根霉原生质体二次基因改组选育高酶活力菌株探究【开题报告】

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1、毕业论文开题报告生物技术根霉原生质体二次基因改组选育高酶活力菌株研究⒈课题研究意义及国内外研究现状根霉在自然界分布很广，用途广泛，其淀粉酶活性很强，是酿造工业中常用糖化菌。我国最早利用根霉糖化淀粉（即阿明诺法）生产酒精。根霉能生产延胡索酸、乳酸等有机酸，还能产生芳香性的酯类物质。根霉亦是转化甾族化合物的重要菌类。与生物技术关系密切的根霉主要有黑根霉、华根霉和米根霉。本实验的研究是原生质体融合技术的基础，同时也是关键的步骤。对根霉的灭活原生质体二次融合后代进行进一步的研究，经人工培养多代后进行正反杂

2、交试验，观察菌株的形态特征、部分生理生化形态分析以及的分析，为得到品种更优秀的，有利遗传更稳定的，作用范围更广的后代作铺垫。⒉课题研究的主要内容、预期目标和研究方案一、根霉二次融合后代原生质体的制备、融合与再生1.渗透压稳定剂的种类和浓度对制备、融合的影响2.酶解温度和时间对制备、融合的影响二、菌体培养基的制备、灭菌，二次融合后代酶活检测分析1.多个后代菌株进行形态特征分析2.杂交代后代1、3、5代蛋白酶活力、淀粉酶活力、糖化酶活力、SDS电泳三、预期目标1.获得二次融合根霉后代菌株进行形态生理生

3、化分析，了解后代遗传形态2.获得二次融合根酶后代菌株进行蛋白酶活力、淀粉酶活力、糖化酶活力、SDS电泳，得出数据于各个菌株进行比较。⒊课题进度计划2010年10月—2010年11月文献检索，收集资料，完成开题报告2010年11月—2010年12月菌丝的培养及提取，原生质体融合2010年12月—2011年3月进行蛋白酶、淀粉酶、糖化酶、SDS电泳的实验2011年3月—2011年4月毕业论文的初稿2011年5月完成毕业论文⒋参考文献2[1]梁平彦,刘宏迪.展青霉和产黄青霉的种间体细胞杂交[J].微生物

4、学报,1982,22(3):248-256.[2]彭帮柱，岳田利，袁亚宏等.酵母菌原生质体融合技术[J]西北农业学报，2004，13（1）：101-103[3]王燕.热-紫外灭活双亲原生质体融合选育米曲霉新菌株的研究[J]中国酿造，2008，19：42-44[4]李立风,潘力,彭昶,叶燕锐.基因组改组:几株同源酱油曲霉的多亲株电融合育种[J]中国调味品2007，7：14-18[5]王国良.对小猿叶甲高毒力烟曲霉菌株的选育技术[J]中国生物防治，2008，24(2)：182-1852