苜蓿(Medicagosativa)种子中存在的细菌内生菌的分离,分类学分析和表型鉴定

《苜蓿(Medicagosativa)种子中存在的细菌内生菌的分离,分类学分析和表型鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、标题：紫花苜蓿(Medicagosativa)种子中存在的细菌内生菌的分离，分类学分析和表型鉴定强调：1.在苜蓿中发现40种不同的细菌属种子内生菌。2.种子内生菌提出了与植物生长促进有关的体外活性3.己鉴定的许多分离物被发现为苜蓿植物内生菌4.苜蓿种子是(可能选择的)细菌接种到植物的天然载体摘要：越来越多的证据强化了微生物组在健全的多细胞真核生物中的核心作用，因此更适当地被描述为真正的全合体细胞。尽管土壤被认为是植物微牛物组的主要来源，但是已经显示种子被内生微生物定居，从而代表选择的微生物接种物的天然携带者到幼苗。

2、在这项工作中，我们调查了在表面灭菌的苜蓿种子屮携带的可培养内生细菌的类型。MALDI・TOF分析显示存在属于40个分开的屈的细菌，分布在四个分类群(Proteobacteria,Actinobacteria,Firmicutes和Bacteroidetes)o还发现了根瘤菌科的非共牛成员。对九种不同体外牛化活性的评估表明具有复杂性状组合的分离物在主成分分析后可分为四个表型组。从近一半的鉴定属中分离出能够在无菌条件下生长的苜蓿植物。进一步研究苜蓿种子的定殖机制，苜蓿种子内生真菌的进化意义以及萌发后种子微生物群体如何与

3、大气和根际土壤细菌竞争定殖新生苗。芙键词：种子内生菌；植物微生物组；紫花苜蓿]引言^屆微生物群落含有大量的微生物，栖息在根，茎，叶，花，果实和种子屮。这些复杂的群落可以存在于植物器官的外部和内部组织中，从而影响植物适应性,具有增加的生物量，代谢物产生和抗病性。虽然大多数这些协会还没有被表征，但有一些被认为是目前与寄主植物长期进化相互作用的表达。内生菌属于被认为参与更亲密相互作用的微生物，因为它们可以进入植物内部而不引起疾病。发现种子内生菌与不同植物的表面灭菌种子相关，表明土壤和种子都可以成为幼苗的微生物来源。在种子

4、休眠期间，内生菌可以在种子内保持活力，从外部环境保护，直到种子萌发和分离渗出物；此时内生菌有机会启动大气层和新生幼苗的分化，因此在某些情况下进行积极的牛物相互作用。目前的证据表明，不同的种子内生菌能够通过生长素，1■氨基环丙烷J•竣酸酯脱氨酶或乙偶姻生产来刺激植物生长;固氮；或磷溶解等机制。另外，许多不同的种内生菌己经证明通过产生抗真菌化合物，毒素或水解酶来抑制不同的植物病原真菌。目前，有关种子内生物进入机制和种子群落组装的信息仍然很少，尽管在某些物种中，种皮已被指示为种子内牛菌居住的地点。传统上外部环境一直被认为

5、是种子内牛菌的天然来源，具有新颖的数据显示了通过上一代的接种的细菌通过接种的细菌高效率地定植种子。此外，也有证据表明植物相关细菌应被视为通过与跨越植物世代的微生物群体传播概念相容的机制而产生的种子内生菌的来源。因此，植物内生真菌在种子中的繁殖应该被认为是一种精细的适应机制，以保持一段时间以植物・微生物相互作用为特征的伙伴关系。尽管种子内牛菌很可能是遗传的，并为植物提供初始接种物，可以有益于植物健康，那些细菌仍然代表植物微生物组中较少探索的部分。由于表面灭菌种子的内生菌分离经常导致每粒种子的细菌数量很低，尽管种属差异

6、很大(Mundt和Hinkle,1976),但种子中存在的微生物历史上仅被归为几乎没有相关性植物。然而，最近，种子内生菌的生态相关性己经被认识和强调，因为在整个进化发育过程中已经证明了在相同植物家族内的物种的种子中保存这些细菌。到目前为止，已经在25种不同的植物物种中鉴定了来自4个不同门的131个细菌属，这些物种通常具有农业意义。豆科植物是由700多种植物属组成的一个主要群体，具有广泛的地理分布■由于通过与根瘤菌的相互作用及其经济相关性而具有固氮能力，因此一直是深入研究的焦点。迄今为止，仅有少数豆科植物种子内生菌已

7、被探索。在阿根廷，苜蓿种植面积近600万公顷，主要用作动物饲料。最近在不同土壤中生长的植物的叶，茎和根瘤中研究了苜蓿植物中的微生物组，以便研究土壤细菌群落与相应内生菌物种的结果之间的相关性。除了Handelsman和Brill(1985)的早期工作报道了从苜蓿种子微生物组的表面消毒的种子牛长的植物根部分离成团泛菌(以前的草生欧文氏菌)。为了描述苜蓿种子微生物的特征，在这里报道的工作中，我们已经对种子内生菌进行了详尽的基于文化的搜索，以表征它们的多样性和主要的表型性状。2.方法2.1紫花苜蓿种子的来源和表面灭菌阿根廷

8、IMYZAINTACastelar公司提供了六种不同品种苜蓿(苜蓿)的种子。本研究所用的6个品种为:2010年收获的S(SuperMonarca)和C(GAPP810+),B(GAPP909+),F(F401Y),D(F301Y)和G(F111X)均在2013年收获。种子在阿根廷当地生产，由IMYZA-INTA-Castelar收获，并在室温(约25°C)下