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1、中药决明子的化学成分研究刘陆楠闫赵娣芮丽娜河南省潔河市中医院药剂科462000摘要：目的：探讨建立鉴别中药决明子的高效液相色谱法（HLPC）方法，对中药决明子具有药理活性的化学成分（大黄素、大黄酚、大黄素甲醯）的含量进行测定。方法：利用HLPC鉴别中药决明子，对照品为橙黄决明素；利用HLPC测定中药决明子具有药理活性的化学成分（大黄素、大黄酚、大黄素甲瞇）的含量；色谱条件:采用WatersSymmetryC18液相色谱柱（150×4.6mm,5?m）,流动相为甲醇：醋酸：水（10：10：80）进行梯度洗脱，流速为1.2ml/min
2、,柱温为30°C,检测波长为260nm,进样量为15?1。结果：中药决明子中橙黄决明素与峰面积线性关系良好（r=0.9998）的范围0.0250-0.1550?g,精密度试验中RSD为0.78%、重现性试验中RSD为0.69%；中药决明子中大黄素含量为0.0700mg/g（RSD二0.78）、大黄酚含量为0.0700mg/g（RSD二0.78）、大黄素甲瞇含量为0.0700mg/g（RSD=0.78）o结论：以橙黄决明素作为对照晶的HLPC鉴别中药决明子的方法精密度、重现性良好，操作简便、快捷，利用HLPC测量中药决明子化学成分大黄素、大黄酚
3、、大黄素甲瞇均有可行性，准确性高。关键词：决明子；HLPC；化学成分中药决明子作为豆科、决明属，以决明成熟种子入药，中医性味为微寒，味甘、苦，主归肝经及大肠经，具有清肝明目、润肠通便的药效，用于治疗肝火目赤、眩晕目暗及大便不畅⑴。由于中药决明子的化学成分对于维持中药决明子的药效，通过对其化学成分含量进行控制，有利于提高药效、降低毒副作用及进一步提高药品质量标准。现代硏究表明，中药决明子的主要化学成分分类为蔥醍类、蔡并毗喃酮类、脂脂酸类及多糖药；但发挥抗病原菌、降低血压、抑制血小板聚集、降低血脂、保肝泻下等药理活性的主要化学成分为大黄素、大黄酚
4、、大黄素甲瞇［2］。随着中药决明子的化学成分研究不断深入，应用中药决明子制成的中成药广泛用于治疗眼疾、心脑血管疾病及消化系统疾病。为进一步提高对中药决明子的研究水平，本研究旨在探讨建立鉴别中药决明子的高效液相色谱法（HLPC）方法，对中药决明子具有药理活性的化学成分（大黄素、大黄酚、大黄素甲隴）的含量进行测定。1•仪器与试剂Satorius电子分析天平；Sk8200lh超声波清洗机；DHG-9053A型电热恒温鼓风干燥箱；SY21-NI4型一列二孔电热恒温水浴锅；LC-3000A（双泵）液相色谱仪，N2000色谱工作站；决明子、橙黃决明素、大
5、黄素、大黄酚、大黄素甲陆甲醇、醋酸、水均为色谱纯。2.方法与结果2.1色谱条件采用WatersSymmetryC18液相色谱柱（150×4.6mm,5?m）,流动相为甲醇：醋酸:水（10：10：80）进行梯度洗脱，流速为1.2ml/min,柱温为30°C,检测波长为260nm,进样量为15?1[3]。在此色谱条件下，橙黄决明素与其它成分分离效果显著，分离度R>1.5（图1）。图1橙黄决明素对照品（A）、供试品（B）和阴性对照品（C）的HLPC图2.2实验步骤2.2.1对照品及供试品试剂制备精密称取对照品0.7302mg,置于50m
6、l离心管，加入50ml的20%甲醇溶液，稀释至140?g/ml,作为对照品试剂；精密称取1.0368g决明子，置于100ml离心管，加入50%甲醇溶液，精密称取重量，超声处理15min,补足损失重量，过滤，取滤液作为供试品试剂。2.2.2线性关系考查精密吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8、3.2、4.8、5.2ml橙黄决明素对照品试液，置10ml定量瓶中，用20%甲醇溶液，稀释至刻度，按照“2.1项”的色谱条件进行测定。结果：橙黄决明素在0.0250-0.1550?g范围内，进样量(X)与峰面积(Y)的冋归方程：Y=2
7、.968×106X-3.0026×104(r=0.9998)o2.2.3精密度试验精密吸取橙黄决明素对照品试液15?1,连续进样6次，按照“2.1项”的色谱条件进行测定，峰面试分别为302361,302478,302368,302471,302468,302369,RSD二0.78%；结果表明,HLPC检测方法精密度良好。2.2.4重现性试验精称橙黄决明素供试液15?1,连续进样6次，按照“2.1项”的色谱条件进行测定，峰面试分别为246123,246235,246368,246297,246301,246309,RS
8、D二0.69%；结果表明，HLPC检测方法重复性良好。2.2.5腺昔含量测定精称供试液及大黄素、大黄酚、大黄素甲醴对照液各15?1,按照“2.1项”的色谱条件进行测
