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1、XX大学毕业论文TT病毒的研究近况姓名：2014年6月25日TT病毒的研究近况关键字：TT病毒1997年12月，日本学者报道在输血后不明病因肝炎病人屮发现了一种DNA病毒，并将Z命名为TT病毒(transfusion・transmittedvirus'TTV)'初步研究表明，TTV与转氨酶异常有密切关系，可能是一种新的输血后非甲■戊型肝炎的致病病原［1］。木文就TTV的致病性、分子生物学特性及初步流行病学研究等作一概述。1.TT病毒的发现虽然有墩感、特异的实验方法检测已知的甲、乙、丙、丁和戊型肝炎病毒感染，但仍冇10%〜20%的病毒性肝炎用现冇的方法不能分型
2、，大量的临床研究发现，在急慢性输血后肝炎，散发性肝炎和暴发型肝炎病例屮，相当数量的肝炎病人病原不明，提示还存在其它的病毒因子［2,3］o1995年，美国两个实验小组相继发现可引起肝为的病毒GGV-C和HGV,经分子克隆和序列分析证实，GGV-C和HGV均为止链单股RNA病毒'基因全长9.1〜9.4kb'编码2900左右个氨基酸，属黄病毒科病毒。二者在核昔酸和氨基酸水平的同源性分别为85%和95%,故认为是同一种病毒不同的分离株，统称为庚型肝炎毒［4.5］。庚型肝炎病毒可经输血传播，正常人群有1%〜2%的感染率。但庚型肝炎病毒在输血后不明病因肝炎、非甲■非戊型
3、肝炎屮检出率仅为2.1%〜15%,尚冇70%左右非甲■非戊型肝炎、暴发型肝炎病因仍不明［6］,促使人们继续研究寻找某种新的病原因子。1997年底，日要一个从事非甲■戊型肝炎研究的小组，采用代表性差异分析技术(RDA),从1例心脏手术接受输血引起不明病原转氨酶升高病人血清中分离出一病毒基因克隆(N22)。经测序显示，该病毒基因片段长500bp,两端冇sau3Al酶切位点序列(GATC)o有一个能编码166个氨基酸的开放读码杠(ORF)。经与DDBJ基因序列数据库中r731。752个序列比较，未发现冇同原序列，证实是一种新的病毒基因序列⑴。为了解该病毒基因特性，
4、将其反转成cDNA,用设计的引物进行PCR扩境，发现病毒基因本身及其cDNA均能扩增出同样大小的条带；同时用人淋巴细胞和胎盘组织捉取的模板，则未能扩增出条带，证明N22为非宿主本身来源的DNA病毒。并将Z命名为TT病毒(TTV)。Z后，研究者又从1名无任何症状献血员血清标木中获得1株TTV(TA278)［7］,对该株TTV基因全序列进行了分析显示，TTV是单股DNA病毒，病毒基全长约3.7kb,与某些动物单链DNA病毒有相似之处。TTV与输血后不明病因转氨酶升高有密切关系，可能是输血后肝炎病因之一。2.TTV的特征2」TTV理化特性［7］采用蔗糖密梯度离心方
5、法发现，TTV位于1.26g/cm3处’与HBV冇相似大小的标志(1.24g/cm3)o经用叶温80处理，TTV仍聚集在1.26g/cm3位置，说明TTV不含有包膜，不能被吐温消化。但至今尚未分离出TT病毒颗粒。2.2TTV基因结构［1.7］为了研究TTV核酸特点，H本研究人员从一份含高度TTV的血浆中提取病毒核酸’用几种不同的核酸酶消人'然后再进行PCR扩增'结果发现TTV核酸XJ-Dnasei、MungBean核酸酶(单链DNA的特异性消化酶)敏感，对RnaseA不敏感。从血浆提取的TTVdNA不被限制性内切Ndel消化。为了进一步了解TTVDNA特性，
6、对来源于转化大肠杆菌及M13质粒的双链和单链TTVdNA进行酶处理，结果双链TTVDNA对MungBean核酸酶不墩感，而对限制性内切酶Ndel敏感。单链TTVdNA则相反。根据这些结杲得出TTV核酸是单链DNAoH前尚无充分证据表明TTV是线形或环状DNA病毒。随后，研究人员又从一名无任何症状献血员血屮分离到1株TTV病毒(TA278),并进行了全基因序列分析。TA278株TTVdNA由3739bp组成，其中碱基Ailf1163(31%),C占954(26%)G占842(23%),T占780(21%)。病毒基因组上有2个开放读码杠(ORF),ORF1位于核
7、苜酸589〜2898的位置,ORF2位于核昔酸107〜712位置。两个ORF分别编码770和202个氨基酸。另外，在病毒基因组上还发现2个ORFs.。分别位于核昔酸45〜344和372〜686位置，编码100和105个氨基酸，但在互补序列上未发现有能编码大于100氨基酸的ORFs.在ORF1N，末端富含具冇高度亲水性的精氨酸。在TTV基因组屮，多聚腺莒酸信号(AATAAA)及TATA序列多次重复出现。TTV基因结构与某些动物单链DNA病毒(圆环病毒科、线状细小病毒科)冇相似之处。2.3基因型及亚型［1,7〜9］从已报道的TTV部分基因序列来看，TTVdNA具
8、有高度变异性。通过对78例TTVORF2区部分基因序
