伊曲康唑加冰醋酸治疗甲真菌病疗效观察x

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1、性罪错妇女生殖道人乳头瘤病毒检测及型别分析性罪错妇女生殖道人乳头瘤病毒检测及型別分析小华皮肤科杂志1998年第3期第31卷论著摘要作者：张丽芳郑飞云林巧爱朱雪琼陈索华包其郁单位：325003温州医学院微生物学教研室(张丽芳林巧爱包其郁)；温州医学院附属第一医院妇产科(郑飞云)；温州医学院附属第二医院妇产科(朱雪琼陈索华)为了解人乳头瘤病毒(HPV)及其型别在木地区高危人群中的流行情况，我们采用HPV的共同引物(generalprimer,GP)对41例性罪错妇女、46例对照组宫颈标木进行聚合酶链反应(PCR)检测，再用型特异性引物(SP)

2、6、11、16、18对GP-HPV阳性标本进行扩增分型，现报道如下。一、材料和方法1•标本来源：于1996年12月，随机选择温州市妇女劳教所性罪错妇女41例，年龄18〜40岁，刮取宫颈脱落细胞标本，共41份；同时随机选择本院附属二院妇科门诊要求体检的育龄妇女46例，作为正常人表1各组生殖道标木HPV及其型别检出结果组别例数GP-HPV(+)各型HPV检出数多重型别检出数(二型以上)例数%111618其它性罪错组412663.45771468正常人群组4636.5000x2=31.58,P<0.01表2性罪错妇女性伴数与生殖道HPV及其型别

3、的检出关系性伴数例数GP-HPV(+)各型HPV检岀数多重型別检出数(二型以上)例数%6111618其它2〜1015622x2=7.20,P<0.05群对照。2.标本处理:脱落细胞标本用pH7.0、66mmol/L的PBS缓冲液洗涤、离心,经蛋白酶K55°C作用3小时后，于95°C10分钟灭活，收集离心后上清液，・20°C保存备用，作为PCR模板。3.引物合成：本研究HPV引物由美国Loyola大学医学研究中心周健博士惠赠,GP扩增139-145bp,序列为:5’-TTTGTTACTGTGGTAGATAC-3'、5'-GAAAAATAAA

4、CTGTAAATCA-3z；SP6扩增28Obp,序列为：宁・TTTGTTACTGTGGTAGATAC-3，、5，-GAAAAATAAACTGTAAATCA・3'；SP11扩增360bp,序歹U为:5’・GGAATACATGCGCCATGTGC・3'、5’・CGAGCAGACGTCCGTCCTCG・3'；SP16扩增152bp,序列为：5’・TGCTAGTGCTTATGCAGCAA-3'、5’-ATTTACTGCAACATTGGTAC-3z；SP18申、增216bp,序歹U为：5’・AAGGATGCTGCACCGGCTGA-3z,5’-C

5、ACGCACACGCTTGGCAGGT-3'。4.PCR操作：每50ul反应体系中，含引物50umol/L,dNTP200nmol/L,Taq酶1.5U,模板用量10uI；反应步骤为92°C60秒变性，55°C120秒复性，72°C90秒引物延伸，共进行35个循环。扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳，漠乙锭染色，在紫外反射仪下观察记录。5.数据统计：各组别HPV检出率的比较，采用X2检验。二、结果1.PCR扩增产物分析：GP、SP6、SP11.SP16、SP18五组引物均能准确扩增出相应的扩增产物，反应结果清晰易辨，见图2.各组标本HPV及型别

6、阳性检出率见表性罪错组HPV阳性检出率(63.4%)较对照组(6.5%)有显著性差界(x2=31.58,P<0.01)；HPV型别以18型检出为多见，占HPV阳性的53.8%(14/26)；二型以上的多重型别检出率为30.8%(8/26),其中HPV16+18、6+28、6+16+18、6+11+16+18各2例,11+16、6+11+18各2例。3.性伴数与HPV及其型别的检出关系见表2。随着性伴人数(据受检者主诉)1、3、5、7、9分别为SP6、SP11、SP18、SP16、GP五组引物扩增的HPV阳性对照;2、4、6、8、10分别为

7、相应引物扩增的HPV阳性标本;11、12为GP引物扩增的阴性标本图1PCR扩增产物分析的增加,HPV的阳性检出率呈上升趋势,经检验有显著性差异(x2=7.20,P<0.05)；尤以HPV18的阳性检出率随性伴数增高而增高(x2=12.32,P［WTBZ<0.01)。三、讨论近年來研究己表明，HPV是STD病原么一，其某些型别与宫颈上皮的不典型增生及宫颈癌发生发展相关。通常认为HPV16和18是致癌的高危型别，而HPV6、□则是致癌的低危型別。国外学者对HPVL性传播的和关性作过许多研究，发现HPV是妇女牛殖道最常见的STD病原。Baken

8、等［1］报道采用PCR方法检测HPV,在STD

9、'1诊女性患者中阳性检出率高达72%o本文性罪错妇女宫颈HPV的阳性检出率为63.4%,高危型别的检出占HPV阳性的80.5%(21/26),尤