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1、益气补肾口服液体外抗肿瘤作用实验探究摘要：目的：研究益气补肾口服液的体外对SMMC-27721细胞及A-549细胞生长抑制作用。方法：采用活细胞计数法及MTT法观察益气补肾口服液对上述两种人瘤细胞进行检测和观察。结果：益气补肾口服液对上述两种人瘤细胞的生长增殖曲线具有明显的抑制作用。对两种人瘤细胞降解MTT半数抑瘤浓度(IC50)分别为1.02mg/mL.0.73mg/mL；对两种人瘤细胞的集落形成有明显的抑制作用，最大抑制率分别为78.48%、89.17%o结论：益气补肾口服液体外具有明显的抗肿瘤活性。关键词：益气补肾口服液；SMMC-27721细胞；A-549细胞；生长抑制❷中图分类
2、号：R273文献标识码：A文章编号：1673-7717(2008)11-2445-02AnExperimentalStudyonAnti-tumorEffectsofYiqiBushenLiquidinVitrogRUANYe❷ping,HUXiu❷min❷(ZhejiangChineseMedicalUniversity,Hangzhou310053,Zhejiang,ChinaAbstract：Objective：Toinvestigatetheariti—tumoreffectsofYiqiBushenliquidonhomosapienhepatomacarcinomacells
3、,SMMC-27721,andhomosapienlungcarcinomacells,A~549invitro.Methods：Viablecellscount,MTTstainingassaywereusedtoassesstheanti—tumoreffectsofYiqiBushenliquidonthetwokindcells.Results:YiqiBushenliquidhadacertaininhibitoryactionongrowthcurveofSMMC27721andA549cells.TheIC50ofthetwocellswere1.02mg/mLand0.7
4、3mg/mLrespectively.Italsocouldinhibitthetwocellsformingcolonies.ThehighestinhibitoryrateofYiqibushenliquidagainstSMMC27721andA549cellswere78.48%and89.17%respectively.Conclusion：YiqiBushenliquidhavestronganti-tumoreffectsinvitro•❷Keywords:YiqiBushenliquid；SMMC-27721cells；A-549cells；growthinhibitin
5、g益气补肾口服液根据肿瘤手术、化疗、放疗后正气亏虚之病机特点而组方，由黄英、茯苓、女贞子、枸杞子、猪苓、莪术、半枝莲等组成，具有补气固表、滋补肝肾、利水渗湿、活血止痛、败毒抗癌等功效。笔者已经研究表明，益气补肾口服液具有较好的体内抗肿瘤作用（另文报道），现对其体外抗肿瘤作用的实验研究报道如下，为临床用药提供实验依据。❷1实验材料❷细胞株：人肝癌SMMC-27721细胞株、人肺癌A-549细胞株均由浙江大学医学院提供提供。益气补肾口服液的处方：黄英20g,茯苓12g,女贞子12g,枸杞子12g,猪苓12g,莪术10g,半枝莲30g,藤梨根30g,生米仁30g,八月札10g,红枣30g,炙甘
6、草6g。将药放入锅中浸泡lh,加水煎煮lh,滤出药液，再加水煎煮30min,过滤，合并药液，浓缩药液分别至4.28g/mL.2.14g/mL.1.07g/mL3个浓度，分别作为高、中、低3个剂量组的给药浓度。MTT试剂（美国Sigma）,RPMI1640细胞培养液（日本日水制药株式会社），小牛血清购于杭州四季青生物工程材料研究所，批号20060326c倒置显微（Nikon808434）,C02培养箱（日本Forma）,酶标仪（LabsystemsDragonwellscanMK3）o❷2方法及观测指标❷2.1益气补肾口服液对两种瘤细胞生长曲线的影响[1]①细胞培养：5%C02培养箱，用含
7、10%小牛血清及青、链霉素各1X10❷5U/L的RPMI1640培养基培养，收集对数生长期细胞进行实验。②采用细胞排染实验计细胞死亡数：选取对数生长期的两种人肿瘤细胞，用含10%小牛血清的RPMI-1640培养液稀释至浓度约lX104/mL,均匀加入24孔培养板，每孔ImL,按实验设计分别加益气补肾口服液药液及阴性对照组加入等体积的溶剂，每浓度设21复孔。置于37°C饱和湿度、5%C02培养箱中，在培养后即刻及1、2、3、4、5、6
