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1、利用SSR标记探究几个玉米改良系类群划分摘要：利用SSR标记从分子水平上对来源于先玉335杂交种、6WCX郑58和PH6WCX郑58XE003基础群的4个改良系以及13个国内骨干自交系，进行遗传关系类群划分。UPGMA聚类分析结果表明，17个自交系可划分4类群，第I类群为Reid群，改良系J1207、J1401、8W131、J2067均属于Reid群，B73、6WC、掖478亦属此群；第II类群包括两个亚群：丹340、8F1658属旅大红骨亚群，齐319、J666属PN亚群；第III类群是No-Reid群，包括Mol7、B1M、4CV；第IV类群是塘四
2、平头群，包括黄早四、昌7-2。关键词：玉米；改良系；SSR标记；聚类分析中图分类号：S513文献标识码：A文章编号：1674-0432(2013)-08-17-2基金项目：吉林省科技发展计划项目(20116030)玉米育种主要利用杂种优势，玉米杂种优势群的准确划分和杂种优势模式的合理确立，是选育优良组合的前提［1］。通过种质扩增、改良和创新选育出的新自交系［2］,要进一步利用，就必须进行种质类群的划分。育种者对杂种优势类群和杂优模式采用多种方法进行过系统研究［3］,其中SSR标记技术是一种较为简单快捷的方法［4］。本试验利用SSR分子标记技术对4个改良
3、系(是对国外种质与国内种质在本地生态环境下的种质改良选育出的，其中J1207、J1401来自先玉335杂交种,8W131来自6WCX郑58基础群，J2067来自PH6WCX郑58XE003基础群）及13个国内骨干自交系进行遗传分析，估算遗传距离，划分杂种优势类群、预测杂种优势的可行性，为分子标记辅助育种提供理论依据，指导如何利用外引玉米材料选育改良优良自交系，组配强优势组合。1材料与方法1.1试验材料试验选用的17份玉米自交系材料，其名称、来源及编号见表lo1.2实验方法1.2.1基因组DNA提取玉米材料基因组DNA提取参照Rogers的CTAB提取法
4、[5]。用紫外分光光度仪根据0D值测定DNA浓度，把DNA浓度统一调至10ng/L备用。1.2.2SSR分析SSR引物是选用分布于玉米10对染色体上的20对SSR引物，由上海生工合成。PCR总反应体系为20ul,包括说上下游引物各0.125ul,10XBuffer（含Mg2+）2ul,Tag酶0.2ul,4种dNTP共1.2ul,DNA模板2ul,不足部分由ddH20补充。热循环反应过程包括：94°C模板DNA预变2min,1个循环；94°C模板DNA变性30sec,58°C引物与模板靶位点结合lmin,72。(2引物沿模板延伸lmin,共35个循环；
5、最后在72°C延伸5min,4°C保存。PCR扩增产物用6%变性聚丙烯酰胺凝胶在1XTBE缓冲液中电泳，80W恒功率2h,银染检测。1.3数据统计分析根据SSR扩增结果，在相同迁移位置有带记为1,无带记为0,缺失记为9,建立数据库。聚类距离按Nei和Li的方法[6],计算自交系间的遗传相似系数(GS)和遗传距离(GD)o利用DPS统计软件[7],采用类平均法(UPGMA)进行聚类分析，构建树状图。2结果与分析2.117份玉米自交系SSR标记遗传距离分析20对SSR引物在17份米自交系间进行SSR检测，一共有16对引物扩增出了产物，扩增效果良好，如图1、
6、图2。16对引物共检测出67个等位基因变异，每对引物检均能测出3〜6个等位基因，平均为4.19个。根据SSR扩增结果得出的数据，计算17份玉米自交系间的遗传距离，遗传距离变化范围为0.196〜0.747,平均值为0.69。其中，遗传距离最小的是郑58与改良系8W131,仅为0.196；其次为改良系J1207与6WC,遗传距离是0.235；第三为改良系J2067与郑58,遗传距离是0.298,第四为改良系J1401与6WC,遗传距离是0.301o2.217份玉米自交系聚类分析根据遗传距离矩阵，应用类平均法（UPGMA）方法，进行聚类分析，得到了17份玉米
7、自交系的聚类分析图（图3）。根据SSR聚类树形图，可看出，以遗传距离0.70为标准，可将17份玉米自交系划分4大类群：第I类群统称为Reid群，包括8个自交系，可细化为两个亚群：第一个亚群是以B73为代表的Reid群，6WC、J1207、J1401属于这个亚群；第二个亚群是以掖478为代表的改良Reid群，郑58、J2067、8W131属于这个亚群。第II类群有8个自交系，包括两个亚群：丹340、8F1658属于第一个亚群旅大红骨类群，齐319和J666属于第二个亚群PN类群。第III类群是No-Reid群，包括3个自交系，分别是Mol7、B1M、4C
8、Vo第IV类群是塘四平头类群，黄早四和昌7-2属于这一类群。3结论与讨论国内外育种家普遍采用的
