毕业论文《产壳聚糖酶海洋微生物菌株的筛选、鉴定与产酶条件研究》

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1、中文摘要IAbstractII引言11实验材料和方法31.1主要仪器与设备31.2实验药品和试剂31.3实验方法41.4实验步骤52结果与分析92.1富集培养与平板筛选92.2菌株KJT-A鉴定和分析92.3菌株KJT-D鉴定与分析122.4菌株KJT-A的生长情况142.5菌株KJT-D的生长情况152.6假单胞菌株KJT-A壳聚糖酶的分离162.7GF1-4的SDS-PAGE检测173小结与讨论193.1产壳聚糖酶海洋微生物菌株的筛选193.2产壳聚糖酶菌株的鉴定193.3温度与盐度对产壳聚糖酶菌株生长的影响203.4壳聚糖粗酶的制备和纯

2、化204结论22参考文献：23附录I26附录II28附译文30附译文原文34致谢38产壳聚糖酶海洋微生物菌株的筛选、鉴定与产酶条件研究［摘要］采用不同培养基对舟山旭旺养殖厂海水养殖环境样品进行壳聚糖酶产生菌的分离，结果表明海水培养基对于菌株筛选有显著的促进作用，同吋甲壳类外壳是壳聚糖酶产生菌的良好來源。KJT-A和KJT-D是从海水养殖场蟹壳表面分离到的两株壳聚糖酶产生菌株，结合形态学观察、生理生化反应和分子生物学鉴定，初步确定菌株KJT-A和KJT-D分别为假单胞菌属(Pseiulomonas)和青霉属(Penicillium)o分析不同温

3、度、盐度对两株菌株生长的影响，发现KJT-A是一株中度嗜盐菌，最适生长温度为19°C,在48h时达到最大吸光值；KJT-D是一株广盐性菌株，最适生长温度为28°C,在72h吋达到最大吸光值。两株菌株在普通海水盐度条件下均能很好生长，这冇利于菌株的海水发酵，对于节约淡水资源冇着极人的作用。同吋对上述两株菌株所产壳聚糖酶进行分离纯化和相关性质研究，可以进一步了解其分子结构与盐度适应性的相关性，为壳聚糖酶的基础研究提供理论参考。［关键词］壳聚糖晦；鉴定；16S2NA；假单胞菌；青霉ScreeningandIdentificationofChitos

4、an・HydrolyticMicroorganismsFromMarineEnvironmentandStudyontheOptimalConditionsofChitosanaseFormation[Abstract]Inthispaperthechitosanase-producingmicrobesfromthemarineenvironmentwerestudied.Theresultshowedthatseawatermediumcansignificantlyimproveisolationofstrain,andthesurfa

5、ceofcrabshellwasbestsourceofchitonsanase-producingbacterialstrain.KJT-AandKJT・D,whichwereisolatedfromthecrabshellsurfaceofxuwangmariculturezoneinzhoushanisland,wereclassifiedintoPseudomonasandPemcilliumbasedonmorphology,physiology,biochemistryandmolecularbiologymethods.Expl

6、oringthegrowthoftwostrainsindifferenttemperatureandsalinity,wefoundthatKJT-Aisamoderatelyhalophilicbacteria,theoptimumtemperatureis19°C.achievingthemaximumabsorbancewhencultured48h.KJT-Disawidesalt-resistantstrains,theoptimumtemperatureis28°C,achievingthemaximumabsorbanceat

7、72h.Thetwostrainscangrowwellinthenormalsalinitycondition,thisishelpfultotheseastrainsfermentation,andhaveagreateffecttosavethefreshwaterresources.Chitosanaseoftheabovetwostrainswereisolatedandpurified,whichhelpushaveabetterunderstandingofitsmolecularstructureandsalinityadap

8、tation,andprovideatheoreticalreferenceforthebasicresearchofthechitosanase.[Keyword