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1、中国微循环2005年6月第9卷第3期·185·文章编号:1007-8568(2005)03-0185-04·临床研究·流式细胞仪三标记法检测白细胞介素210对人树突状细胞表型的影响△史桂英,孙桂芝,周同,金慧芳,张玉梅,赵亚鹏,陈楠【摘要】目的观察白细胞介素(IL)210对体外培养人树突状细胞(DC)表型的影响,探讨流式细胞术三色荧光标记抗体检测细胞表面抗原的方法及意义。方法通过SCF、GM2CSF、TGF2β1、Flt23和+TNF2α体外培养体系,将脐血CD34造血干细胞诱导扩增获得DC,并于成熟过程中
2、用重组人IL210进行干预。采用流式细胞术的三色荧光标记(FITC2、PE2、CY2)单克隆抗体直接检测技术,分析细胞表型CD1a、CD11c、CD83、CD80、CD86和HLA2DR。结果IL210可下调成熟中DC表面CD11c、CD83、CD80和CD86的表达。结论IL210通过抑制DC表面黏附共刺激分子表达,可调节DC的递呈抗原功能;此外,采用流式细胞仪的三色荧光标记检测方法,不仅可以节约DC细胞用量,而且具有快速和准确的优点,值得推广应用。【关键词】流式细胞术;树突状细胞;细胞表型;白细胞介素2
3、10中图分类号:Q25文献标识码:BEffectofInterleukin-10onthePhenotypeCulturedHumanDendriticCellsbyFlowCytometryofThreeFluorescenceMarkerSHIGui2ying,SUNGui2zhi,ZHOUTong,etal.DepartmentofCytobiology,ShanghaiSecondMedicalUniversity,Shanghai200025,China【Abstract】ObjectiveThe
4、presentstudywasdesignedtodetecttheinfluenceofinterleukin(IL)-10uponthemorphologicfeaturesofculturedhumandendriticcells(DCs),toinvestigatethemethodandthe+meaningofphenotypeexaminedbyflowcytometryofthreefluorescencemarker.MethodsCordbloodCD34stemcellswereiso
5、latedandculturedinIMDMmediumwithSCF、GM-CSF、TGF-β1、Flt-3、TNF-α.DCswereinterferedbyrecombinationofhumanIL-10.HLA-DR、CD1a、CD11c、CD83、CD80andCD86wereassayedbyflowcytometryofthreefluorescencemarker(FITC-、PE-、CY-).ResultsTheexpressionofCD11c、CD83、CD80andCD86wasl
6、owerinIL-10group.ConclusionsIL-10mightinhibittheexpressionofadhesionandco-stimulationmolecules.ItwaspresumedthatIL-10mightadjusttheantigenpresentingfunctionofDCs.Inaddition,byusingthemethodofthreefluorescencemarker,wecouldsaveDCnumberneeded.Moreoverthismet
7、hodisfastandexact,whichisdeservedtobeapplied.【Keywords】Flowcytometry;Dendriticcells;Phenotype;Interleukin-10[1,3]树突状细胞(dendriticcell,DC)是目前所知功与其发育成熟状态密切相关。DC在发育成熟能最强的抗原递呈细胞,能够启动和维持包括肾脏过程中,表面黏附分子和共刺激分子表达上调,以[1,2]在内组织器官的免疫炎症反应。作为免疫调节及IL212分泌增加,这些均对其功能发挥起着至关[
8、1]细胞,DC既有免疫激活作用,也可诱导免疫耐受,重要的作用。IL210是目前公认的免疫炎症病理损伤中负调节因子,在抑制Th1为主的细胞免疫中基金项目:国家自然科学基金(39970340)和上海市自然科学基[4]具有重要作用。鉴于我们先前研究证实肾炎时金(02ZB14041,034119916)[5]作者单位:200025上海,第二医科大学细胞生物学教研室(史肾组织中可见大量DC分布,为此我们通过体外桂英,金慧芳
