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《醋酸氯己定溶液微生物限度检查方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、醋酸氯己定溶液微&物限度检查方法验证结果及应用张丹1，张天兵2，王宁2，江中艳2(1.陕四省药品检验所,陕西西安710061;2,陕西爱民制药股份有限公司，陕西西安710043)［摘要］目的:考察干扰醋酸氯己定溶液微生物限度检查的因素并建立了化学药品酷酸氯己定溶液微生物限度检查方法试验。方法:参照中国约典2005年版二部附录微生物限度检查方法试验。结果:采用常规法对细菌、霉菌及酵母菌和控制菌进行验证。该药品均对枯草芽抱杆菌，金黄色葡萄球菌，大场埃希菌及铜绿假单胞菌有较强的抑菌作用，故可采用常规法进行霉菌及酵母菌检查;可采用离心薄膜过
2、滤法对细菌进行检查;可采用薄膜过滤加培养基稀释法对控制菌进行微生物限度检查的质量控制。结论:所建立的微生物限度检查方法可用于醋酸氯己定溶液微生物限度检查,消除本品抑菌活性对试验的干扰.［关键词］醋酸氯己定溶液微生物限度检查法;验证;抑菌作用［屮图分类号］R927.1［文献标识码］A［文章编号］100125213(2009)1921685204醋酸氯己定溶液为皮肤及黏膜的消毒，创口感染,阴道感染和子宫糜烂的冲洗液。本品吸附在细菌抱浆膜的渗透屏障，使细胞内容物漏出，具有低浓度抑菌,高浓度杀菌的作用。1材料1.1仪器HTY-2000型集菌
3、仪（杭州高徳医疗器械有限公司）;LRH・250型隔水式电热恒温培养箱（细菌用）（上海一横科技有限公司）;WGP-600型隔水式电热恒温培养箱（控制菌用）（重庆四达试验仪器厂）;SHH-250JS型真菌培养箱（重庆网达医疗实验仪器厂）。1.2约品与试液供试品：醋酸氯己定溶液，陕西杨凌生物医药科技股份有限公司提供，批号20070601,规格（0.05%）50mL;稀释液[pH7.0氯化钠2蛋白月东缓冲液2pH7.6磷酸盐缓冲液（98:2）]冲洗液,pH7.0氯化钠2蛋白豚缓冲液按参考文献[1]进行制备，高压蒸汽灭菌法灭菌。1.3培养基营
4、养琼脂培养基（批号060413）;改良马丁溶液培养基（批号060611）;营养肉汤培养基（批号041221）;玫瑰红钠琼脂培养基（批号050821）;胆盐乳糖培养基（批号050409）;胰酪月东大豆肉汤培养基（批号060814）;澳化十六烷基三甲胺琼脂培养基（批号040225）;甘露醇2氯化钠琼脂培养基（批号060614）o4菌种枯草芽抱杆菌（Baciassubbilis）[CMCC（B）63501];金黄色葡萄球菌（Sbapyldacvsavrevs）[CMCC（B）26003];大肠埃希菌（Escherichiacdi）[CMC
5、C（B）44102];铜绿假单胞菌（pseudomonaesaercginosa）[CMCC（B）10104];口色念珠菌(Ccndidaalbicans)[CMCC(F)98001];黑曲霉菌(aspegilushiqer)[CMCC(F)98003]均由中国医学细菌保藏中心提供。1方法与结果1方法按中国药典[1]2005年版二部附录微生物限度检查试验用菌液的制备方法取经(33±2)°C培养18〜24h的枯草芽砲杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的营养肉汤新鲜培养物1mL,加入9mL9g・L・l氯化钠溶液(NS)屮,1
6、0倍稀释制成50~100cfu•mL-1的菌悬液,备用。取经(25土2)°C培养24〜48h的白色念珠菌的改良马丁液体新鲜培养物1mL,加入9mL9g-L-l氯化钠溶液(NS)中,10倍稀释制成50-100cfu-mL-1的菌悬液,备用。接种黑曲霉菌至改良马丁琼脂斜面培养基(25±2)°C培养7d,用0.9%无菌氯化钠溶液洗脱抱子标准管比浊，加入9mL9g-L-1氯化钠溶液(NS)中,10倍稀释制成50-100cfu-mL-1的菌悬液,备用。1.2供试液的制备取供试品10mL,加稀释液至100mL,制备成1：10供试液。2.3常规法
7、(细菌、霉菌及酵母菌)试验组取1：10供试液1mL和试验菌50〜100cfu•mL・1采用常规法进行细菌、霉菌和酵母菌数测定，结果见表1。菌液组测定所加的试验菌数。结果见表1。供试品对照组取1:10供试液1mL,按试验组方法（不加试验菌），测定供试品的木底菌数。结果见表1o稀释液对照组取稀释液1mL和试验菌50〜lOOcfu•mL-l按试验组方法测定并计算回收率。结果验证试验的供试液对照组3次试验均无菌落生长，各试验菌均在50-100cfu•mL-1，控制菌试验菌均在10〜100cfu•mL-1的规定范围，稀释液对照组菌数刨收率均高
8、于70%符合微生物限度检查方法学验证要求。结果见表1〜3o试验组菌的回收率%=［（试验组平均菌落数・供试品对照组平均菌落数）/菌液组平均菌落数］X100%;稀释液对照组菌回收率（％）二稀释液对照组平均菌落数/菌液组平均菌落数X100%
