26辣椒品种抗青枯病鉴定技术规程

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1、ICS点击此处添加ICS号点击此处添加中国标准文献分类号DB52贵州省地方标准DB52/XXXXX—2014辣椒品种抗青枯病鉴定技术规程点击此处添加标准英文译名点击此处添加与国际标准一致性程度的标识文稿版次选择XXXX-XX-XX实施XXXX-XX-XX发布贵州省质量技术监督局发布本标准冇贵州省农业委员会提出并归口。本标准有贵州省质量技术监督局批准。本标准起草单位：贵州省植物保护研究所。本标准主要起草人：吴石平、陈小均、克洁、杨学辉、何海永。辣椒品种抗青枯病鉴定技术规程1范围本标准规定了辣椒品种对青枯病抗

2、病性鉴定的接种体制备、育苗、接种、病情调查以及抗病性评价程序和方法。本标准适用于贵州辣椒资源材料及站种对辣椒青枯病抗性的宗内鉴定及评价。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注FI期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注口期的引用文件，其最新版本（包括所冇的修改单）适用于木文件。GB4285农药安全使用标准GB5084农业灌溉水质标准GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则3术语和定义-K列术语和定义适用于本文件。3.1辣椒青枯病pepperbacteriaIwilt由

3、青枯雷尔氏菌（RcilMcmiasolanacearum（Smith）Yabuuchietal.）引起的植株萎蔦甚至枯死，茎部微管束变褐，横切新鲜病茎挤压或插入清水中，可见乳白色菌脓溢出等症状的辣椒病害。3.2抗病性diseaseresistance植物对各种病原生物的忍耐性和抵抗性，是植物在长期进化或人为选育过程小所形成并能稳定遗传的性状。3.3抗病性鉴定screeningfordiseaseresistance通过适宜技术方法鉴别植物对其特定病害的抗感情况。3.4抗病性评价evaluationofre

4、sistance采用适当的技术标准评价寄主植物对特定病害反应程度和抵抗水平。3.5致病性pathogenicity病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。3.6人工扌妾种artificialinocuIation在适宜条件-通过人工操作将接种体査于植物体适当部位并使z发病的过程。3.7病情级别diseaseratingscale人为定量植物个体发病程度的数值化描述。3.8分离物isolate采丿IJ人工方法从植物发病部位分离获得，并经过回接确认的在特定坏境条件卜•培养的病原物。3.9接种体inoculum

5、用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。3.10病情指数diseaseindex通过对植物个体病情级别的计算所获得的群体发病程度的数值化描述。4用具及试剂4.1用具冰箱、消毒锅、pH计、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、试管、酒粕灯、接种环、光学显微镜、超净工作台、恒温生物培养箱、恒温摇床、孔径规格为25mmX25mmX50mm的塑料泡沫漂浮育苗盘、外科手术刀。4.2试剂次氯酸钠、匍萄糖，蛋白豚，水解酪蛋白、氯代三苯基四氮呻（TZC）、泥炭、蛭石、膨化珍珠岩、硝酸镀、硫酸镀、普通过磷酸钙、硫酸钾。5病原物分

6、离及保存5.1病原物分离和保存从具有典型症状的发病植株褐色维管束溢出的菌脓上挑取少许菌脓，用常规稀释分离法或平板划线分离法分离、纯化和保存，同时用生物学（形态学、培养性状和牛理牛:化特性）、血清学或分子牛物学等方法鉴定确认为青枯雷尔氏菌^Ralstoniasolanacearum（Smith）Yabuuchietal）Ju,再冋接到辣椒上确认其致病性。青枯菌的保存方法为：在青枯菌培养基(葡萄糖5g,蛋口腺10g,水解酪蛋口lg,蒸饰水1000ml,琼脂18g,pH7.2)上培养的新鲜青枯菌从斜面上洗下或挑

7、下，放入火菌的蒸憎水屮，在温度为20°C左右的条件下保存，或放入15%的廿油中于-80°C条件下保存。5.2接种体繁殖在接种前需要进行病原物接种体的繁殖。繁殖方法：将保存的菌种摇匀，挑取一环菌液在TZC培养基平板上划线，在30°C下培养36h〜48h后，选取较大、白边较宽、中央粉红色、似有流动感的致病力较强的菌落，移至青枯菌液体培养基(葡萄糖5g,蛋白腺10g,水解酪蛋白1g,蒸镭水1000ml,pH7.2)中，30°C振荡培养24h,加适量无菌水调整至接种浓度。6育苗及接种6.1对照品种鉴定吋设独山皱椒

8、1号为抗病对照品利「，茄门甜椒为感病对照品种。6.2育苗待鉴定胡种及对照晶种育苗采用塑料泡沫漂浮育苗盘育苗。辣椒种子用5%的次氯酸钠浸种5min〜lOmin,用清水洗净，宜于2LC恒温培养箱小催芽，待种子发芽后播于装有育苗基质的育苗盘内。育苗盘为駛料泡沫漂浮盘，其规格为76cmx34.2cmx5.5cm、160孔/盘，冇苗基质为泥炭、蛭石和膨化珍珠岩混合，各成分所占比例分别为60%〜70%、15%〜20%和15%〜20%(体积