纹瓣兰无菌播种快繁技术研究1

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1、纹瓣兰无菌播种快繁技术研究张铁气李洪超匕王国芬3(1•文山学院生化系;2.文山州生物资源开发研究屮心3.文山民族职业技术学校。云南文山663000)摘要以纹瓣^[Cymbidiumaloifolium(L.)Sw]的种子为外植体,采用种子一原球茎一完整植株的途径进行繁殖。结果表明:种子在MS+6-BA0.2mg/L+AC1.0g/L+蔗糖30g/L培养基培养30d左右,可形成原球茎;原球茎在1/2MS+BA4mg/L+KT0.5mg/L+蔗糖30g/L培养基上增殖效果最好;原球茎接种于l/2MS+6-BA0.1+NAA0.5mg/

2、L+KT0.5mg/L+蔗糖30g/L培养基上培养4周后,再转入l/2MS+6・BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+AC2.0g/L+香蕉泥80g/L的培养基上培养30d,可诱导形成完整的植株。关键词纹瓣兰;无菌播种:原球茎StudyonTechnologyofAsepticSowingandRapidPropagationofCymbidiumaloifoliumZhangTieLiHong-chao1'2,WangGuo-fen3(1.DepartmentofBiologyandChemistry,Wenshancoll

3、ege;2.ResearchandDevelopmentCenterofBioresourcesinWenshanPrefecture;3.WenshanVocational-TechnicalSchoolforNationalities.WenshanYunnan663000)Abstract:SeedsofCymbidiumaloifolium(L.)Swcouldbeusedasexplantstopropagatebythewayof“seed-^protocorm—thewholeplant".Bytheexperime

4、nts,theresultsshowedthat,whenculturedforabout30daysinthemedium"MS+6-BA0.2mg/L+ACl.Og/L+sucrose30g/L",seedsdevelopedintoprotocorms,andpropagatedbestin"1/2MS+BA4mg/L+KT0.5mg/L+sucrose30g/L',;protocormsweresubculturedinT/2MS+6-BA0.1+NAA0.5mg/L+KT0.5mg/L+sucrose30g/L^^for

5、4weeksandtransferee!into"1/2MS+6-BA0.5mg/L+NAAO.lmg/L+AC2.0g/L十mashedbanana80g/L',,after30days,youngplantletswereinducedandwereabletodevelopintowholeplants.KeyWords:Cymbidiumaloifolium;AsepticSowing;protocorm纹瓣^[Cymbidiumaloifolium(L)Sw]是我国原产的兰属植物之一,分布于广东、广西、贵州、云南,叶片坚

6、挺粗厚,硬革质,多花。其植株生长强健,抗病力强,花尊较长花多,并有淡淡的清香,具有较高观赏价值;除此之外,该植物可全草入药,具有治疗肺热咳嗽、肺结核、咽喉炎、腮腺炎等⑴功效,因此,纹瓣兰具有较好的市场开发前景。纹瓣兰组培研究国内至今尚未见报道。为了保护纹瓣兰的种质资源,进行合理的开发利用,对其开展组织培养研究就显得十分重要。笔者以纹瓣兰的霸果为材料进行了组织培养并获得成功。1材料与方法1.1材料供试材料为长3〜4cm,成熟度约八成的野生纹瓣兰萌果(由云南省文山州兰花协会副会长王国能提供)。从其萌果中收集种子作为外植体进行种子的无菌

7、萌发。1.2方法材料经表面清洗后,放入75%酒精中灭菌20S,再以0.1%升汞灭菌10min,用无菌水冲洗4一5次。在无菌条件下把果实切开,将种了均匀撒播在培养基上。本试验以MS为基木培养基,琼脂0.65%,蔗糖3%,pH5.8,在不同培养阶段加入不同种类和配比的植物生长调节剂及其它添加成分,常规方法配制。培养室温度(25±2)°C,光照强度1200〜1500lx,光照10h/do移栽基质为锯末。2结果与分析2.1种子萌发在培养基MS+6-BA0.2mg/L上培养30d左右,种子rfl米色粉状开始转为淡绿色;再培养40d,发育成绿

8、色圆球形的原球茎团。及时切割转瓶,进行增殖的效果最好,否则,再过40d左右原球茎便开始发芽分化成幼苗。2.2原球茎增殖原球茎增殖期是兰花大量增殖的有利阶段,是提高繁殖系数的核心⑵。因此,在原球茎形成后30d左右,将绿色圆球形的原球茎团割成小块,移入

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