D-氨基葡糖盐酸盐体内外抗肿瘤作用实验探究

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1、D■氨基葡糖盐酸盐体内外抗肿瘤作用实验摘要:目的研究D■氨基葡糖盐酸盐(GAH)的抗肿瘤作用。方法用SRB法观察GAH的体外抗肿瘤作用,通过GAH对S180,H22荷瘤小鼠瘤重和生存时间的影响,观察GAH的体内抗肿瘤作用。结果GAH可明显抑制S180小鼠瘤体的生长,明显延长H22荷瘤小鼠的生存时间;对3种人癌细胞(HepG-2,LS-174,BGC-7901)具有一定的杀伤作用,以对HepG-2细胞的抑制作用较为明显。结论GAH于实验条件下在体内外均有一定的抗肿瘤作用。关键词:D■氨基葡糖盐酸盐;抗肿瘤作用中

2、图分类号:R979.1文献标识码:A文章编号:1672-979X(2007)02-0008-03StudyonAntitumorEffectofD-GlucosamineHydrochlorideinVitroandinVivoXUHai-jiao1,CAOXiu-mingK2,JIYu-bin1,LIHui1(1.CenterofResearchandDevelopmentonLifeSciencesandEnvironmentalSciences,HarbinUniversityofCommerce,Ha

3、rbin150076,China;2.SchoolofLifeSciences,OceanUniversityofChina,Qingdao266003,China)Abstract:ObjectiveTostudytheantitumoractivityofD-glucosaminehydrochloride(GAH).MethodsTheantitumoractivityinvitrowasobservedbySRB,andtheeffectinvivowasstudiedbyobservingtumor

4、weightandsurvivaltimeofS180andH22mice.ResultsGAHwasapowerfulantitumoragentin3kindsofhumancancercelllines(HepG-2.LS-174.BGC-7901),especiallyHepG-2.GAHalsoinhibitedthegrowthofcancercellsofS180miceandproIongedthesurvivaltimeofH22mice・ConclusionGAHhasarelativeh

5、ighpotentantitumoreffectbothinvitroandinvivo.Keywords:D-glucosaminehydrochloride;antitumoractivityhydrochloride,GAH)化学名2■氨基2脱氧・D■葡糖盐酸盐,其结构为D■葡糖分子中C2■軽基被氨基取代,因氨基显碱性,与盐酸成盐[1,2]。目前,GAH抑制癌细胞及肿瘤细胞生长等作用的研究日益受到重视。本研究围绕GAH的体内、外抗肿瘤作用展开,以冀为本品的深入研究及应用提供实验基D■氨基葡糖盐酸盐又称葡

6、糖胺盐酸盐D-glucosamine1材料1.1肿瘤细胞系和瘤株人肝癌细胞(HepG・2X肠癌细胞(LS/74胃癌细胞(BGC-7901X小鼠肉瘤(S180>小鼠肝癌(H22)(哈尔滨医科大学肿瘤防治所提供b1.2动物昆明种小鼠(黑龙江省肿瘤防治研究所提供,体重an20±2.0g,雄性。合格证号:黑动字P001010141.3主要试剂与仪器GAH(中国海洋大学刘万顺教授惠赠);小牛血清、RPMI-1640培养液(Gibco);SRB(Sigma);5■氟尿吨味(5-FU,上海海普制药厂);环磷酰胺(CTX,

7、江苏恒瑞医药股份有限公司);LNA-III型二氧化碳培养箱(日本);EL311型酶标仪(美国BIO-TEK公司卜2方法2.1体外抗肿瘤作用SRB法检测GAH体外细胞毒。SRB法为一种细胞毒实验,以检测培养细胞的蛋白质来确定细胞生长和存活情况。本实验通过SRB法检测GAH体外对HEPG-2,BGC-7901,LS-174细胞的抑制作用[3]。实验所用细胞于含5%C02的379培养箱中培养传代,用含10%胎牛血清及100U/mL青霉素、100pg/mL链霉素的RMPI1640培养液培养用0.25%胰酶消化传代,每

8、3〜4d换培养基1次,待细胞长满及时传代。将对数生长期的细胞经0.25%胰酶消化分散后计数制成细胞悬液,细胞浓度调至1x104个/mL,接种于96孔板,100pL/孔。培养箱中培养24h后,每孔加入GAH100pL(终浓度分别为0.05,0.1,0.2,0.4mg/mL):同时设空白对照孔(每孔加RPMI-1640培养液100pL);阳性对照组(每孔加5-FU100

9、jL,终浓度为0.2mg/mLb

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