标本溶血对临床检验结果的影响

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1、标本溶血对临床检验结果的影响标本溶血对临床检验结果的影啊doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.23.180对溶血干扰的机制、溶血原因、溶血对常用临床指标测定的影响及其预防等问题加以探讨,现报告如下。溶血影响的机制对临床检验的干扰和影响:①血细胞高浓度组分逸出，使血浆分析物浓度增加;②溶血能引起町见光谱的短波长段(300~500nm)的吸光度明显增高，不同类型的分析方法受Hb吸光度的影响程度不同，以动力学法受Hb吸光度的影响最小，而经典的终点比色法则最易受Hb影响,导致样品分析物测定浓度高于

2、实际浓度;③利用偶氮反应的原理测定血清总服红索,Hb可竟争性地抑制服红索与重氮试剂的偶氮反应,使测定结果低于实际值。对部分项目的影响对肝功能分析的影响:⑴血清酶活性的测定:①ALT、AST等由于红细胞内外的浓度差异显著，轻微溶血就可以导致结果偏高;②红细胞膜上有ALP,明显溶血后会导致测定值升高;③rfl于红细胞内GGT含量很低，轻微溶血对其测定结果影响不大，但匝度溶血则有影响;④溶血血清脂肪酶活性也轻微下降，但淀粉酶、谷氨酸脱氢酶等酶活性测定不受溶血影响;⑤LDH受溶血的影响最大，因红细胞和血小板中含有丰富的LDH,

3、红细胞LDH含量是血浆的180倍;⑥红细胞屮ACP是血浆的66倍,溶血时ACP明显升高;(2)血清蛋白的测定:总蛋白的测定通常选用双缩服法，主波长540nm,而血红蛋白在555nm有吸收峰,故总蛋白测定结果偏高;⑶血淸胆红索测定：目前以采用改良J-G法多见，而血红蛋白可破坏其反应产物偶氮胆红素,从而导致结果偏低。对肾功能各指标测定的影响:①血、尿肌酹的测定:通常采用苦味酸法，此方法特异性较差，蛋白质、葡萄糖、维生索C等所谓假肌酹物质亦可与苦味酸发生反应，且这些物质大多存在于红细胞中，故溶血标木若用终点法测定，结果必然偏

4、高;②血清尿素氮测定:无论是二乙酰-坊法还是啄酶法，溶血均可导致光谱蓝色部分吸光度值升高，对结果都有干扰，导致结果偏高;③尿酸测定釆用磷钩酸还原法，因谷胱甘肽具有还原性，可与磷磚酸发丰氧化还原反应导致结果偏高;采用尿酸氧化酶-过氧化物酶偶联法，谷胱甘肽可竞争过氧化氢而导致结果偏低。对血脂测定的影响:①血清总胆固醇TCII的测定；目前多采用二联酶法，谷胱甘肽可还原过氧化氢而使结果偏低，但血红蛋口高于2g/L会使结果升高;②廿油三酯的测定：除去上述如TCII影响因素外，目前所用甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶法和乙酰丙醇显色法都

5、以测量甘油为基础，而红细胞膜磷脂可被磷脂酶作用产生游离甘油，所以溶血后测定结果偏高;③载脂蛋口A、B的测定:免疫透射比浊法使用最广泛，以抗原抗体为基础，血红蛋口可使测定结果升高,故标木溶血后测定结果偏高。对血糖测定的影响：目前血糖测定大多采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联法，红细胞内谷胱廿肽可竞争过氧化氢而使测定结果偏低。对心肌酶谱分析的影响：因LDH、HBDH在红细胞内的含量皆明显高于胞外,故溶血后结果都升高，虽然红细胞中不含CK,但含有大量的腺昔酸激酶(AK),可干扰测定CK的偶联法的反应体系，人为地引起CK结果升高

6、。对ELISA试验的影响:溶血对IIBsAg有影响。当IIb<20g/L时，溶血对HBsAg影响不大，当Hb>20g/L吋,可导致假阳性。对血常规结果的影响:标木溶血使RBC计数降低，溶血越严重,RBC计数降低越明显。标本溶血对WBC分类有影响,使中性粒细胞比例明显降低，淋巴细胞比例明显升高，而对WBC计数无影响。标本溶血常常血小板计数升高。实际工作中应避免标本溶血，发现异常分类结果，应通过手工分类法进行复核或重新采取标本。对凝血像的影响:标本溶血具有与血小板第III因了相似的凝血活性，使PT、APTT值缩短。因此PT

7、、APTT的测定一定要标准化，尽量不用溶血标本测定PT、APTTo对荧光定量PCR检测的影响:标本溶血对IIBV-DNA定量结果的影响与溶血的严重程度有关。当Hb在20g/L以下吋，定量结果的差别无统计学意义;而当Hb达到40g/L时,HBV-DNA定量结果明显偏低。溶血原因及其预防体外和体内溶血的主要区别是，前者为血浆或血清Hb与LDII、钾平行增高，而后者通常是血浆或血清Hb与LDH升高，而钾不升高，二者还可以通过珠蛋白检测、间接胆红素测定和网织红细胞计数进一步加以鉴别。体外溶血可以通过样品制备技术的标准化加以克服

8、,另一方面从方法学上克服和减少溶血的干扰也是非常重要的，对于Hb对吸光度的干扰，可以通过设置样品空白，或改用双波长比色、分光光度法和动力学法等措施加以克服，属于参与其分析法化学反应的溶血干扰,惟一的解决办法是改变所用试剂的类型，改进试剂组配。综上所述,标本溶血对多数血清酶类活性测定有影响，其余如血糖、胆红素等也受影响，从方法学上讲