川芎内生真菌种群稳定性探究

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1、川<内生真菌种群稳定性探究【摘要】目的探讨四川产区川苛内生真菌种群组成情况。方法采用纯培养法对川苇根茎中的内生真菌进行分类鉴定。结果从4个产地的川苇中共分离得到内生真菌64株,经显微鉴定为1纲、3目、4科、17属;两年分离的内生真菌共有7个,其菌株数量占总菌株数的81.3%o结论四川产区川莒内生真菌种群结构基本稳定。【关键词】川苒;内生真菌;种群稳定性Abstract:ObjectiveTostudytheendophyticfungalpopulationstabilityinLigusticumchuanxiongH

2、ort..MethodsTheendophyticfungiintherhizomaofLigusticumchuanxiongHort.fromdifferenthabitatswereseperatedandidentifiedbyaxenicalcultivationmethod.Results64strainsofendophyticfungiwereisolatedfromtherhizomaofLigusticumchuanxiongHort.andmorphologicallyidentifiedtobel

3、ongto17genera,4families,3ordersand1class・ConclusionTheendophyticfungalpopulationinLigusticumchuanxiongHort.isbasicallystable・Keywords:LigusticumchuanxiongHort.;Endophyticfungi;Populationstability川苇为伞形科植物川苇LigusticumchuanxiongHort.的干燥根茎,具有活血行气、祛风止痛功效。川苇自宋代以来就是著名的川

4、产道地药材,主产于四川都江堰市(灌县)金马河上游以西地区[1]o内生真菌指那些其生活史中的某一段时期生活在植物组织内,对植物没有引起明显病害症状的微生物[2]。已有的研究表明,内生真菌在植物自然界中广泛存在,它们同植物的产区具有一定的联系,不同产地的同一种药用植物中内生真菌的种群结构存在较大的区别[3],由于生长环境的不同表现出药用植物内生真菌具有地域性的特征。因此,笔者对四川道地产区的4个产地川苇的内生真菌进行分离鉴定,探讨内生真菌种群结构组成的稳定性,旨在为其品质评价提供理论数据。1材料1.1来源2006年和2007

5、年的5〜8月份分别在四川彭州敖平、四川都江堰石羊、四川彭州小鱼洞、四川阿坝汶川这4个产地采集健康植株的根茎,原植物经鉴定为川苇LigusticumchuanxiongHort・。1.2培养基PDA培养基[4](马铃薯葡糖糖培养基)+青链霉素混合液[5](用于分离);PDA培养基;促胞培养基(KH2P04lg,KN03lg,MgS04.7H200.5g,KC10.5g,淀粉0.2g,葡萄糖0.2g,蔗糖0.2g,琼脂15〜20g,蒸馆水1000ml,pH自然)。2方法1.1内生真菌的分离从每个产地样品中挑选新鲜川苇根茎20

6、个,先去掉须根,用自来水洗净川苇根茎表面,用5%的NaClO溶液浸泡5min,然后用自来水反复地漂洗,稍干后切成适宜大小的小块,在无菌的条件下,用75%酒精中浸泡3〜5min,用无菌水冲洗3〜4次,无菌滤纸吸干,然后用无菌刀片将表皮削去,分别切成5mmX5mmXlmm的小块,种植于PDA培养基内,置25〜28°C恒温箱中培养3〜15d,观察到培养基上从各植物组织块内部向周围长出菌丝并渐渐形成菌落时,采用尖端菌丝挑取法把真菌转移到另一个PDA的试管斜面或者平皿纯化培养,即得内生真菌。2.2内生真菌的鉴定采用插片培养法和点植

7、法培养内生真菌,利用光学显微镜对分离获得的川苛内生真菌进行显微形态特征的观察、分类鉴定。分类检索参照文献[6,7]。3结果2.1川苛内生真菌种群多样性分析2006年和2007年一共从4个产地的川苇中分离得到64株内生真菌,经显微形态观察,鉴定为1纲、3目、4科、17属,显示了川苛内生真菌在种类上具有丰富的多样性。川苇内生真菌的组成见表1、2,部分属种代表性显微特征见图1〜4。表12006年川苇内生真菌种群结构株(略)由表1可知,2006年分离得到的27株内生真菌属于1纲、3目、4科、11属。丛梗胞目所包括的属种类和菌株数

8、最多。在属的水平上,头砲霉属(Cephalosporium)>拟小卵鞄属(Ovulariopsis)、镰胞属(Fusariuni)、曲霉属(Aspergillus)为优势种群,包含菌株分别占总菌株数的25.9%,14.8%,14.8%,14.8%。表22006年4个产地川苇内生真菌种群分布情况株(略)表32007年川

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