光密度法测定微藻生物量

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1、第22卷第3期暨南大学学报(自然科学版)VOI.22NO.32001年6月JOurnaIOfJinanUniversit(yNaturaIScience)Jun.2001光密度法测定微藻生物量沈萍萍,王朝晖,齐雨藻,谢隆处,王艳(暨南大学水生生物研究所,广东广州510632)[摘要]目的:为准确而又快速的测量微藻生物量.方法:选用15种不同微藻,在实验室中分别测定其细胞密度及光密度并进行直线回归分析,同时采用吸光系数来估算浮游植物生物量.结果:得出了浮游植物吸光系数与细胞碳含量(即生物量)的回归方程:I(g!)=-1.046

2、5In(")+4.2551.结论:这是一种利用光密度法来测量微藻生物量的简单有效的方法.[关键词]微藻;吸光系数;生物量;碳含量;光密度法[中图分类号]@949[文献标识码]A[文章编号]1000-996(52001)03-0115-05藻类的生物量测定是藻类生长、生理生化、生态等方面研究的必要手段,藻类生物量测定方法很多,常使用的有:计数细胞个体数,测干重,叶绿素法,浊度法,最大比生长速率法等[1].通常的显微直接计数法,光密度(OD)测量法,叶绿素测量法,COunter电子显微计数法等各有优缺点.最后一种方法由于大多数微

3、藻形状不规则,加之仪器本身昂贵,因此在一般实验室中应用并不普遍.而叶绿素法操作复杂且所需样品量较大,相比而言直接计数法和光密度法适用的范围就广泛的多.到目前为止,计数细胞个体数仍然是最准确,最令人满意的方法之一,可以获得最基本的种群信息[2].但对于微藻来说,大小相差很大,小的只有几个微米,大的可达几百微米,而且形态各异,有的是单细胞(运动或不运动),有的是群体,其体型也多种多样,有球形、椭圆形、锥形、链状、丝状等.因此微藻的直接计数法不但工作量大,不同种类间由此估算的生物量差异也较大.光密度法操作简单,需要样品量少,能够实

4、现快速测定.因此我们在实验室培养中期望能找到一条简便有效的途径,准确而又快速的测量出微藻的生物量.!材料与方法!.!藻种实验选用了5种绿藻,4种甲藻,1种金藻,1种针胞藻,1种棕囊藻作为实验材料.均由暨南大学水生生物研究所藻种室提供.其形态特征[3]及大小见表1.!."方法藻种培养于20C,光照度4000Ix,光暗比为1211121.待培养4~5c,用754-UV分光光度计在600~750nm之间每隔10nm进行波长扫描,绘制吸收曲线,确定最大吸收峰波长.然后将藻液稀释成浓度梯度,在最大吸收峰处测其OD值,同时显微计数.小于

5、10的藻,用!m血球计数板计数,大于10的藻用0.1mL浮游植物计数框计数细胞密度(至少计数3次).!m以OD值对细胞密度作图,求其吸光系数.[收稿日期]2000-11-15[作者简介]沈萍萍(1975~),女,山东青岛,98级硕士研究生.116暨南大学学报(自然科学版)2001年表!微藻形态特征微藻名称(学名)形状特征大小是否群体扁藻(Platymonaselliptica)细胞卵圆型.具有两条鞭毛,20~2(411~16)!mX12~否游动活泼.1(511~14)!mX7~10!m微小小球藻和蛋白核小球藻单细胞,球形.否

6、绿(Chlorellaminutissima直径3~5!m和C.pyrenoidosa)直径3~10!m盐藻(两株)(DunaliellasalinaStrain1)单细胞,梨形.无细胞壁,Strain122!mX14!m否(DunaliellasalinaStrain2)有两条鞭毛,游动活泼.Strain29!mX3!m藻羊角月牙藻单细胞,呈镰刀形弓状,无8~12!mX5~6!m否(Selenastrumcopricornutum)鞭毛,不能运动.异微球藻鞭(NanochlorpsisSp.)单细胞,圆形,无鞭毛.直径2~

7、4!m否藻海洋原甲藻单细胞,一侧较扁,另一侧30!mX20!m否(Prorocentrummicans)圆弧形.具鞭毛,运动.锥状施氏藻单细胞,细胞前端锥形,底20!mX15!m否甲(Scrippsiellatrochoidea)端钝圆.有时聚集在一起.具有鞭毛,能够运动.塔玛亚历山大藻单细胞或少数几个细胞连接40!mX45!m否/是(Alexandrumtamarense)成链状.具鞭毛,能运动.藻红色裸甲藻单细胞,无细胞壁,具有30!mX20!m否(Gymnodiniumsanguineum)鞭毛,游动.金球等鞭金藻裸露

8、的运动细胞,椭圆形.具有两5~6!mX2~4!mX否藻(Isochrysisgalbana)条等长的鞭毛,运动缓慢.2.5~3!m针赤潮异湾藻单细胞,呈长椭圆形,具鞭毛,能游胞15!mX10!m否藻(Heterosigmaakashiwo)动.球形棕囊藻(两株)定圆形或卵圆形单细胞及球形群

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