绿茶中茶多酚的检测和提取

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1、实验一绿茶中茶多酚的提取及检识鉴定实验原理一本实验利用利用茶多酚与无机盐中的金属离子(如Ca2+、Mg2+、Zn2+等)配位生成沉淀的特性而对茶多酚进行分离。茶多酚是茶叶中三十多种酚类物质的总称，约占茶叶干物质总量的25%～35%，包括儿茶素、黄酮类化合物、花青素、鞣酸等四大类物质。纯品茶多酚有吸潮性，遇铁变成绿色聚合物。弱碱性条件下，茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。在酸性介质中，茶多酚能与钼酸铵反应生成黄色钼酸酯。绿茶(市售)、95%乙醇、氯化钙(无水)、浓硫酸、NaOH、硫酸亚铁铵

2、、钼酸铵剪刀、10mL量筒、100mL量筒、10mL玻璃试管、100mL烧杯、减压回流装置、500mL圆底烧瓶、250mL圆底烧瓶、医用纱布、离心沉淀器、天平、pH试纸。试剂和器材二溶液的配制1.酒石酸亚铁溶液的配制称取0.2g硫酸亚铁铵(A.R)1g和酒石酸钾钠(A.R)，用蒸馏水溶解后定容至200mL。2.100g/L的钼酸铵溶液的配制称取钼酸铵10.0g至100mL容量瓶中，加适量水超声溶解并稀释至刻度。3.2.0mol/L的硫酸溶液的配制(98%的浓硫酸ρ为1.84g/cm3)浓硫酸(ωB=

3、0.98,ρ=1.84kg/L)计算CB＝ωB×ρ×V/M=0.98×1.84×1×103/98=18.4mol/LC浓V浓＝C稀V稀配制2mol/L硫酸30mL的需浓硫酸量是：V×18.4=2×30V=3.26mL≈3mL用干燥的10mL量筒量取浓硫酸3mL，沿杯壁慢慢倒入适量水中，并用玻璃棒不断搅拌至冷却。将已稀释冷却的硫酸溶液转移到100mL量筒中，洗涤烧杯3次，一并转入量筒中，加水至30mL刻度线即可。实验步骤三茶多酚的浸提茶叶用剪刀剪碎，准确称取10g，选用体积浓度为70%乙醇100mL为

4、浸提剂(料液比1∶10)，在70℃水浴下振荡浸提30min，浸提2次，并趁热用纱布过滤。合并滤液，即为茶多酚浸提液。12浸提液中茶多酚的鉴定取浸提液约2mL于10mL试管中，滴加酒石酸亚铁溶液，产生颜色变化，观察现象、记录结果。取浸提液约2mL于10mL试管中，滴加100g/L的钼酸铵溶液，观察现象、记录结果。茶多酚沉淀-转溶纯化取浸提液，减压回收乙醇，至无乙醇味(约60mL)。取浓缩后浸提液，加入12gCaCl2，摇匀。用0.1%NaOH溶液调pH值至7，待沉淀完全后，静置约10min，5000转

5、/min离心5min，滴管吸去上清液，即得茶多酚-钙盐沉淀。在茶多酚-钙盐沉淀物中加入2mol/L的硫酸溶液30mL，搅拌，室温下放置15min，使之溶解，然后5000转/min离心5min。3茶多酚的鉴定取约2mL的上清液，于10mL试管中，调pH值至7，滴加酒石酸亚铁溶液，观察现象、记录结果。取约2mL于10mL试管中，滴加100g/L的钼酸铵溶液，观察现象、记录结果。与浸提液鉴定结果进行比较。45干燥茶多酚易溶于乙酸乙酯，而共存物咖啡因在乙酸乙酯中溶解度很低。故将转溶后得到的清液，用适量的乙酸

6、乙酯进行萃取可进一步纯化茶多酚。上清液用2mol/LNaOH溶液调pH至7，移入蒸发皿，放置水浴锅上至完全挥干(用玻棒不断搅拌防止局部过热)，得到成品。成品茶多酚为浅褐色粉末，易溶于温水和含水乙醇中。注意事项四茶多酚在碱性条件下和光照时易发生氧化褐变反应，整个实验过程需尽量避光。思考题1.试述茶多酚的主要理化性质。2.酒石酸亚铁法鉴别茶多酚的原理是什么？实验二苦瓜皂苷的制备及检识测定一、目的和要求1.掌握苦瓜皂苷分离纯化步骤及皂苷类成分的鉴定方法。2.熟悉苦瓜皂苷的功效及大孔树脂除杂原理。实验二苦瓜

7、皂苷的制备及检识测定二、试验原理苦瓜(MomordicacharantiaL.)，属于葫芦科苦瓜属植物，其果实和种子作为药用具有清热解毒和清心等功效。苦瓜皂苷是苦瓜中的有效成份之一，国内外研究表明，苦瓜皂苷具有降血糖、抑菌、消炎等作用。苦瓜中的皂苷分为萜类皂苷和甾体皂苷两大类，萜类以为葫芦烷型四环三萜为主以及少量齐墩果酸型和乌苏烷型五环三萜。目前，已经提取分离出的有苦瓜皂甙A、B、C、D、E、F、G、H、I（momordicosideA、B、C、D、E、F、G、H、I、L）等60余种。实验二苦瓜皂苷

8、的制备及检识测定二、实验原理经大孔树脂D101处理除去多糖类水溶性杂质后，苦瓜皂苷类成分得以较好富集。苦瓜皂苷采用Liberman-Burchard反应进行检识。L-B反应原理主要是使三萜皂苷中羟基脱水，增加双键结构，再经双键移位、双分子缩合等反应生成共轭双烯系统，又在酸作用三、仪器与器材苦瓜干燥饮片70%乙醇、90%乙醇、醋酐、浓硫酸剪刀、D101型大孔吸附树脂、玻璃棒、纱布、250mL圆底烧瓶、500mL圆底烧瓶、冷凝设备、真空泵、恒温水浴锅、细铁丝、布氏漏斗、铁