食品安全快速检测技术实验指导

《食品安全快速检测技术实验指导》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、实验一速测卡快速测定果蔬中农药残留【目的要求】通过实训，理解速测卡法的基木原理，拿握速测卡法检测的基木技能。【检测原理】胆碱酯酶可粗话靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸和靛酚（蓝色），有机磷或氨基卬酸酯类农药对胆碱酯酶冇抑制作用，使催化、水解、变色过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在。【主要仪器】农药残留速测卡，超声波提取仪，便携式农药残留速测仪，电子天平。【材料与试剂】果蔬样品3〜4种。pH7.5的磷酸缓冲液：分贝称取15.0g磷酸氢二钠与1.59g磷酸二氢钾，用5

2、00mL蒸憎水溶解。【操作步骤】样甜前处理A整体测定法将果蔬样品剪成1cm左右见方碎片，取5g放入烧杯屮，加入10mL缓冲溶液，摇匀，静置lOmin以上或用超声波提取仪提取2min左右，得到的浸泡溶液为样品提取液。B表面测定法擦去果蔬表面灰尘，滴3〜5滴缓冲溶液在果蔬表面，用另一片果蔬在滴液处轻轻摩擦，得到的滴液为样品提取液分析检测取一片农药残留速测卡，用口色商片沾取样品提取液（3〜4滴），在便携式农约残留速测仪（37°C）防止lOmin以上进行预反应，预反应后的药片表面必须保持湿润;将农药残留速

3、测卡对折,用手捏3min或用便携式农药残留速测仪恒温3min,使红色药片与口色药片叠合发生反应；每批测定应设一个缓冲液空白对照检测卡。【结果判定】与空白対照检测卡对比，白色药片不变色或为浅蓝色均为阳性结果，白色药片变成天蓝色或与空白对照检测卡相同为阴性结果。实验二盐酸克仑特罗检测卡【适用范围】此方法应用于猪肉、内脏和猪尿液中盐酸克仑特罗含量的检测【检测原理】本试剂运用抗原抗体的特异反应以及侧向色谱和胶体金技术进行尿液中克仑特罗分子的快速定性检测。用BSA偶联的克仑特罗分子和胶体金颗粒结合后，包被在

4、醋酸纤维索膜上;在硝酸纤维素膜上将克仑特罗抗体和BSA抗体分别包被在检测区（T）和质控区（C）o当尿液样本加到加样孔后，样本屮的克仑特罗分子和克仑特罗・BSA■胶体金偶联物一起色谱泳动到检测区竞争与克仑特罗抗体结合，剩余的克仑特罗■BSA■胶体金继续泳动到质控区域抗体结合。因此，当样木屮的克仑特罗浓度超过一定量后，胶体金偶联物就不能和克仑特罗抗体结合，此时检测区不出现紫红色线条；当样本屮克仑特罗浓度低于一定值或样本中没有克仑特罗时，胶体金偶联物就与克仑特罗抗体结合，从而在检测区显示出意料紫红色线条

5、；而无论样品中是否含有克仑特罗，质控区都会出现紫红色线条，以示检测有效。【主要仪器】食品加工机，低速离心机，电了秤（精度g）,250ML单道微聚移液器（移液枪）。【材料与试剂】盐酸克仑特罗检测卡、检测试剂A（3%三氯乙酸溶液）、检测试剂B（0.10minol/LM氧化钠溶液）、pH试纸（1〜14）、剪刀、10mL试管（或离心管）、一次性塑料吸管、一次性手套等。【操作步骤】从原包装铝箔袋中取出检测卡，在lh内应尽快地使用。将肉或内脏样本用剪刀简称随调后放入食品加工机中用一字刀粉碎，称取5g粉碎样本置

6、于试管中，加入5mL检测试剂A。盖上盖，摇匀，浸泡约lOmino川离心机离心装有浸泡液和样本的试管2min（3000r/min）,MJ移液枪移取250ML上清液转移入2mL检测管屮，加入约1滴检测试剂B,调整pH值至7左右。将盐酸克仑特罗检测卡置于干净平坦的台面上,用塑料吸管垂直滴加3滴无空气样品处理液于加样孔内。等待紫红色条带的出现，测试结果应在5min时读取。【结果判定】阳性（+）：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内无紫红色条带出现。阴性（-）：两条紫红色条带出现。一条位于测试

7、区（T）内，另一条位于质控区（C）内。无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或检测卡已变质损坏,应重新测试1次，如仍为此现象，应更换检测卡或联系供应厂家。阳性结果表明盐酸克仑特罗含量在阈值以上，阴性结果表明盐酸克仑特罗含量在阈值以下。【灵敏度】灵敏度（阈值）：根据每种检测卡控制浓度而定，盐酸克仑特罗冇3ng/mL（kg）、5ng/mL（kg）、6ng/mL（kg）等控制规格，判断前请向供应厂家咨询控制阈值。【注意事项】针对猪组织和尿液采用不同类型的检测卡，使用时应区别使用。使用盐

8、酸克仑特罗（尿液）检测尺对猪尿液进行检验时，直接将猪尿液代替样品处理液用于检测即可。肉及内脏中脂肪会导致假阳性结果，取样时请剔除肉眼可见的脂肪。盐酸克仑特罗检测卡应在常温下使用，不用对刚屠宰的猪肉或冷冻猪肉进行直接检测。自來水、蒸僻水或去离子水不能作为阴性対照，可用与阈值接近的儿个浓度阶梯來校验检测卡的灵敏度。（木项目参考标准：NY/9T933-2003《尿液屮盐酸克仑特罗的测定胶体金免疫色谱法》）实验三氯霉素ELISA试剂盒使用【目的要求】理解氯霉素ELISA试剂盒在蜂蜜、牛乳及