关于免疫检测技术的研究

《关于免疫检测技术的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、关于免疫检测技术的研究2008级生物技术200806044015向鹏英指导教师袁万安(重庆文理学院生命科学与技术学院重庆402168)摘要：本文介绍了免疫检测新技术以及它们的应用，说明了现代免疫检测技术在人们的生产、生活中占有比较重要的地位。值得大家关注和广泛推广。关键词：免疫检测技术；检测；应用ResearchonimmunoassaysXIANGPeng-yingInstructorYUANWan-an(CollegeofLifeScienceandTechnology,ChongqingUniverityofArtandSciences,Chongqing402168,China)Ab

2、stret：Thispaperintroducesthenewtechnologyoftheimmunizationandtheirapplications.Andillustratesthatthetechnologyoftheimmunizationplaysaimportantroleinhuman'slifeandproduction.Itisworthpeople'sattentionandpopularization.Keywords:immunedetectiontechnology;detection;application免疫学技术与现代物理、化学技术相结合产生很多新型的免

3、疫检测技术。主要有SPA免疫检测技术、牛•物素■亲和素免疫检测技术、胶体金免疫检测技术、免疫电镜技术、免疫传印技术、免疫沉淀、PCR-ELISA.化学发光免疫测定、免疫传感器等。1免疫检测技术的种类LISPA免疫检测技术SPA是葡萄球菌蛋白A的简称，是金黄色球菌细胞壁的表面蛋白。它具有能与多种动物IgG的Fc片段相结合的特性，因而成为免疫检测技术的一种极为有用的试剂。1.1.1SPA免疫检测技术的特性SPA的分了量为12〜15ku,为多肽链，内含3个高度相似的IgGFc片段结合区，每区由50个以上的氨基酸组成。SPA的等电点为pH5.1,其天然结构十分稳定。SPA具有和人及许多动物如豚鼠、猪

4、、小鼠、兔、猴等的IgG结合的能力，与大多数禽类IgG不结合。1.1.2SPA在免疫检测技术的应用(1)SPA放射免疫分析在固相放射免疫分析中，可利用,25I-SPA代替标记的抗抗体。此法灵敏度高，可检测出ng/mL的抗体含量，需时短，重复性好。同样也可以建立检测抗原的SPA放射免疫分析。(2)SPA免疫酶标记技术川HRP-SPA代替免疫酶纽化染色间接法中的酶标抗抗体，具有染色时间短、灵敏性高和背景染色浅等优点。在ELISA和Dot-ELISA屮，也可川HRP-SPA代替酶标抗抗体。(3)SPA荧光检测技术可用异硫貳酸荧光素标记纯化的SPA,以代替免疫荧光抗体染色间接法中的荧光素标记的抗抗体

5、。(4)协同凝集试验利用葡萄球菌蛋白A与IgG类抗体Fc片段结合的特性，使葡萄球菌成为结合了特界性抗体的致敏颗粒，通过凝集反应，对细菌、病毒等进行定型和鉴定。（5）免疫球蛋白的制备和分析SPA可作为一种比较理想的提纯和分析免疫球蛋白的制剂。1.2生物素•亲和素免疫检测技术利用生物素与亲和素专一性结合以及生物素、亲和素既可以标记抗原或抗体，又可被标记物所标记的特性，可建立生物素■亲和素系统来显示抗原抗体特异性反应的各种免疫检测技术。1.2.1生物素与亲和素的特性（1）生物素生物素（biotion）是一种广泛分布于动、植物组织的生长因子，亦称辅酶R或维牛索H,尤以蛋黄、肝、肾组织屮含量较高。利用

6、牛物索的竣基加以化学修饰后,可以制成各种活性基团的衍生物，亦称活化生物素。（2）亲和索亲和索（avidin）是一种存在于鸡蛋清中的碱性糖蛋白，分了质屋为68ku,等电点为pH10.5,纯品呈白色粉末，易溶于水。对热的耐受性较强，经80°C温度作用2n）in仍保持活性。1.2.2亲和素•生物素系统免疫检测技术类型（1）亲和素-生物素-过氧化酶技术（ABC法）该技术是利用亲和素分别连接生物索标记的第2抗体的生物索标记的酶。可应用于以下两个方面：a组织切片和细胞悬液中抗原的检测b在免疫电镜中的应用（2）桥亲和素■生物素技术（BRAB）此技术是利用生物素分别标记抗体和酶，然后以亲和素为桥，把两者连接

7、起来。（3）标记生物索-亲和索技术（LAB）该技术是以生物素标记抗体作第1抗体，酶标记亲和素作第2抗体。（4）生物素■亲和素或链霉亲和素EL1SA检测技术包括BAB-ELISA,BA-ELISA和ABC-ELISA等技术。1.3免疫胶体金检测技术免疫胶体金标记技术是以胶体金颗粒为示踪标记物或显色剂，应用于抗原抗体反应的-种新型免疫标记技术。胶体金即水溶胶，是一种带负电荷的疏水胶体溶液，具冇一般溶胶的特性，主要