25辣椒品种抗疫病鉴定技术规程

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1、ICS备案号:贵州省地方标准DB52/TXXXX—2014DB52辣椒品种抗疫病鉴定技术规程Ruleforidentificationofpepperforresistancetopepperphytophthorablight（征求意见稿）在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。XXXX・XX・XX发布XXXX・XX-XX实施贵州省质量技术监督局发布本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则笫1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。本标准由贵州省农业委员会捉出并归口。木标准由贵州省质罐技术监督局批准。本

2、标准起草单位：贵州省植物保护研究所。本标准主耍起草人：杨学辉、袁洁、陈小均、吴石平、何海永、王莉爽、谭清群。辣椒抗疫病温室接种鉴定技术规程1范围木标准规定了辣椒抗疫病温室人工接种鉴定过程中辣椒苗的培育、接种体准备、接种技术、病情调查以及抗病性评价方法。本标准适用于贵州省辣椒品种及资源材料对辣椒疫病的温室人工接种抗性鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注口期的引用文件，仅所注LI期的版本适用于木文件。凡是不注H期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB4285农药安全使用标准GB5084农业

3、灌溉水质标准GB/T8321(所有部分)农药合理使用准则3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1辣椒疫病PepperphytophthorabIight辣椒疫霉为鞭毛菌亚门(Mastigomycotina)卵菌纲(Oomycetes)腐霉科(Pythiaceae)疫霉属(Phytophthora)真菌。该菌侵染辣椒导致植株根系、茎基部、茎枝分叉处变黑腐烂、枯死，果实变褐软腐、表面常有白色霉层等症状出现，称为辣椒疫病。3.2抗病性鉴定Screeningfordiseaseresistance通过适宜技术方法鉴定植物对特定病害的抵抗水

4、平。3.3分离物Isolate采用人工方法从植物发病部位分离获得，并经过回接确认的在特定环境条件下培养的病原物。3.4人工接种ArtificialinocuIation在适宜条件F,通过人工操作将接种体置于植物适当部位并使Z发病的过程。3.5接种体InocuIurn用于人工接种鉴定的病原物或病原物的一部分，本规程特指辣椒疫霉砲了囊悬浮液，其浓度为1.2X10"个/ml。3.6灌根接种IrrigationrootinocuIation用氏径5mm的玻璃棒在距植株2cm处戳一小孔，将接种体注如孔内，每株灌入量3ml。3.7对照品种Contr

5、oIvariety为检验试验的nJ靠性,在品种鉴定时附加的抗病品种和感病品种。4用具和试剂4.1用具冰箱、消毒锅、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、载玻片、试管、酒精灯、接种铲、光学显微镜、超净工作台、恒温生物培养箱、孔径规格为25mmX25mmX50mm的塑料泡沫漂浮育苗盘、直径7cm营养钵。4.2试剂10%N&POq、NaClO、(NH.,)2S04>K2SO4、普通过磷酸钙、青霉素、利福平、尿素、50%多菌灵可湿性粉剂。5育苗及接种5.1育苗方法参鉴品种(材料)冇苗采用鴉料泡沫漂浮冇苗盘冇苗。辣椒种子用10%磷酸三钠溶液浸种20min,

6、用清水洗净，置于28°C恒温培养箱中催芽。选収发芽良好的种子单粒播于装有育苗基质的塑料泡沫漂浮育苗盘内。育苗盘用5%次氯酸钠溶液消毒，其规格为76cmX35cmX5.5cm.160孔/盘，育苗基质为泥炭、蛭石和膨化珍珠岩混合，各成分所占比例分别为60%〜70%、15%〜20%和15%〜20%(V/V/V),基质经高温蒸汽灭菌(121°C,30min),播种后在辣椒种子上盖3mm左右的育苗基质，压实，然后将播种的漂浮盘放入营养液中。营养液配方为：每100kg清水加入50g硫酸飯15g尿素、100g普通过磷酸钙、50百硫酸钾；配制营养液使用

7、的清水应符合GB5084-92的蔬菜类灌溉水质要求。在18°C〜25°C的自然条件下育苗。冇苗期间不进行病害防治，虫害防治屮农药的使用应符合GB4285和GB/T8321的规定。5.2移栽及处理辣椒苗4叶展平时单苗移栽到营养钵屮,移栽后7天施一次1%尿素水溶液以保持辣椒苗长势旺盛。试验设3次重复，各材料顺序排列，毎个重复每份材料10株苗，设感病和抗病品种对照。5.3接种体准备选取已分离鉴定属于不同生理小种的菌株回接到甜椒上重新复壮，待发病后从病果上胃接挑取菌丝或切取一小块病组织置于选择性胡萝卜培养基(胡萝卜200汁，琼脂18g,青霉素5

8、0mg/L,利福平100mg/L,50%多菌灵可湿性粉剂50mg/L,蒸馆水1L)上,25°C恒温培养3d~5d,转接到胡萝卜培养基上扩繁，待10d〜15d产生抱了囊后，用消毒的毛笔和无菌水洗下他了囊，过滤