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1、番茄红素调节免疫作用及机制探究摘要：［目的］探讨番茄红素对免疫系统的作用及机制。［方法］经口给小鼠每ks体重1.67mg,3.33rug>10mg番茄红素，观察番茄红紊对小鼠免疫功能及抗氧化能力的影响。［结果］番茄红素对小鼠迟发型变态反应有促进作用，ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力明显增强，溶血空斑数、血清溶血素也显著高于对照组，巨噬细胞对鸡红细胞吞噬率、吞噬指数明显高于对照组。10mg/kg番茄红素组血清超氧化物歧化酶(SOD)活力为133.8U/ml,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-h)活力为158,9U/ml,丙二醛(MDA)含量为4.Inmol/mg,与对照组差异有显
2、著性。［结论］番茄红素能够增强小鼠单核巨噬细胞作用及体液免疫和细胞免疫功能，这与其提高抗氧化能力有关。关键词：番茄红素；免疫；超氧化物歧化酶；丙二醛；谷胱甘肽过氧化物酶中图分类号：R151.4+3文献标识码番茄红素是最主要的类胡萝卜素之一，无维生素A原活性，人体主要从番茄及其制品中获取。番茄红素是一种抗氧化剂，具有预防和缓解某些肿瘤及心血管疾病的作用。目前各国尚未建立番茄红素的膳食参考摄入量，因其未被任何卫生组织承认是一种营养素。番茄红素许多生物学功能还不十分清楚，本研究就番茄红素对免疫系统的作用及其可能的作用机制进行探讨。1材料与方法1.1材料1.1.1番茄红素上海某生
3、物工程公司提供，纯度，99%。1.1.2实验动物清洁级ICR小白鼠，雄性，体重18〜22g,由中国科学院上海实验动物中心提供。将其分成4组,每组40只。1.2方法1.2.1剂量选择番茄红素设3个剂量组、1个溶剂对照组。番茄红素剂量分别为1.67mg/kg^3.33mg/kg^10mg/kgo各组经口灌胃1次/d,连续喂饲30d后进行免疫指标和抗氧化能力测定。1.2.2迟发型超敏反应(DTH)测定小鼠腹部去毛，用1%DNFB溶液50h1致敏小鼠。5d后用1%DN—FB溶液10^1于小鼠右耳进行攻击。24h后颈稚脱臼处死小鼠，用打孔器取下直径8mm的左右耳片，称重并计算肿胀度
4、。1.2.3小鼠脾淋巴细胞转化测定将小鼠脾脏制成2x10°个/ml细胞悬液，分两孔加入24孔培养板中，一孔加5041ConA液，另一孔作对照，在5%C02和37°C环境下培养72h。培养结束前4h,每孔吸去上清液0,7ml,加人0.7mlPRM11640培养液，同时加入MTr50nd/孔，继续培养4h,每孔加入lml酸性异丙醇，使紫色结晶完全溶解后，在570nm处测定吸光度。1.2.4血清溶血素测定用脱纤维SRBC免疫5d后，从内眦静脉采血，分离血清。在微量血凝板上加25：A1血清，以生理盐水倍比稀释，加入等量0.5%SR-BC悬液，装入湿润的平盘，37T保温3h,当血球
5、对照出现沉落时观察结果。1.2.5抗体生成检测SRBC免疫5d后，将脾脏制成5x10°个/ml细胞悬液。表层培养基加热溶解后，与等量pH7.2的Hanks液混合，分装小试管，再向管内加入50ull0%SRBC,20ul脾细胞悬液，涂于已刷琼脂薄层的平皿上，在C02培养箱温育1.5h,然后用SA缓冲液稀释的补体（1：10）加入到平皿中，继续温育1.5h后，计数溶血空斑数。1.2.6小鼠碳廓清测定动物连续给样30d后，于尾静脉注射1：3稀释的印度墨汁，立即计时。分别于注入墨汁后2min、lOmin,从眼内眦静脉采血20U1,加到2mlNa2C03溶液中，在600nm波长处测0
6、D值，以Na2C03溶液作空白对照。根据动物体重、肝重和脾重计算廓清指数。1.2.7巨噬细胞吞噬能力每鼠腹腔注射20%鸡红细胞悬液lml,30min后，将小鼠颈椎脱臼处死，固定于鼠板上，注射生理盐水2nd,吸出腹腔洗液1ml,分滴于2片玻片，于37£孵箱湿孵30min,以1：1丙酮甲醇溶液固定，4%Giemsa—磷酸缓冲液染色3min,漂洗晾干镜检，计算吞噬百分率和吞噬指数。1.2.8抗氧化酶及脂质过氧化物测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活力：黄嚓吟氧化酶法。血清丙二醛(MDA)含量:硫代巴比妥酸法。血清谷胱甘肽过氧化物酶活力(GSH-Px):DTNB比色法。这3种方法均
7、采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒。1.2.9统计分析采用SPSS11.5软件对数据进行单因素方差分析。2结果2.1番茄红素对小鼠细胞免疫的影响表1显示，10mg/kg番茄红素组经DNFB刺激后DTH增加值为22.8mg,与对照组比较户P
