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《幽门螺杆菌中国临床分离株iceA基因突变株的构建和鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、幽门螺杆菌中国临床分离株iceA基因突变株的构建和鉴定马一君''J段广才一‘，张荣光',范清堂彳，张卫东打祁园林'马一君，Email：mayijunhn@yahoo.coin,cn通讯作者：段广才,Emai1:gcduan©public,zz.ha.cn作者单位：1.郑州大学公共卫生学院流行病学教研室，郑州450052;2.河南中医学院基础医学院;3•河南省分子医学重点学科开放实验室关键词幽门螺杆菌；iccA基因；突变株摘要目的构建幽门螺杆菌iceA基因突变株。方法克隆iceA基因及两侧的部分序列至载体p
2、BlucscriptSKII(-)多克隆位点中。运用基因重组方法将卡那毒素抗性基因(kam)插人iccA基因片段Z间，构建出带卡那霉素抗性标志的突变载;体pBS-iceA-mutant。再将突变载体转化至幽门螺杆菌中国临床分离株MEL-H.pylori27中,用卡那霉素筛选iceA基因的突变株,经PCR和DNA测序鉴定。结果用PCR方法扩增突变株基因组DNA,结果显示卡那霉素抗性基因已插入iceA基因片段中，测序进一步证实已筛选获得幽门螺杆菌中国临床分离株iceA基因的突变株。结论成功构建一株幽门螺杆菌i
3、ceA基因突变株。ConstructionandidentificationoficeAgenemutantstrainofHelicobacterpyloriisolatedfromChinaMaYijun*,DuanGuangcai,ZhangRongguang,etalDepartmentofEpidemiology,SchoolofPublicHealth,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou,China,450052,*SchoolofBasicMedicalScience
4、,HenanCollegeofTraditionalChineseMedicine,Zhengzhou,China,450008.Correspondingauthor:DuanGuangcai,Mailingaddress:DepartmentofEpidemiology,SchoolofPublicHealth,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou，China,450052.Emaikgcduan@public.zz.ha.cn[Abstract]AimToconstructan
5、iceAgenemutantstrainofChineseHelicobacterpylori.MethodsTheiceAgeneanditspartialupperanddownstreamflankDNAfragmentswereclonedintoplasmidpBlucscriptSKII(-).AndkanamycinresistancegenefrompEGFP-N2wasinsertedintoiceAgenetoconstructobjectiveplasmidpBS-iceA-muta
6、nt.ThenpBS-iceA-mutantistransformedintoHelicobacterpyloricellsbyelectroporationandthestrainsexpressingkanamycinresistancegenewereselectedbykanamycinagar,whichwasidentifiedbyPCRandsequencinganalysis.ResultsTheresultofPCRamplifiedandsequencinganalysisfromth
7、egenomeDNAoftheconstructedmutantstrainshowsthatkanamycinresistancegenehasbeeninsertedintoiceAgene.ConclusionTheiceAmutantstrainofHpyloriisolatedfromChinaisconstructedsuccessfully.[KeyWords]:Helicobacterpylori;iceAgene;Mutant幽门螺杆菌(hclicobactcrpylori,Up)是一种
8、专寄生于人冒黏膜的革兰阴性微需氧菌，是世界齐地最常见的感染性病原世界上至少有50%人口感染Hp。许多研究表明,Hp感染后可导致再发性腹痛、胃炎和消化性溃疡、胃癌等胃肠疾病的发生，1994年国际癌症研究中心将其归为I类致癌因子riloHp的感染和发病涉及多个毒力因子。近年研究发现，Hp接触胃粘膜上皮后可诱导表达一种毒力相关因子-粘膜接触诱导因子，由iceA(inducedbycontactwithepithelium,iceA)
