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1、青狐尾草丛生芽诱导研究摘要将青狐尾草作为研究c4光合作用的模式植物，其转化体系还不成熟。由成熟种了胚诱导的愈伤组织再生获得植株效率较低，该试验对比含有不同浓度的6-ba和2,4-d诱导培养基对青狐尾草的从生芽诱导效果，结果表明：改良后的ms培养基并添加6-ba2mg/1和2,4-d0.5mg/1组成的诱导培养基效果较好。因此，为青狐尾草的遗传转化寻找到一种比较好的转化对象。关键词青狐尾草；丛生芽；6-ba；2,4-d；诱导培养基中图分类号q943.1文献标识码a文章编号1007-5739(2012)22-0153-01青狐尾草是nadp-me型的c4植物，为单了叶植物［1
2、］,是研究c4光合作用方面具有较大潜能的模式植物［2］。但在单子叶植物的遗传转化中，利用组织培养获得再生植株效率很低。因此，该试验探索了丛生芽的诱导浓度。1材料与方法1.1种了的灭菌及播种用次氯酸钠溶液灭菌后，将种子稍稍晾干，用药匙均匀撒在ms基本培养基上。1.2外植体获得将培养皿放在培养箱中置于(23±2)°C、黑暗条件下萌发。3~4d后种子开始萌发，在胚轴生长到0・5~2・0cm吋，切取幼苗的芽尖放在诱导培养基上诱导从生芽。根据姜素云等黑麦草丛生芽的培养方法[3],设置了含有不同浓度6-ba和2,4-d的诱导培养基（表1）。ms基本培养基选用康奈尔大学burtnell
3、实验室培养青狐尾草愈伤组织的ms基木培养基配方。1.3培养条件培养的条件为:18h时光照，6h黑暗；光照强度为600^800lx；温度（23±2）°C。2周后形成丛生芽块，可看到明显膨大的叶鞘。将叶鞘和幼叶剥离丛生芽块，计算丛生芽的芽原基数及芽尖数。2结果与分析播种在基本培养基上的青狐尾草种子暗培养旷5d后，大部分开始萌发。在黑暗条件下，下胚轴伸长较快，在芽轴长度小于2cm吋将0.5mm的芽尖切下摆放在诱导培养基上，每皿可摆放25个芽尖。在丛生芽的诱导过程中，外源激素的浓度配比非常重要。通过统计诱导岀的芽尖数和平均芽原基数，选择效果较好的浓度。通过对比发现，当2,4-d浓
4、度为0.5mg/l>6-ba浓度为2mg/1时，产生丛生芽的芽尖数、平均芽原基数最多。因此，选择培养基g为诱导培养基（表2）。3讨论在诱导培养过程屮，2,4-d与细胞分裂有关，6-曲与植株再生细胞的分化有关[4-6]o通过对比不同激素组合的诱导培养基的诱导效果，在不含2,4-d和6-昴的培养基中，芽尖很快褐化死亡；在6-ba浓度低于2吨/1、2,4-d浓度低于0.5mg/1时，产生丛生芽的芽尖数较少，大部分芽尖死亡；当6-ba浓度高于2mg/1吋，不管2,4-d浓度高低，芽尖切口产生的白色细胞团较小，细胞分裂少，进而产生的丛生芽芽原基很少，而且芽尖容易生长成为绿色叶片,不
5、再具有分裂能力；当6-ba浓度适宜、2,4-d浓度过高时，芽尖切口细胞能力较强，容易分裂膨人为一个细胞团，水渍化严重,后期不容易转变为丛生芽，分化能力不强。通过对比发现，当2,4-d浓度为0.5mg/1.6-ba浓度为2mg/1时，产生从生芽的芽尖数、平均芽原基数最多。因此，选择该激素组合添加入诱导培养基中，其与已有的再生体系和比，青狐尾草丛生芽获得再生植株比较容易，被认为是一个比较好的转化材料[7-9]。4参考文献[1]kelloggea.phylogeneticaspectsoftheevolutionofc4photosynthesis[m]//rfsage,mon
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