微生物检验作业指导书V0

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1、Q/LL晋江力绿食品有限公司企业标准Q/LLJ.QM.001-2015/V0微生物检验作业指导书2015-12-10发布2015-12-20实施晋江力绿食品有限公司发布本标准依据GB/T1.1《标准化工作导则第1部分；标准的结构和编写》的要求，主要参照GB/T27405《实验室质量控制规范食品微生物检测》，并根据实际检验操作起草编制。木标准由晋江力绿食品有限公司质量管理部提出。本标准由晋江力绿食品有限公司质量管理部归口。本标准由晋江力绿食品有限公司质量管理部起草、修订并负责解释。本标准主要起草人：柯良蓉本标准审核人：张芹丽木标准批准人：本标准于2015年12月10FI首次发布。关键词：成品微

2、生物检验微生物检验作业指导书1范围本标准规定了化验室对海苔制品（成品、半成品）、紫菜制品、肉类制品（肉干和肉脯等成品、半成品）的检验方法。本标准适用于质量管理部化验室对海苔制品（成品、半成品）、紫菜制品、肉类制品（肉干和肉脯等成品、半成品）的微牛物检验和判定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版木适用于木标准。GB/T23596海苔GB/T19643藻类制品卫生标准NY/T17

3、09绿色食品藻类及其制品GB/T23969肉干SB/T10283肉脯GB/T2726熟肉制品卫生标准GB4789.2-2010食品微生物学检验菌落总数测定GB4789.32003食品卫生微生物学检验大肠菌群测定GB4789.28食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求GB/T27405实验室质量控制规范食品微牛物检测3职责3.1化验员负责微生物检验的具体作业。3.2部门主管级以上人员负责对化验员的操作进行指导和监督。4术语和定义4.1大肠菌群一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽抱杆菌。该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中是否污染肠道

4、致病菌的可能。食品屮大肠菌群数系以100ml（g）检样内大肠菌群最可能数（MPN）表示。4.2菌落总数食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（ml）检样中形成的微生物菌落总数。5设备和材料恒温培养箱：36°c±rc电热鼓风干燥箱：170°C~180°C恒温水浴锅：46°C±1°C冰箱：0°C~4°C电子天平：感量为O.lg灭菌吸管:lml（具0.01刻度）、10ml（具0.1刻度）灭菌培养皿：直径90mm灭菌锥形瓶：容量250ml灭菌试管：15mmX150mmx18mmX180mm灭菌剪刀、蹑子等6程序6.1检验前准备6.1.1培养基及试剂的制备a、

5、培养基配制：按照各培养基试剂瓶上的用法，结合待检样品数量，按比例折算后进行配制，必要时进行分装，分装完成后待灭菌。（注意：为避免培养基粉尘进入呼吸道，配制时佩戴口罩且小心称量；分装量要求不超过容器体积的4/5,培养基体积WlOOOml）。b、生理盐水配制：配制0.85%（称取0.85g氯化钠溶于100ml蒸馆水中），结合待检样品数量，按比例折算后进行配制，必要时进行分装，分装完成后待灭菌。c、灭菌：采用湿热灭菌法，将待灭菌的培养基和试剂装入灭菌网篮中，放入立式压力蒸汽灭菌锅中进行灭菌。各培养基灭菌条件根据各培养基试剂瓶上的用法进行操作，牛理盐水用121°C高压灭菌15分钟。灭菌结束后，打开高

6、压锅盖，待热蒸汽散尽，戴加厚手套从高压锅中取岀灭菌网篮，琼脂平板培养基放入47-50°C的恒温水浴锅中冷却保温（保温时间一般不应超过4小时），乳糖胆盐培养基和盐水置于传递窗中，放入无菌室内备用。6.1.2检验工器具准备：将洁净的培养皿、吸管放入对应的灭菌筒中，不锈钢手术剪刀放入不锈钢带盖消毒盘中、盖硅胶塞的锥形瓶，放入干燥箱屮进行灭菌，灭菌参数170€灭菌2.5小时。灭菌结束后,打开干燥箱，待热气略散后，戴加厚手套从干燥箱中取出灭灭菌检验工具，置于传递窗中,传入无菌室内备用。注：检验用器具也可采用湿热灭菌，灭菌参数121°C灭菌20分钟。6.1.3无菌室准备：a、打开无菌室空调通风等设施，温

7、度设置20°C,相对湿度控制在40%-60%。打开净化工作台的紫外灯和风机，然后打开无菌室及缓冲间的紫外灯，紫外线消毒230分钟（特殊情况下：室内温度〈20°C或＞40°C,相对湿度大于60%时，应适当延长照射时间）。b、紫外灯消毒结束后，关闭紫外灯30分钟后就可进行检验作业。6.1.4样品处理：检验样品净含量需大于等于10克，将样品表面用75%酒精擦拭干净，通过传递窗进入无菌室。6.1.5操作人员卫生：进入