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《一支半固体盲样中食源性致病菌分离鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、【摘要】ri的：通过质控考核提高微生物实验室检测能力，检验人员技术水平，增强实验室竞争力。方法：依据国家标准GB/T4789-2003,GB/T4789-2008,GB4789-2010结合显色培养基及ATB生化鉴定仪对半固体盲样中食源性致病菌(沙门氏菌，大肠杆菌0157：H7,志贺氏菌，单核细胞增牛李斯特菌，副溶血性弧菌，小肠结肠炎耶尔森氏菌，空肠弯曲菌，金黄色葡萄球菌，溶血性链球菌阪崎肠杆菌，蜡样芽砲杆菌)进行•分离鉴定。结果：经分离鉴定，半固体盲样中检出单核细胞增生李斯特氏菌和阪崎肠杆菌。结论：本次质控考核使用选择性强、特异性
2、高的显色培养基及快速牛化鉴定条(ATBTD32E.APTIJster),使检测更加快速、特异、敏感，取得满意结果。中国论文网【关键词】质控考核；单核细胞增牛李斯特菌；阪崎肠杆菌；分离鉴定质控考核是提高实验室检验水平的重要途径，是对细菌实验室检测质量评价的方法。木实验室口2003年起每年参加国家认可委(CNAS)组织的检测能力验证计划，均取得了优异成绩，现将2012年国家认可委(CNAS)对木屮心细菌实验室复评审进行质控考核结果分析如下。1材料与方法1.1待测样品半固体盲样管。1.2仪器设备ATB全自动鉴定及药敏测试仪，恒温培养箱，生
3、化培养箱等。1.3培养基和试剂ID32E鉴定条，科吗嘉各种显色培养基均购自法国梅甲埃公司。氯化镁孔雀绿(MM),亚硒酸盐胱氨酸增菌液,缓冲蛋白月东水,7.5%氯化钠肉汤，LB增菌液,GN增菌液,1%葡萄糖肉汤,3%氯化钠碱性蛋白腺水,mLST-Vm增菌液，mEC肉汤,Bolton肉汤,CIN-I平板，skirrow琼脂平板，DF1琼脂平板，B.P平板，MYP平板，伊红美兰(EMB)平板,SS平板，HE平板，skirrow琼脂平板与mCCD平板，克氏双糖均购自北京陆桥公司，有效期内使川，血平板自行配置。2检测依据GB/T4789.51
4、1,13,14-2003,GB/T1789.7,8,9,36-2008,GB4789.410,30,40-2010[1-3]。3检测与结果3.1增菌与分离无菌操作，打开样品管，接种环蘸取半固体分别直接划线HE平板、SS平板、EMB平板、血平板、O157H7显色平板、科玛嘉沙门氏菌显色平板、科玛嘉副溶血性弧菌显色平板、skirrow琼脂平板、mCCD平板、P.K平板、C1N-1平板，DFI显色平板、科玛嘉李斯特氏菌显色平板MYP平板。除CIN-1平板26°C培养skirrow琼脂平板少mCCD平板42°C微需氧培养、科玛嘉李斯特氏菌-
5、显色平板30°C培养，其余平板均置37°C需氧培养。同时半固体菌种管直接接种各选择性增菌液中37°C需氧培养(除LB1增菌液30°C培养24h,TTB增菌液42°C24h,PSB增菌液26°C培养48h,Bolton肉汤微需氧42°C培养24〜48h,mLST44°C24）后再接种相应的平板培养。3.2观察菌落形态（培养24h）经过培养后，平板上可见：EMB：圆形，光滑的紫红色菌落。HE：圆形，光滑边缘整齐的黄色菌落。C1N-I：圆形光滑凸起湿润红色菌落。SS：圆形光滑的湿润的粉红色菌落。科玛嘉沙门氏菌显色平板：蓝绿色恻形光滑的菌落
6、。血平板：淡黄色恻形光滑小菌落。科玛嘉0157H7显色平板上：可见恻形光滑蓝绿色的菌落。科玛嘉付溶血性弧菌平板：未见菌落牛长。科玛嘉李氏菌显色平板：蓝绿色带晕圈可疑菌落。B.P平板：未见菌落生长。DF1平板「蓝绿色恻形光滑的可疑菌落。skirrow琼脂平板：灰白色菌落。mCCD平板：灰白色菌落。MYP平板：黄色恻形光滑菌落。观察增菌液划线的平板：平板菌落形态同直接划线平板。3.3初步生化试验及染色镜检将CTN-T上
7、员
8、形湿润红色菌落挑选5个接种改良克氏双糖26°C培养，同时做尿素晦试验（结果为阴性）。科玛嘉沙门氏菌显色平板上蓝绿色
9、菌落,0157H7显色平板上蓝绿色菌落，SS平板上粉红色菌落，HE平板上黄色菌落，DFI平板上蓝绿色的茵落，EMB上紫红色菌落各挑3〜5个分别穿刺双糖斜面37°C培养观察均斜而和底层均变黄产气，同时挑取上述平板单•菌落划线营养平板并做氧化酶试验及镜检。科玛嘉李氏菌显色平板上蓝绿色帶晕圈可疑菌落镜检为革兰氏阳性小杆菌，上述其余平板上所有挑选的菌落氧化酶试验均为阴性，镜检均为革兰氏阴性小杆菌，3.3.1挑取科玛嘉李斯特氏菌显色平板上蓝绿色帶晕圈可疑单菌落穿刺血平板做溶血试验（37°C培养24h后刺种点周围可见狭小透明溶血环）及穿刺半固体
10、做动力试验（30°C培养3d后可见倒伞状生长）。3.3.2挑取DFI平板上蓝绿色的可疑单菌落接种TSA平板培养做进一步生化鉴定。DFI平板上转TSA平板上黄色菌落接种ATB1D32E条经鉴定为阪崎肠杆菌。科吗嘉李斯特氏菌显色平板上蓝绿
