高速逆流色谱技术原理及应用领域

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1、高速逆流色谱的技术原理及应用领域上海同田生物技术有限公司公司位于上海张江科技园,占地约30亩,建筑面积约20000平方米,总投资人民币6000万元,其前身是成立于1999年2月位于深圳市清华大学研究院的深圳市同田生化技术有限公司。公司致力于高速逆流色谱仪(HSCCC)、高纯度天然产物有效成分单体、天然药物原料/中间体的研究开发、生产和销售。作为多分离柱高速逆流色谱仪国家新型专利的拥有者、高速逆流色谱领域的领导者,我们与通用电气医疗生物科学中国有限公司(GEHealthcareBio-sciencesco.,ltd.)建立了

2、长期的合作伙伴关系.TBE300A+ÄKTAPrime在高速逆流色谱技术领域,公司所研制并批量生产拥有自主知识产权的新型多分离柱高速逆流色谱仪,性能稳定可靠,有分析型、半制备型、制备型等7种不同产品:泰国德国国内最大最早的专业对照品标准品研发及生产企业之一拥有长达8年的对照品研发及生产经验配备有完整的对照品研发中心,检测中心和生产中心(对照品高速逆流色谱生产线)同田对照品纯度达99%以上,均通过严格的质量检测,包括HPLC,NMR,MS,UV等方法的鉴定.银杏内酯B银杏内酯A银杏内酯C部分对照品获得国家质量监督检验检疫总局

3、颁发的标准物质证书天然植物<银杏,大豆>单体提取物-上海市高新技术成果转化项目<石杉碱甲>-上海市高新技术成果转化项目同田对照品质量目前已得到美国,德国,瑞士,英国,新加坡等多家标准品经销商及科研院校的认可,公司与国内外多家科研单位保持长期稳固的合作。高速逆流色谱HighSpeedCounter-CurrentChromatography一、逆流色谱(CCC)原理及分类二、高速逆流色谱(HSCCC)的原理三、高速逆流色谱的应用实例逆流色谱的原理液-液分配色谱:利用样品中各组分在两相溶剂间分配比的差异,进行分离。它是不用固态

4、载体的全液态的液-液分配色谱技术.优点:不存在样品的不可逆吸附,理论回收率为100%极大地避免了样品的变性问题操作简单,无需太多样品前处理等。20世纪50年代,逆流分溶法(CCD)由Craig发明的非连续性分溶装置(设备庞大复杂、易碎、溶剂体系容易乳化、溶剂耗量大、分离时间太长)20世纪60年代被液相色谱代替20世纪70年代,逆流色谱(CCC)。首先出现液滴逆流色谱(DCCC)收集器进样器溶剂泵约300根管柱上行法收集器进样器溶剂泵约300根管柱下行法优点:DCCC仪器轻巧简便,能避免乳化或泡沫的产生。缺点:流动相流速低,

5、每小时只有十几毫升;分离过程长,一般需要几十小时才能完成一次几个组分的分离.液滴逆流色谱(DCCC)旋转腔室逆流色谱(RLCCC)CCCHSES恒定的引力场HDES可变的引力场引力离心力离心力同步行星式运动RLCCCCPCDCCCHSCCC逆流色谱的分类流体静力学平衡(HSES)流体动力学平衡(HDES)逆流色谱的基本体系示意图高速逆流色谱(HSCCC)的原理固定相的保留原理如上图所示,螺旋柱中注满差不多相等体积的两相溶剂(见右侧试管),在螺旋柱的匀速转动下两相溶剂受到“阿基米德螺旋力”的作用,竞争性地朝首端移动。不久,两

6、相在螺旋管地首端建立一种流体动力平衡,按一定比例共存,而这种情况发生在每一圈螺旋柱内。并且任何一相的超量都会被推向螺旋管的尾端一侧。混合区:在靠近离心轴心大约有四分之一的区域,两相的激烈混合静置区:两溶剂相分成两层较重的溶剂相在外部较轻的溶剂相在内部转速:800rpm13次/秒混合分离在分离柱运动一个周期时(经过《分离区》、《混合区》、《分离区》)的两相分配过程分离管内侧———————————————————————————————————————………………………………ooooo……ooooo②……oooo…………………

7、……………………………………………………………ooo…………oooo………………③………………………………………………………oooo①oo……ooooooo……oooo…①……………………………①②③④ooooooooooooooooooooooooo……③……oooo…………oooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooo…oo……ooo④oo……ooo…ooooooooooooo④oooooooooooooooooooooooooooooooooooooo

8、oo………oooo……oooo………oooooooooooooooooo②ooooooooo———————————————————————————————————————分离管外侧①③组分,由于在轻相中的分配系数过大不易被流动相洗脱下来②④组分,根据在重相的分配系数大小按顺序洗脱出来分离区………………―

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