仔猪链球菌的分离鉴定

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1、仔猪链球菌的分离鉴定摘要：某一养猪场，45日龄的断奶仔猪1200头，英中，20多头45日龄的断奶仔猪，出现精神沉郁，食欲废觉，发烧41〜42°C,发病后的2、3天，出现了严重的食欲废觉，个别的45tl龄的断奶仔猪出现了神经症状，典型的症状后肢关节对称性肿胀，有的45日龄的断奶仔猪不表现任何的症状出现突然死亡。为了确定引起45日龄的断奶仔猪发病及突然死亡的病原菌,首先对突然死亡的45日龄的断奶仔猪进行剖检，从无菌采集肝脏、肺脏、肾脏、心血、淋巴结等病料组织中分离1株病原菌，对分离1株病原菌通过培养特性鉴定、细菌

2、形态学观察、生化特性等鉴定等方法，从45日龄断奶仔猪的体内分离到的1株病原菌被鉴定为链球菌。将从45日龄仔猪体内分离的链球菌肌肉注射攻毒给小白鼠结果显示，从45日龄仔猪体内分离的链球菌具有很强的致病性。因此，用K-B药敏纸片法对从45日龄仔猪体内分离的链球菌进行药敏试验分析其耐药性，结果显示，分离菌株对头孑包曲松、氨节西林、阿莫西林、头砲他定、青霉素6种药物高度敏感。关键词：仔猪；链球菌；分离鉴定；随着我国养猪业的发展，在我国的大部分地区猪的养殖已经形成集约化养殖及规模化养殖。我国猪的养殖主要集屮山东、河北、

3、河南、江苏等多个省市养地区，猪的养殖数蛍越来越多，猪的相关的传染性疾病越来越多，越来越复杂。养殖八对猪的相关的传染性疾病也愈来愈重视。一般的猪的相关的传染性疾病主要包括病毒性、细菌性疾病。其屮，链球菌病是断奶仔猪急性死亡和关节肿胀的主要病原菌，仔猪感染了链球菌后，死亡率均较高能达到50%以上，仔猪的链球菌病，严重危害着养猪业的发展。因此，断奶仔猪的链球菌病病成为临床上常见的细菌性传染性疾病之一，仔猪链球菌病是由链球菌引起不同阶段猪的一种急性、热性、败血性传染病，可以感对不同阶段的猪，感染率和死亡率均较高。尤其

4、对仔猪的致病性最强，危害最严重。链球菌病发病无明显的季节性，常年均有引发仔猪发病，临床上主要表现为急性败血症，关节肿胀等，表现神经症状，浑身抽搐，麻痹死亡。笔者通过45日龄发病死亡断奶的仔猪的的临床症状表现、病理剖检变化、实验室综合诊断技术、致病性试验，确定引起45日龄的断奶仔猪发病及突然死亡的病原菌为链球菌，并对链球菌进行了药敏试验,分析其耐性，为该病的防治提供了研究基础。1•发病情况某一养猪场，45日龄的断奶仔猪1200头，其中，20多头45日龄的断奶仔猪，出现精神沉郁，食欲废觉，发烧41~42°C,发病

5、后的2飞天，出现了严重的食欲废觉，个别的45日龄的断奶仔猪出现了神经症状，典型的症状后肢关节对称性肿胀，有的45日龄的断奶仔猪不表现任何的症状出现突然死亡。2•临床证状45日龄的断奶仔猪1200头，其中，20多头45日龄的断奶仔猪出现了精神沉郁，发热41-42°C,食欲开始减少，到后期出现了食欲废绝，出现神经症症状，四肢呈现了游泳样运动，抽搐麻痹而死，关节肿大。1•病理剖检变化对45FI龄断奶死亡的仔猪进行病理组织学剖检，观察其病理组织学变化。剖检变化可见,肝脏肿大、岀血，形成出血斑，呈蓝紫色；颌下淋巴结、腹

6、股沟管淋巴结、肠系膜淋巴结肿大、出血；腹腔均有淡黄色渗出液，气管、喉头有不同程度的肿胀、出血；45日龄断奶出现了肺脏肿胀、岀血；胃底部区及肠道有出血点，肠壁变薄，肠黏膜脱落；关节炎肿胀，切开后，有炎性渗出物渗出，关节面肿胀。3•细菌分离培养与形态学观察无菌采集45日龄断奶死亡的仔猪的肝脏、肾脏、心血、关节渗岀液等病料组织接种于7%绵羊脱纤血液营养培养基上，37°C培养12-16h后，在7%绵羊脱纤血液营养培养基生长出菌落，生长出来的菌落呈淡灰色、大小一致透明、圆形小菌落，呈现典型的B溶血现象,挑起7%绵羊脱纤

7、血液营养培养基上，呈现典型的B溶血现象的菌落，革兰氏染色观察，分离菌株呈单个的或者双排列的阳性球菌。4•分离菌株的生化鉴定挑取7%绵羊脱纤血液营养培养基上单个菌落接种于含5%血清的TSB培养基里，37°C震荡培养12・16h后，按照说明加入鉴定链球菌RaidID32STREP试纸条中，37°C培养24h后，进行生化试验鉴定，，链球菌RaidID32STREP试纸条结果显示，分离菌株为链球菌。5•细菌的的致病性试验挑取7%绵羊脱纤血液营养培养基上单个菌落接种于含5%血清的TSB培养基里，37°C震荡培养12・1

8、6h后，调整菌液浓度(105cfu/mL),将10只小白鼠分为2组，1组每只小白鼠肌肉注射分离菌株().5mL,2组，肌肉注射口服等量的生理盐水，攻毒12h,观察7天，记录每组小鼠的死亡数和发病情况，结果显示，在攻毒后的48h,1组小鼠出现全部死亡，2组健康存活，因而，证实了从45H龄断奶死亡的仔猪体内分离链球菌具有很强的致病性。6•药敏试验用K-B药敏纸片法对仔猪源链球菌进行药敏试验，结果显示，分