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《高效油脂降解菌的筛选及其降解影响因素的初步研究_金建云》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、DOI牶牨牥牣牨牫牫牥牥牤j牣cnki牣hnlkxb牣牪牥牥牰牣牥牬牣牥牨牭第25卷第4期华中农业大学学报Vol.25No.42006年8月JournalofHuazhongAgriculturalUniversityAug.2006,400～403文章编号1000-2421(2006)04-0400-04高效油脂降解菌的筛选及其降解*影响因素的初步研究1,2)2)1,2,3)**金建云李芳林开春1)2)(华中农业大学植物科技学院,武汉430070;武汉天惠生物工程有限公司,武汉430070;3
2、)武汉绿世纪生物工程有限责任公司,武汉430070)摘要以豆油作为唯一碳源,经过2个月驯化后筛选获得具有高效油脂降解能力的细菌1株,编号为S16,经鉴定为芽孢杆菌。对影响S16降解能力的几个因素进行了初步研究,结果表明,在初始pH为7.0,初始含油量为400mg/mL,摇床转速为200r/min,培养温度30℃条件下,该菌株生长旺盛,发酵72h后对豆油的降解率可以达到73.5%。关键词油脂;油脂降解菌;降解率;影响因素中图法分类号Q939.9文献标识码A当代人类面临两大难题,一是环境问题,二是能
3、1材料与方法源危机。随着人们生活水平的不断提高,含油脂的垃圾产量呈现出直线上升的趋势,单从环境的观点1.1样品来源看,它们是一种污染,但是从资源的观点看,它们又采自华中农业大学学生食堂下水道口以及校门是一种可再生的宝贵资源:这些垃圾是油脂含量很口大排档案下水道口。高的废弃物,若能将其处理收集起来,它们又是很好1.2实验仪器[1,2]的生物柴油生产原料。然而,油脂相对于淀粉、AY220型电子天平;HQL150B恒温冷冻摇床;蛋白等有机质要难于降解,酶法制备生物柴油必须XS-18型光学显微镜;SKP
4、-01型紫外分光光度计;获得活性较高的脂肪酶,因此,筛选出高效的油脂降RE52-98旋转蒸发器等。解菌,无论是对环境治理,还是对酶法生产生物柴1.3培养基油,都有着重要的意义。能够降解油脂的微生物在斜面培养基(g/L):NaCl5,蛋白胨10.0,牛肉自然界中广泛存在,各类微生物对油脂的降解能力膏5,pH7.2～7.4,用水定容至1000mL;不尽相同,这主要依赖于微生物群落的种属组成,大富集培养液(g/L):NaCl0.5,蛋白胨5.0,牛肉量的研究都集中在混合菌株的降解作用研究上,而膏0.5
5、,豆油4mL,pH7.2～7.4,用水定容至[3]1000mL;对单一菌株降解油脂的研究很少。目前,日本、欧美一些发达国家已将油脂降解菌应用到生物垃圾降分离培养基(g/L):NaCl5.0,KH2PO40.3,解、含油废水的处理、洗涤用酶和生物柴油的生产等MgSO47H2O0.1,K2HPO41.5,(NH4)2SO4多项领域,而我国对于这些方面的应用尚处于初步1.0,琼脂17～20,Tween8020mL,pH7.2～7.4,探索阶段。本研究以日常食用豆油为限制性碳源,用水定容至1000mL;
6、经过对微生物群体的长期驯化后,获得1株高效油复筛培养液(g/L):蛋白胨1.0,NH4NO40.2,脂降解菌并对影响其降解能力的因素进行了初步研K2HPO40.5,KH2PO40.5,MgSO47H2O0.1,豆究。油0.4mL,pH7.2～7.4,用水定容至1000mL。收稿日期:2005-12-21*国家"十五"攻关项目(2001BA50918)资助**通讯作者金建云,男,1979年生,华中农业大学植物科技学院硕士研究生,武汉430070第4期金建云等:高效油脂降解菌的筛选及其降解影响因素的
7、初步研究4011.4驯化方法原试验、产生吲哚试验、甘油产生二羟基丙酮试验以将采集的样品充分混合,取5g加入装有45及菌株生长条件耐性试验。利用文献[6]进行检索。mL无菌水和无菌玻璃珠的150mL三角瓶内,置于1.9入选菌株影响降解油脂能力的因素研究摇床上,200r/min转速充分振荡10min,然后取5将入选菌株在肉汤培养液中培养24h后,按mL稀释加入35mL富集培养液中,并在40℃,2002%的量接种(培养液营养成分参照复筛培养液),初r/min,pH7.0条件下培养。以后每天观察,如果发
8、始含油量为400mg/L,发酵温度40℃,摇床转速现油脂降解得好,就补加少量豆油。每4d转接10200r/min,培养72h,分别进行以下几组处理测定mL培养物至30mL新的培养基中,以促进油脂分降解率的变化:(1)将初始pH值分别设为4.0,解菌的生长。此驯化过程持续2个月。5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,10.0,测试各自在发酵72h1.5油脂分解菌的初筛后降解率的变化;(2)每6h检测1次,测试不同初将分离得到的菌株点接到初筛培养基平板上,始pH值条件下培养液pH值的变化趋势以及降
