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《中药化学实验指导—实验四槐花米中芸香苷的提取及槲皮素的制备与检识》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、中药化学实验指导一实验四槐花米中芸香昔的提取及榊皮素的制备与检识实验四槐花米中芸香昔的提取及榊皮素的制备与检识（―）冃的耍求学习黄酮类化合物的提収、分离和检识，通过实验要求：1.通过芸香琶提取与精制，掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理和操作。2.掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮苜、昔元和糖部分的检识方法。3.掌握由芸香昔水解制取榊皮素的方法。（二）主要化学成分的结构及性质槐花米为豆科植物槐SophorajaponicaL.的干燥花蕾，主要含芸香背（芦丁），含量高达12%〜20%,水解生成桝皮素、葡萄糖及鼠李糖；槐花亦含芸香昔，但含量较槐米为
2、少。芸香昔（rutoside）分子式C27H30O16,分子量610.51-淡黄色针状结晶，mp.l77~178°C,难溶于冷水（1：8000）,略溶于热水（1:200）,溶于热甲醇（1:7）、冷甲醇（2：100）＞热乙醇（1：30）、冷乙醇（1：650）,难溶于醋酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醴、石油醴等，易溶于毗噪及稀碱液中。桝皮素（quercetin）乂称桝皮黄素，分子式C15H10O7,分子量302.23。黄色结晶，mp.314°C（分解）。溶于热乙醇（1:23）、冷乙醇（1:300）,可溶于甲醇、丙酮、醋酸乙酯、冰醋酸、口比碇等溶
3、剂，不溶于石油舐苯、乙瞇、氯仿中，几不溶于水。OHHOOOHOR0H0芸香昔R二一葡萄糖一鼠李糖榊皮素R=H（三）实验原理由槐花米中提取芸香昔的方法很多，本实验是根据芸香昔在冷水和热水中的溶解度差异的特性进行提取和精制，或根据芸香背分子中具有酚径基，显弱酸性，能与碱成盐而增大溶解度，以碱水为溶剂煮沸提取，其提取液加酸酸化后则芸香背游离析岀。（四）实验内容1.芸香昔的提取方法I:水提取法见书方法II:碱溶酸沉法见书1.芸香昔的精制见书1.芸香昔、榊皮素及糖的检识取芸香昔、橱皮素少许，分别用8ml乙醇溶解，制成试样溶液，按下列方法进行实验，比较昔
4、元和昔的反应情况。（1）Molish反应：収试样溶液各2ml,分置于两支试管中，加10%Q■蔡酚乙醇溶液lml,振摇后倾斜试管45。,沿管壁滴加2ml浓硫酸，静置，观察并记录两液面交界处颜色变化。（2）盐酸■镁粉反应：取试样溶液各2ml,分别置于两支试管中，各加入镁粉少许，再加入盐酸数滴，观察并记录颜色变化。（3）醋酸镁反应：取两张滤纸条，分别滴加试样溶液后，加1%醋酸镁甲醇溶液2滴，于紫外灯下观察荧光变化，并记录现象。（4）三氯化铝反应：取两张滤纸条，分别滴加试样溶液后，加1%三氯化铝乙醇溶液2滴，于紫外灯下观察荧光变化，并记录现象。（5）
5、链■柠檬酸反应：取试样溶液各2ml,分别置I于两支试管中,加2%二氯氧错甲醇溶液3〜4滴，观察颜色，然后加入2%柠檬酸甲醇溶液3〜4滴，观察并记录颜色变化。（6）纸色谱检识支持剂：新华层析滤纸（中速,20CMX7CM）试样：自制芸香昔乙醇溶液自制榊皮素乙醇溶液对照品：芸香昔对照品乙醇溶液榊皮素对照品乙醇溶液展开剂：正丁醇■醋酸■水（4：1：5上层）或15%醋酸溶液显色剂：1）在可见光下观察斑点颜色，再在紫外灯下观察斑点颜色2）喷雾三氯化铝试剂，置日光下及紫外灯下观察并记录斑点的颜色变化。（7）薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na试样：自制
6、1%芸香昔乙醇溶液自制皮素乙醇溶液对照品：1%芸香昔对照品乙醇溶液1%榊皮素对照品乙醇溶液展开剂：氯仿■甲醇■甲酸（15：5：1）显色剂：喷雾1%三氯化铁和1%铁氧化钾水溶液，临用时等体积混合（8）糖的纸色谱检识取糖的供试液做径向纸色谱，和已知糖液作对照，可得到与葡萄糖、鼠李糖相同Rf值的斑点。支持剂：新华层析滤纸（圆形）试样：糖的供试液对照品：1%葡萄糖对照品水溶液1%鼠李糖对照品水溶液展开剂：止丁醇■醋酸■水（4：1：5上层）显色剂：喷雾苯胺■邻苯二甲酸试剂，于105°C加热10分钟或红外灯下加热10-15分钟，显棕色或棕红色斑点。1.在
7、提取前应将槐花米略捣碎，使芸香莒易于被热水溶出。2.本实验直接用沸水由槐花米中提取芸香昔，收得率稳定，且操作简便。如用碱溶酸沉法提取，加入石灰乳可以达到碱性溶解的冃的，又可除去槐花7米中所含的大量粘液质，但应严格控制其碱性pH8〜9,不可超ilpHlOo如pH值过高，加热提取过程中芸香昔可被水解破坏，降低收得率。加酸沉淀时，控制pH3〜4,不宜过低，否则芸香昔可生成yang盐而溶于水，也降低收得率。1.在提取过程中，加入硼砂的目的是使其与芸香昔分子中的邻二酚羟基发生络合，既保护了邻二酚羟基不被氧化破坏，又避免了邻二酚羟基与钙离子络合（芸香昔的
8、钙络合物不溶于水），使芸香昔不受损失，提高收得率。（六）思考题1・黄酮类化合物还有哪些提取方法？芸香背的提取还可用什么方法？2.酸水解常用什么酸？为什么用硫酸比用盐
