选修1专题2新

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1、专题2微生物的培养与应用一、培养基1.概念:人们按照微生物对_________的不同需求,配制出的供其_________的营养基质。2.营养构成一般都含有水、______、氮源、_______、生长因子,还需满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及O2的要求。营养物质生长繁殖碳源无机盐3.培养基的类型、用途二、无菌技术1.消毒(1)特点:使用较为_____的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和______)。(2)常用方法:煮沸消毒法、____________、物理或化学药剂消毒法。2.灭菌(1)特点:指

2、使用强烈的理化因素杀死物体内外____________包括芽孢和孢子。(2)常用方法:灼烧灭菌、干热灭菌、___________灭菌。温和孢子巴氏消毒法所有的微生物高压蒸汽方法条件结果常用方法适用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物煮沸消毒法、巴氏消毒法化学药剂(酒精等)紫外线消毒等操作者的双手、工作台等灭菌强烈的理化因素杀死生物体内所有的微生物,包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌培养基、培养皿、接种环消毒与灭菌的比较三、微生物培养的基本技术1.配制培养基:称量→混合→溶化→调pH→分装

3、→包扎。2.灭菌:加水→加培养基→密封→排冷气→维持压力→取出倒平板(或搁置斜面)。3.接种(1)接种过程:洗净双手→点燃酒精灯→接种→贴标签。(2)接种工具:包括________、涂布器。(3)接种方法:平板划线法、_____________法。(4)注意事项:整个操作过程都要在__________旁完成。4.培养:接种后的培养皿放入恒温箱内培养。接种环稀释涂布平板酒精灯火焰四、菌种保藏1.临时保藏(1)操作:采用固体斜面培养基,菌落长成后,放入_____冰箱中保藏,以后每3~6个月,转移一次新的培养基。(2)缺点:保存时间不长,菌种易

4、被____或产生变异.2.长期保存法:甘油管藏法,放在-20℃下保存.五、土壤中分解尿素细菌的分离与计数1.菌种筛选(1)培养基:__________。(2)特点:________是唯一氮源。4℃污染选择培养基尿素2.统计菌落数目的方法(1)显微镜直接计数法①方法:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积样品中微生物的数量。②缺点:不能区分死菌和活菌。(2)间接计数法(活菌计数法)①方法:一般用稀释涂布平板法,当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能测出样

5、品中大约含有多少活菌。②计算公式:每克样品中的菌落数=(C÷V)×M,C表示某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V表示涂布平板时所用稀释液的体积mL,M表示稀释倍数。3.设置对照主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。六、分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选1.土壤取样:选择富含纤维素的环境。2.将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上(1)制备鉴别培养基:主要碳源CMC—Na。(2)刚果红染色法①先培养_______,再加入刚果红进行颜色反应。②________时加入刚果红。3.进一步鉴定(1)为

6、确定得到的菌是否是纤维素分解菌,还需进行发酵产纤维素酶的实验。(2)测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的________进行定量测定。微生物倒平板葡萄糖即时应用(2011年湘潭高三第一次模拟)关于灭菌和消毒的理解不正确的是()A.灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子B.消毒和灭菌实质是相同的C.接种环用灼烧法灭菌D.常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等解析:选B。灭菌是指杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,而消毒仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。菌株筛选原理的比较土

7、壤中分解尿素的细菌分解纤维素的微生物常用选择培养基进行筛选,既提供有利于目的菌株生长的条件,如营养、温度、pH等,同时抑制其他微生物的生长刚果红染色法,即在含有纤维素的培养基中,加入刚果红时,刚果红与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被分解后,该复合物不能形成,培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈几种微生物的分离(1)分离分解尿素的细菌:以尿素为唯一氮源的选择培养基培养。(2)分离分解纤维素的细菌:刚果红染色法。(3)分离分解塑料的细菌:从富含塑料的土壤中筛选。例1、下图为分离并统计分解纤维素的微生物的实验流程,据此回答有关问题

8、:巩固达标(1)要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌,从高温热泉中寻找耐热菌,这说明_____________________________________________________

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