普通遗传学实验指导书

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1、普通遗传学实验指导书《普通遗传学》实验指导书生命科学与技术实验教学中心目录实验一植物细胞减数分裂实验二玉米一对相对性状的遗传分析实验三果蝇的生活史及形态观察实验四果蝇唾腺染色体的观察实验五果蝇的双因子杂交实验实验六果蝇的伴性遗传实验七果蝇的连锁交换与基因定位实验八细胞核内脱氧核糖核酸的定性鉴定实验九植物多倍体的诱发与鉴定实验十蚕豆根尖微核检测技术实验^一人群中PTC味盲基因频率的分析实验十二植物基因组DNA的提取实验课是普通遗传学课程教学中的一个重要环节，遗传学实验的目的主要有两方面：一是验证遗传学的基本规

2、律，帮助理解和记忆遗传学的基本理论；二是学习和掌握遗传学研究的基本操作技能，为将来从事遗传研究或继续深造打好基础。本实验指导书是参考有关资料，结合农学、园艺专业的特点编写而成，所选材料主要是植物，在教学过程中，根据实验条件和学时数，从中选开有关实验，实验的顺序视材料的准备情况会有变动。实验一植物细胞减数分裂一、实验目的与要求1•掌握植物花粉母细胞减数分裂的取材、固定和染色制片方法。2.T解减数分裂各个时期染色体变化特征。二、实验原理减数分裂是保证各物种世代间染色体数目恒定的基础，仅在配子形成过程屮发生，包括

3、连续两次细胞分裂，而染色体只复制一次，结果形成四个核，每个核只含有单倍数的染色体，即染色体数目减少一半，所以称作减数分裂。减数分裂的连续两次分裂都包括前期、中期、后期、末期等各个时期，但第一次分裂的前期的变化最为复杂，又可分为细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期，出现同源染色体的配对、交换等现象。三、实验材料、用具和药品1・材料：玉米、小麦、蚕豆的花序固定材料。2•用具：显微镜、解剖针、蹑子、刀片、恒温箱、载玻片、盖玻片、染色缸、试剂瓶、酒精灯、纱布、吸水纸等。3.药品：无水乙醇、冰醋酸、卡诺固定液、蒸馅

4、水、醋酸洋红、改良品红。四、实验方法与步骤1•取材固定：掌握各植物的最适时期和最适时间，保证大量花粉母细胞处于减数分裂时期，一般在上午9V1时取材效果较好；取好的材料立即放入卡诺固定液中，在低温处固定2~24h,在80%乙醇中处理半小时后，用70%乙醇保存于冰箱屮。2.解离：挑岀花药，经过70%酒精，再用蒸憾水冲洗，在1NHCI中60°C恒温下解离5-15min,用蒸憎水冲洗后用于染色压片。3•染色：取出花药吸去多余液休，放在载玻片上，加一滴醋酸洋红或改良品红，用银子反复挤压花药，使花粉母细胞完全溢出来，尽

5、可能去除残渣药壁，酒精灯上稍加热，放置2-3min,使染色体充分着色。2.压片：盖上盖玻片，用刀片架起盖玻片一角，中指和食指按住盖玻片边缘，用镶子尖轻敲几下，使花粉母细胞分散，移去刀片，在酒精灯上迂回稍加热后，用手指垂直压片。5•观察：在显微镜下观察花粉母细胞减数分裂的各个时期的图象。五、思考与作业题1•绘出所观察到的减数分裂各时期的典型图像。2•在形成牛•殖细胞的过程中，染色体数目是怎样减数的？3•减数分裂与有丝分裂的主要区别是什么？实验二玉米一对相对性状的遗传分析一、实验目的与要求通过玉米一对相对性状的

6、杂交试验，观察和分析杂种后代的性状表现,加深分离规律的理解。二、实验原理玉米籽粒胚乳非糯性和糯性由一对等位基因(Wx和wx)控制，且非糯(Wx)对糯(wx)为显性，由非糯和糯亲本杂交的F1植株能形成Wx和wx两类配子，由于带有Wx和wx基因的花粉对l・KI液有不同的颜色反应，可通过测定得出1:1之比。三、实验材料、用具和药品1・材料：玉米籽粒胚乳非糯性(Wx)和糯性(wx)杂交F1代的花粉。2•用具：普通生物显微镜、载玻片、盖玻片、银子、计算器等。2.药品：1%1-KI溶液。四、实验方法与步骤取糯性与非糯性

7、杂交F1花粉，用1%1-KI溶液染色，低倍显微镜下观察，计数蓝黑色(非糯)和红褐色(糯性)花粉粒数目。五、思考与作业题将统计数据全班汇总填入下表，每人进行x2测验或仅检验自己的结果是否相符。实验三果蝇的生活史及形态观察一、实验目的与要求1•了解果蝇生活史各阶段的形态特征，观察果蝇的几种常见的突变类型。2•掌握辨别雌雄果蝇的方法。3•了解果蝇的饲养方法和处理方法。二、实验原理果蝇属于昆虫纲，双翅目，完全变态，生活周期短，生长迅速，繁殖能力强，每交配一次可排卵400-500个，英生活周期与温度密切相关，大于30

8、°C时大部分死亡或不育，20°C时，生活周期为15天，25°C时，其生活周期为10天，在小于10°C的环境下，其生活周期为57天，所以，果蝇培养的最适温度是20-25°Co果蝇形体小，牛长迅速，繁殖率高，饲养简便，突变性状多，是遗传学研究的极好材料。三、实验材料、用具和药品1・材料：野生型和常见的突变型果蝇。2•用具：体视显微镜、放大镜、小银子、培养瓶、麻醉瓶、白瓷板、培养皿、毛笔。3•药品：乙醛、琼脂、玉米粉、