一种可用于大规模单克隆抗体纯化的新型ProteinA填料_陈晓虹

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1、·228·中国生物制品学杂志2014年2月第27卷第2期ChinJBiologicalsFebruary2014，Vol.27No.2·技术方法·一种可用于大规模单克隆抗体纯化的新型ProteinA填料111111122陈晓虹，吴建国，曹传平，唐亮，曾贤，范佳君，李玉彬，赵丽丽，刘增田，222331程凡亮，张继环，马连明，宋华，白文，鞠佃文1.复旦大学药学院，上海201203；2.山东新时代药业有限公司，山东临沂273400；3.上海瀚康生物医药科技有限公司，上海200433摘要：目的比较不同型号ProteinA填料的性

2、能，筛选合适的ProteinA填料，用于大规模单克隆抗体（简称单抗）纯化。方法采用表达H02单抗的CHO细胞培养上清，测试不同供应商ProteinA填料的蛋白结合载量，选择合适的填料，用于大规模单抗纯化；检测宿主细胞蛋白（hostcellprotein，HCP）、外源DNA及ProteinA残留量，以评价其纯化效果；检测ProteinA柱在位清洗（cleaninginplace，CIP）效果，并验证其循环使用次数。结果AmsphereProteinAJWT203填料为合适的ProteinA填料，H02单抗大规模纯化后，可

3、有效去除HCP、DNA及脱落ProteinA；采用0.1mol／LNaOH进行CIP，经过300个循环，对H02单抗仍保持80%以上动态结合载量，ProteinA脱落无明显增加，对HCP、外源DNA、聚合体的去除能力无明显改变，层析图谱与初始基本一致，AmsphereProteinAJWT203填料的理化性质较稳定。结论AmsphereProteinAJWT203是一种可用于大规模单抗纯化的新型ProteinA填料。关键词：抗体，单克隆；纯化；ProteinA填料中图分类号：O657.7+3R392-33文献标识码：A文

4、章编号：1004-5503（2014）02-0228-07AnovelProteinAresinusedforlarge-scalepurificationofmonoclonalantibody*CHENXiao-hong，WUJian-guo，CAOChuan-ping，TANGLiang，ZENGXian，FANJia-jun，LIYu-bin，ZHAOLi-li，LIUZeng-tian，CHENGFan-liang，ZHANGJi-huan，MALian-ming，SONGHua，BAIWen，JUDian-w

5、en*CollegeofPharmacy，FudanUniversity，Shanghai201203，ChinaCorrespondingauthor:JUDian-wen，E-mail:dianwenju@fudan.edu.cnAbstract：ObjectiveTocomparethecharacteristicsofProteinAresinsofvarioustypesandscreenthesuitableProteinAresinforlarge-scalepurificationofmonoclonal

6、antibody（McAb）.MethodsThedynamicbindingcapacities（DBCs）ofProteinAresinsfromvarioussellersweretestedbyusingtheculturesupernatantofCHOcellsexpressingMcAbH02，basedonwhichthesuitableProteinAresinwasselectedforlarge-scalepurificationofMcAb.Thepurificationefficacywasev

7、aluatedbytestforhostcellprotein（HCP）andDNAresidues.TheProteinAresinwasevaluatedforcleaninginplace（CIP）efficacy，andverifiedforcyclingnumber.ResultsAmsphereProteinAJWT203wasselectedasthesuitableresin，withwhichHCP，DNAandProteinAresiduewereremovedeffectivelyafterlarg

8、e-scalepurificationofMcAbH02.After300CIPcyclesusing0.1mol／LNaOH，theDBCtoMcAbH02wasstillmorethan80%，whiletheProteinAresidueshowednosignificantincrease，andtherem