的活力不够,或活性受到抑制B.系统设计欠妥C.循环次数不够D.引物
4、不能与亲链结合解析:选ABC。如果TaqDNA聚合酶活力不够,或活性受到抑制,则导致催化效率降低,得到的产物比预期的少,A项正确。如果PCR系统设置不妥,达不到预期的结果,则B项正确。如果循环次数过少,产物的量比预期的少,则C项正确。如果引物设计不合理,也许不能与模板DNA结合,造成无法进行扩增,而结果得到了210个DNA分子,则D项错误。6.(2011年高考江苏卷节选)请回答基因工程方面的有关问题:(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。5①从理论上推测。第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例
5、为________。②在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。①第1组:________________________________________________________________________;②第2组:________________________________________________________________________。(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映
6、DNA聚合酶的功能,这是因为________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析:(1)①根据PCR过程特点绘制PCR过程示意图如下,由图可知,以原来的每条母链为模板合成的两个新DNA分子中,只含有引物A或引物B,而以新合成的子链为模板合成新DNA分子时,两种引物都含有,故第四轮循环共产生16个DNA分子,其中含有引物A的分子是15个,占15/16。②由
7、图示知,第一、二轮循环合成的子链长度均不同,根据半保留复制特点,前两轮循环产生的4个DNA分子的两条链均不等长,第三轮循环产生的DNA分子存在等长的两条核苷酸链,如下图所示。(2)引物是单链DNA时才能与DNA结合,而单链DNA的碱基互补配对部分容易形成双链结构而失去其功能。从图示可以看出,①组引物Ⅰ和引物Ⅱ局部碱基互补配对,易形成双链结构而失效。②组引物相互间不能发生碱基互补配对,但Ⅰ′自身折叠后会出现局部
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