生物选修三第一章和第二章复习

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1、专题1基因工程1、基因工程又叫做________或__________。基因工程基因拼接技术DNA重组技术2、基本工具:“分子手术刀”“分子缝合针”基因进入受体细胞的载体3、基本操作步骤:运载体DNA连接酶限制性核酸内切酶1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建(核心)3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定例1.下列有关DNA重组技术的基本工具的相关叙述,不正确的是A.DNA重组技术的基本工具有三种:限制酶、DNA连接酶和载体B.载体需要具有多个限制酶切点,以便于目的基因的鉴定和选择C.限制酶主要是从

2、原核生物中分离纯化出来的D.DNA连接酶根据其来源分为两类:E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶B(一)目的基因的提取获取方法:1、____________中获取目的基因2、人工合成法:化学方法合成DNA片段(DNA合成仪)3、PCR反应扩增DNA基本操作步骤从基因文库原理:DNA复制(二)基因表达载体构建1、基因表达载体由________、________________、______四部分组成。目的基因启动子标记基因终止子2、启动子作用:3、标记基因的作用:RNA聚合酶识别和结合的位点鉴别受体细胞中是否

3、含有目的基因筛选出含目的基因的细胞例2普通牛奶赖氨酸含量低,未来提高牛奶中赖氨酸的含量,吉林大学农学部利用现代生物工程技术,得到一头转入赖氨酸基因的克隆奶牛,预计将来其分泌的乳汁中含有更多的赖氨酸。(1)获得外源赖氨酸基因所需要的工具酶是,该基因不能从人体细胞中获得,原因是。(2)右图是基因表达载体示意图,构建基因表达载体的目的,图中A片段表示,B片段表示。其中,抗生素抗性基因的作用是.。限制酶赖氨酸为人体必需氨基酸,在人体内不能合成(没有相关基因)使目的基因在受体细胞内稳定存在并进行复制,同时使目的基因能够表达

4、和发挥作用终止子启动子作为标记基因(或有利于对含有目的基因的细胞进行鉴别与筛选)(3)人体蛋白质基因之所以能“插入”到羊的染色体内,原因是,空间结构、化学组成相同;有互补的碱基序列导入植物细胞:(三)将目的基因导入受体细胞导入动物细胞:导入微生物细胞:受体细胞导入方法体细胞受精卵受精卵显微注射法Ca2+处理法农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法例3在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值。右图所示是获得转基因莴苣的技术流程,请据图回答下列问题:(1)获取目的基因的主要途径包括从自然

5、界已有的物种中分离和________。(2)①过程需要的酶有__________、__________。(3)重组质粒除了带有抗冻蛋白基因afp以外,还必须含有启动子、终止子和________,这样才能构成一个完整的基因表达载体。(4)如果受体细胞C1是土壤农杆菌,则将目的基因导入它的目的是利用农杆菌的________,使目的基因进入受体细胞C2,并将其插入到受体细胞C2中____________上,使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达,形成转基因莴苣。经②过程获得的转基因莴苣中的目的基因是否表达,在分子水平上

6、可用________________法进行检测,如果出现杂交带,说明目的基因已经表达蛋白质产品,转基因莴苣培育成功。(用逆转录等方法进行)人工合成限制酶DNA连接酶标记基因转化作用染色体DNA抗原——抗体杂交将目的基因导入微生物细胞原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,故早期常作为受体细胞。大肠杆菌细胞用Ca2+处理感受态细胞重组表达载体DNA溶于缓冲液混合转入目的基因是否插入转基因生物染色体的DNA:(四)目的基因的检测与鉴定目的基因是否表达:目的基因是否转录:方法:DNA分子杂交方法:分子杂交方法:抗

7、原抗体杂交鉴定——抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等检测—例4.下列关于目的基因的检测与鉴定的叙述,错误的是()A.目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键是目的基因是否插入质DNA中B.检测受体细胞是否含有目的基因及其是否成功转录的方法都是分子杂交法C.目的基因的鉴定通常是在个体水平上进行的D.如在受体细胞内检测到目的基因表达的蛋白质,可确定目的基因首端含有启动子A用转基因动物生产药物---动物乳腺生物反应器获取目的基因(药用蛋白基因)构建基因表达载体(在药用蛋白基因前加乳腺蛋白基因的启动子)显微注射导入哺乳动物受精

8、卵中形成早期胚胎将胚胎送入母体动物发育成转基因动物(只有在产下的雌性动物个体中,转入的基因才能表达)(二)动物基因工程前景广阔用转基因动物作器官移植的供体供体动物:存在的难题:解决方法:猪免疫排斥将供体基因组导入某种基因调节因子,以抑制抗原决定基因的表达,或设法除去抗原决定基因,再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。(三)、基因工程药品异军突起工程菌:

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