临床微生物SOP-葡萄球菌属检验标准操作规程

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1、1•概述葡萄球菌属是一类触媒阳性的革兰阳性球菌，包扌舌金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐牛葡萄球菌、中间葡萄球菌等35个种，17个亚种。金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。2.标本类型血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓等标本。3.鉴定3.1形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。3.2培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色，周围有明显的B溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐廿露醇平板上呈淡橙黄色菌落。表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为口色或柠檬色，多数不溶血。3.3牛化反应金黄色葡萄球菌触媒试验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和廿露醇，不分解绵子糖和水杨甘

2、，明胶、血浆凝固酶和DNA酶试验阳性，发酵廿露醇。3.4鉴定要点3.4.1本菌属特征革兰阳性球菌，呈葡萄状排列，触媒试验阳性。金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上菌落呈金黄色或口色，DNA酶和血浆凝固酶试验均阳性，发酵廿露醇。3.4.2与微球菌的鉴别葡萄球菌属葡萄糖0/F试验为发酵型，镜下以葡萄状排列为主，菌体较小，而微球菌属为氧化型或无反应，镜下以四联排列为主，且菌体较大。3.4.3与链球菌属的鉴别葡萄球菌属葡萄糖0/F试验为发酵型，触媒试验阳性,链球菌属葡萄糖0/F试验氧化型，触媒试验阴性。3.4.4凝固酶试验阳性葡萄球菌的鉴别（略）3.5操作步骤3.5.1涂片、染色观察菌落特征，在血平板上挑取可

3、疑菌落，涂片染色镜检。3.5.2触媒试验参见《触媒试验标准操作规程》3.5.3凝固酶试验参见《凝固酶试验标准操作规程》3.5.4鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。2.药敏参见《抗菌药物敏感试验标准操作规程》及CLSI最新版本文件。3.质量控制参见《质量管理程序》。4.检验结果解释与分析6・1由于葡萄球菌分布广泛，从临床标本中分离到金黄色葡萄球菌时，将其定为致病菌菌时应慎重。应根据凝固酶试验进一步确认。对可疑菌株的鉴定，最好利用商品化的鉴定系统根据牛化图谱进行确定。表皮葡萄球菌分离自导管相关血流感染时，通常被视为致病菌。溶血性葡萄球菌从尿道感染病人分离得到时

4、，尤其是细菌量较大或作为优势菌时，通常被视为致病菌。6.2甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)对多种广谱强效抗菌药物呈多重耐药性。如果检测出耐甲氧西林的葡萄球菌菌株则报告耐所有青霉素、头他菌素、碳青霉烯类和B-内酰胺药/B-内酰胺酶抑制剂类抗生素，对氨基糖苛类和大环内酯类抗牛素常协同耐药。若葡萄球菌属对四环素敏感，则对多西环素和米诺环素敏感。某些菌对四环素中介或耐药，而对多西环素和米诺环素敏感。临床感染葡萄球菌的病人用座诺酮类治疗3〜4日后，原来敏感的葡萄球菌易产生耐药。所以对这类葡萄球菌需多次反复进行药敏试验。大环内酯类耐药葡萄球菌包扌舌固有耐药和诱导耐约。所以临床试验室须进行“D”试验

5、以检测克林霉素诱导性耐药，根据“D”试验结果来报告克林霉素的耐药性。7.临床意义葡萄球菌属在自然界分布很广。存在于空气、水、尘埃及皮肤上的葡萄球菌大多数无致病性。金黄色葡萄球菌主要引起局部组织的化脓性感染(疳、痈和创伤感染)、菌血症、心内膜炎等全身感染，也可引起骨髓炎、化脓性关节炎、肺炎和深部脓肿等。腐牛葡萄球菌引起尿道感染、前列腺炎、外伤和菌血症等。溶血葡萄球菌引起心内膜炎、菌血症、腹膜炎、尿道感染、外伤、骨折和关节炎等。MRSA的治疗：轻度感染可选用SMZ-TMP和哇诺酮类，严重全身感染选用力古霉素或其他糖肽内药物。6.鉴定流程菌落观察：金黄色、黄色或白色，溶血或不溶血涂片染色：阳性球菌，

6、单个、成双，以葡萄状排列为主触媒试验++凝固酶试验-J金黄色葡萄球菌中间葡萄球菌j+葡萄糖0/F-i凝固酶阴性葡萄球菌微球菌猪葡萄球菌参考文献[1]中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微牛物学检验领域的指南.2008[2]周庭银编著•临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，2007⑶叶应妩，壬毓三，中子瑜主编.全国临床检验操作规程.第三版.南京：东南大学岀版社，2006[4]MurrayPR.Manual0/FClinicalMicrobilogy.9thed.Washington:ASMPress,2007[5]ISO1

7、5189:2007医学实验室一质量和能力认可准则.2007编写人签名复审人签名审批人签名生效日期姓名：XX编写日期:2011-05姓名：XXX复审日期:2011-06姓名：XXX批准日期：2011-062011-07