血浆纤维蛋白原Fbg测定作业指导书

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时间:2019-11-20

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1、血浆纤维蛋白原Fbg测定作业指导书1-实验原理确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入纤维蛋白原试剂,采用波长为660nm的光照射样本,凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定,从散射光光强度的测定,可以作岀凝血曲线,通过PercentageDetectionMethod法求得凝血时间,再通过凝血时间,求出Fbg含量。2.标本采集2.1早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。2.23.8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血「8ml,混匀。3.标本存放…小时内(3000r/minX15min)

2、分离血浆,室温放置不超过2小时,2〜8°C保存不超过4小时,长时间保存需在冰冻条件下,(-70°C不超过6个月),只能冻融1次,在37°C迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。4.标本运输:低温条件下运输。5.标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。6・实验材料:6.1德国DadeBehringMarburg公司凝血酶试剂,每瓶加1ml蒸憎水溶解(20人份),未开封试剂2〜8°C贮存到说明书上有效期.复溶试剂2〜8°C保存不超过5天。6.2Owren7s巴比妥绥冲液(PH

3、7.35±0.1)用于标本的稀释,2〜8°C贮存到说明书上有效期。2.3DadeControI质控血浆。用蒸f留水1mI溶解后放置30分钟,才能使用或分装•复溶后,室温保存2小时,2〜8°C4小时。3.仪器设备:7.1仪器名称:SysmexCA-1500全自动血液凝固分析仪7.2仪器厂家:日本Sysmex公司7.3仪器型号:SysmexCA-15007.4仪器技术参数:7.4.1速度:最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时7.4.2试剂位:36个,具冷藏功能。7.4.3样本位:50个,可自动连续添加

4、。7.5仪器校准程序:7.5.1校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。7.5.2校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)7.操作步骤:8.1检查前准备:7.1.1清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽。8.1.2添加足够反应杯(不能超出警告线)8.1.3添加清洁液试剂,清洗用蒸憎水等。8.2开机先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方"NotReady"变为"Ready",表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定。8.3输入工作清单:

5、从主菜单选WorkList-»出现第一架样本工作清单输入画面,选

6、lDNOEntry諭入第一个样本号T按相应实验项目名称键[bgj,并同时输入此标本的其他测试项目,若选“凝血四项(PT、APTT、Fbg、TT)可按profile可组合选项选择,选中项目相应位置标记为“OS选完项目后按〔ENTER

7、确认,要删除某项目时只需按该项目(按键如埜]变为壬)即可,T用TJ键,同样输入其他标本编号项目。(快速输入可用Repeat犍,输入重复标本数,复制同样项目的输入.8.4放置样本:按8.3所设好的工作清单顺序将离心分离好的样

8、本放置于样本架上,并按顺序把样本架排列于Sampler进样器右边位置(最多同时放5架共50个样本)8.5按〔Start

9、键开始测定.盖好遮光盖,确认仪器为准备状态(显示屏正上方显示"Ready")按〔Start

10、键,进样开始,T测定进行,仪器显示为“Analying”(被选择项目背景变为“◎”,此时可重复8.3,8.4,继续输入其他架样本工作清单,按

11、Rigester

12、,继续确认测试任务,添加样本架继续测试,T测定完成,测定项目背景变为“•”,打印机打印出测定结果,所有测定清单完成,系统恢复“Ready”状态.8.6

13、每日维护:完成每日的测定后,关机前维护.8.6.1冲冼针RinseProbe8.6.2清空废液瓶,和已使用过的反应杯.8.6.3将试剂架连用试剂放入冰箱.8.7关机:先关主机,再关打印机.7.检验结果的判断与分析:9.1仪器测定Fbg线性范围在0.25g/L-10g/L,测定完成仪器将显示每个参数的计算结果(包括凝固时间与Fbg含量g/L),若不能对参数进行正确计算,将出现下列信息:尢尢尢,尢出现错误,不能得到分析数据,-不能计算参数+++,+数值超出线性范围.9.2仪器设定Fbg参考范围在1.7-4.5g/L,如果

14、得到一个不正常数值,在数据的左侧将出现下列标记:次出现错误信息<数据低于可报告的低限>数据高于可报告的高限10・质量控制:每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品,以2S为警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控•质控规则详见室内质控作业指导书.门•临床意义:Fbg是用于判定血栓前状态或血栓性疾病的必查项目.11.1参考范围:

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