决明子炮制前后化学成分变化研究

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1、决明子炮制前后化学成分变化研究炮制是中药的一大特色[1]。中药炮制是根据中医药理论,依照辨证施治的需要和药物自身的性质以及调剂、制剂的不同要求所采取的一项制药技术。中药成分复杂，常常一药多效，但中医治病往往又不是要利用药物的所有作用，而是根据病情有所选择。这样就需要通过炮制对药物原有的性能予以取舍，权衡损益，使某些作用突出、某些作用减弱，即改变药物的性能，力求符合疾病的实际治疗要求。如降低或消除药物的毒性或副作用[2，3]，改变或缓和药物的性能，增强药物的疗效等[4]。从现代科学角度来分析，中药炮制过程中疗效的提高、毒性的降低及药性的改变必然有其发生物质基础，这就应该是

2、药物内部化学成分发生了变化，物质基础改变了，药性自然改变。多年来对中药的炮制作用的机理进行了大量研究,取得了很多重要成果[5，6]。例如马钱子的炮制作用研究，其制后的减毒作用是由于其内含有的毒性成分士的宁碱受高温破坏易分解，而使其毒性降低。再如大黄、附子、乌头、巴豆的炮制研究等等。但是以往的研究都是以中药中的有效成分或者毒性成分作为指标来探讨中药炮制的机理。中药的作用不仅与所谓的有效成分有关,与其他共存成分的关系也很密切。中药的毒性不仅与所谓的毒性成分有关,很可能也与其他成分有关。况且有些中药的有效成分或毒性成分尚不清楚。因此研究中药炮制的机理不仅仅应考虑某个成分或者某

3、几个成分,而应该考虑整体成分,研究炮制对中药整体成分的影响,这样才能比较全面的评价炮制对中药活性、毒性、药性等方面的影响,揭示炮制的物质基础及其变化机理[7]。本项研究以决明子为例[8]，应用高效液相色谱研究其炮制前后整体化学成分的变化，为中药炮制原理深入研究作方法学方面的探索，进而揭示中药炮制的科学内涵。《本经》曰：“决明，味苦性寒，可泄热;甘咸走血，可益阴”。可见生决明苦寒，甘咸，强于清泄肝火，又兼益肾阴，且其性质凉润，又有清热润通便之效。而决明子经炒制后寒泻，凉润之性大为缓和，清泄肝火，润肠通便之力减弱，而长于平肝养肾。　　1仪器与材料医学核心论文发表　　1.1仪

4、器岛津LC-10A高效液相色谱仪，配二级管阵列检测器，色谱柱phenomenexC18(4.0mm×25.0mm，5μm)。　　1.2试剂甲醇(色谱纯)，美国Fisher公司，水为二次蒸馏水。　　1.3药材饮片生决明子,炒决明子由西安市药品检定所谢志民研究员提供。其中炒决明子是其按照2005版《中国药典》炮制标准制备得到的。　　1.4色谱条件色谱柱为phenomenexC18;流动相为甲醇-水(1∶2);流速0.8ml/min;检测波长230nm(决明子);柱温30℃。　　2方法　　2.1样品的提取与分析　　2.1.1炒决明子醇提取样品精密称量炒决明子2g，加入10ml

5、甲醇溶解，室温下放置2h，再超声波振荡提取20min，过滤、定容到10ml容量瓶中备用(1号样品)。　　2.1.2生决明子醇提取样品精密称量生决明子2g，加入10ml甲醇溶解，室温放置2h，再超声波振荡提取20min，过滤，定容到10ml容量瓶中备用(2号样品)。　　2.1.3炒决明子水提取样品精密成取炒决明子2g，加150ml蒸馏水煮沸提取1h，趁热过滤，减压浓缩至干。加适量甲醇溶解(必要时可用超声波振荡助溶)定容至10ml容量瓶中备用(3号样品)。　　2.1.4生决明子水提取样品精密称取生决明子2g，加150ml蒸馏水煮沸提取1h，趁热过滤，浓缩至干。加适量甲醇溶解

6、(必要时可用超声波震荡助溶)。定容至10ml，容量瓶中备用(4号样品)。将1～4号样品依次上高效液相色谱仪分析，色谱见图1~4。图1炒决明子醇提取样品色谱图图2生决明子醇提取样品色谱图医学核心论文发表　　2.2目标成分的定性研究在上述实验的基础上，我们在1号样品(炒醇样品)和3号样品(炒水样品)的高效液相色谱图中均发现有一新物质生成(tR=44.039min(1)，tR=43.506min(3)),并且两物质经紫外吸收数据比对确定是同一物质。此物质是在炒制品中出现的，也就是决明子经高温加热后新产生的物质，它极性较小，含量较大，且在其附近与其极性相近的干扰组分少，所以我们

7、把它定为我们首个目标化合物，对其进行定性研究。　　2.2.1目标化合物的提取分离取炒决明子5kg，捣碎，用适量甲醇浸泡，24h后再用超声波振荡提取30min，过滤得醇提液A，将醇提液A以上述相同色谱条件进行检测，仍发现目标化合物。将醇提液A浓缩，得浸膏B(45g)。浸膏B经多次硅胶柱层析，得目标化合物。　　2.2.2目标化合物的质谱分析此化合物为淡黄色片状固体，熔点235～236℃。MS图谱见图5。图3炒决明子水提取样品色谱图图4生决明子水提取样品色谱图图5目标化合物质谱图　　3结果与讨论　　3.1数据分析仔细对比以上所得色谱图，结合紫外