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时间:2019-05-14
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1、高速逆流色谱(high-speedcountercurrentchromatography,HSCCC)是20世纪80年代发展起来的一种连续高效的液—液分配色谱分离技术,它不用任何固态的支撑物或载体。它利用两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立起一种特殊的单向性流体动力学平衡,当其中一相作为固定相,另一相作为流动相,在连续洗脱的过程中能保留大量固定相。由于不需要固体支撑体,物质的分离依据其在两相中分配系数的不同而实现,因而避免了因不可逆吸附而引起的样品损失、失活、变性等,不仅使样品能够全部回收,回收的样品更能反映
2、其本来的特性,特别适合于天然生物活性成分的分离。而且由于被分离物质与液态固定相之间能够充分接触,使得样品的制备量大大提高,是一种理想的制备分离手段。它相对于传统的固—液柱色谱技术,具有适用范围广、操作灵活、高效、快速、制备量大、费用低等优点。目前HSCCC技术正在发展成为一种备受关注的新型分离纯化技术,已经广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域,特别在天然产物行业中已被认为是一种有效的新型分离技术;适合于中小分子类物质的分离纯化。我国是继美国、日本之后最早开展逆流色谱应用的国家,俄罗斯、法国、英国、瑞
3、士等国也都开展了此项研究。美国FDA及世界卫生组织(WHO)都引用此项技术作为抗生素成分的分离检定,90年代以来,高速逆流色谱被广泛地应用于天然药物成分的分离制备和分析检定中。逆流色谱原理:1. 逆流色谱是20世纪50年代源于多极萃取技术(非连续性)但是多极萃取设备庞大复杂、易碎、溶剂体系容易乳化,溶剂耗量大,分离时间长。2. 20世纪70年代,出现了液滴逆流色谱(DCCC)特点:(1)流体静力学原理(Hydrostaticequilibriumsystem,HSES) (2)分离时间过长、连接处容易出现渗
4、漏等3.20世纪70年代出现了离心分配色谱仪(Centrifugalpartitionchromatography,CPC)特点:(1)基于流体静力学原理(Hydrostaticequilibriumsystem,HSES),利用公转产生的单一力场 (2)连接处较多而且容易出现渗漏,清洗维护复杂4.20世纪80年开始出现了现在的高速逆流色谱,可称为最先进的逆流色谱特点:(1)基于流体动力学原理(Hydrodynamicequilibriumsystem,HDES) (2)通过公转、自转(同步行星式运动)产生
5、的二维力场,保留两相中的其中一相作为固定相(3)通过高速旋转提高两相溶剂的萃取频率,1000rpm旋转时可达到17次/s频率的萃取过程。5.HSCCC分离流程图应用领域:(1)天然产物已知有效成分的分离纯化(2)化学合成物质的分离纯化(3)中药一类、五类新药的开发(4)中药指纹图谱和质量控制研究(5)抗生素的分离纯化(6)天然产物未知有效成分的分离纯化(新化合物开发)(7)海洋生物活性成分的分离纯化(8)放射性同位素分离(9)多肽和蛋白质等生物大分子分离以及手性分离等仪器特点TBE高速逆流色谱特点运转稳定:多分
6、离柱国家专利技术,采用了三个螺旋柱串联连接,使在高速转动时保持最佳平衡,并有效保证设备稳定性,使运行噪音更小。不会出现在高速旋转的情况下由于仪器本身的不稳定而对分离体系产生影响。操作便捷:固定相、流动相均为液体,有广泛的液-液分配系统可供选择,体系更换方便、快捷;具无级变频调速功能,可轻松完成正反向转速调整。高分离率:能把天然产物有效成分分离提取到99%纯度。高回收率:不存在固态载体所造成的吸附损耗、样品变性等问题,理论上样品回收率非常高。成本降低:不用柱填料、不用更换分离柱,使用常规试剂,仪器运行和维护成本低
7、。精确控温:配备恒温控制装置专利技术,具有温控功能,精确控制分离过程的温度,有助于摸索实验条件,提高实验重复性;样品分离不受环境温度的影响,可通过调节温度改善样品的分离度,拓宽溶剂体系的选择范围。1三分离柱设计采用专利的三分离柱系统,更容易达到系统平衡,不会在高速旋转的情况下由于仪器本身的不稳定而对分离体系产生影响,而导致对样品分离度的降低.系统噪音小。2双六通阀设计 一个是进样六通阀,实现一个人独立操作进样的全过程;另一个为进出口切换六通阀,无需停机就能实现正反转的切换,实现正相和反相的洗脱,同时该设计可以帮
8、助排除系统管路中的气泡。3温控系统采用专利的温控系统,样品分离不受环境温度的影响,可通过调节温度改善样品的分离度,拓宽溶剂体系的选择范围。4大β值设计采用独特的设计,设计β值接近理论最大值。5变频调速调节速度快速精确,转速误差范围小于1%。6结构紧凑统一、操作便捷机电系统和分离柱系统统一在主机里面,面板设计操作便捷。质量优势——公司是国内唯一一家大规模生产高速逆流色谱的厂家,有着专业研
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